深圳市耐多药结核分枝杆菌耐药基因突变特征分析

目的 利用全基因组序列分析方法研究深圳市耐多药结核分枝杆菌(MDR-MTB)的耐药基因突变类型特点,为耐药结核病的快速分子检测提供依据。方法 对2013—2017年深圳市慢性病防治中心及各区慢性病防治院门诊收集的所有449株MDR-MTB临床分离株进行全基因组测序,经与结核分枝杆菌标准菌株(H37Rv)基因组模板序列比对后获得447株满足分析要求的全基因组测序菌株。每株菌株经单核苷酸多态性(SNP)鉴定后与H37Rv各基因型和亚型的特异性突变和对11种抗结核药品已知的耐药基因突变进行比对,获得各菌株独属的基因型或亚型和耐药基因突变,并分析不同药品耐药基因中的主要耐药突变类型不同基因型或亚型间的相关性。结果 447株MDR-MTB中全基因组测序结果显示,432株(96.6%)发生基因突变,MTB对11种药品主要的耐药突变类型分别为katG-315-S/T[INH, 81.7%(353/432)]、rpoB-450-S/L[RFP, 59.7%(258/432)]、rpsL-43-K/R[Sm, 66.0% (198/300)]、embB-306-M/V[EMB, 35.5% (94/265)]、pncA启动子-11-T/C[PZA, 8.9% (11/123)]、gyrA-90-A/V [Ofx, 31.5% (39/124)]、rrs-1401-A/G[Am,48.1% (25/52)]、rrs-1401-A/G [Cm, 100.0% (27/27)]、rrs-1401-A/G [Km, 84.4% (27/32)]、inhA-15-C/T[Eto, 84.2% (48/57)]、thyA-75-H/N[PAS, 31.3% (10/32)],且发现存在2种及2种以上联合突变者有对INH、RFP、EMB和Sm耐药的菌株。深圳市MDR-MTB菌株的3个基因型为L1[0.4%(2/447)]、L2[84.6% (378/447)]和L4[15.0%(67/447)]型,其中L2型又分为3个亚型[L2.1型:1.9%(7/378)、L2.2型: 37.0%(140/378)、L2.3型: 61.1%(231/378)]。突变类型为katG-315-S/T、rpsL-43-K/R和embB-306-M/V在L2型菌株中的突变率[分别为79.6%(301/378)、50.5%(191/378)、23.0%(87/378)]明显高于L4型菌株[分别为61.2%(41/67)、10.4% (7/67)、10.4% (7/67)](χ ²值分别为10.874、37.021、5.396,P值分别为0.001、0.000、0.020),且PAS耐药突变类型folC-43-I/T和thyA-75-H/N仅出现在L2型菌株中;其中katG-315-S/T在L2.2型菌株中突变频率[88.6%(124/140)]高于L2.3型[74.5%(172/231)](χ ²=10.764,P=0.000),而inhA-15-C/T(INH)、rpoB-450-S/L、rpsL-43-K/R和inhA-15-C/T(Eto) 在L2.3型菌株中的突变频率[分别为8.2% (19/231)、61.9%(143/231)、 59.3% (137/231)、15.6% (36/231)]明显高于L2.2型[分别为2.9% (4/140)、49.3% (69/140)、37.9% (53/140)、3.6% (5/140);χ ²值分别为4.319、5.668、16.053、12.797,P值分别为0.038、0.017、0.000、0.000)]。结论 深圳市MDR-MTB菌株中11种药品耐药基因主要突变类型分别为katG-315-S/T、rpoB-450-S/L、rpsL-43-K/R、embB-306-M/V、pncA启动子-11-T/C、gyrA-90-A/V、rrs-1401-A/G、inhA-15-C/T、thyA-75-H/N;基因型为L1、L2和L4型,以L2.2型、L2.3型和L4型为主。     

补肾活血汤联合化疗对三阴性乳腺癌骨转移患者免疫功能及生活质量的影响

目的:探讨补肾活血汤联合NP化疗对三阴性乳腺癌(TNBC)骨转移患者生活质量和细胞免疫功能的影响。方法:将52例TNBC骨转移患者随机分为两组各26例。对照组患者采用NP方案化疗(长春瑞滨+顺铂),治疗组患者在对照组基础上加用补肾活血汤治疗,均治疗2周期。观察两组患者治疗前后QLQ-C30评分、CD3~+、CD4~+、CD8~+、CD4~+/CD8~+水平的变化、治疗过程中不良反应发生情况。结果:治疗后治疗组QLQ-C30评分明显低于对照组(P0.05);治疗组治疗后CD3~+、CD4~+、CD4~+/CD8~+的水平明显优于对照组(P0.05),CD8~+水平低于对照组(P0.05);治疗组各项不良反应发生率均低于对照组(P0.05)。结论:补肾活血汤联合化疗治疗TNBC骨转移患者疗效确切,可显著提高患者生活质量,改善患者免疫功能,减轻化疗毒副反应。     

新型吡咯烷-查尔酮类衍生物的设计、合成及抗宫颈癌活性研究

目的 设计、合成系列新型氮杂查尔酮类衍生物并研究其抗宫颈癌活性和作用机制。方法 以甘草查尔酮为先导化合物,以VEGFR-2和P-gp为靶点,采用活性亚结构拼接原理,设计并合成一系列新型查尔酮类衍生物,利用¹H-NMR、¹³C-NMR和HR-MS对结构进行表征。采用MTT、ELISA、联合顺铂用药、Western blotting和分子对接试验,初步评价了目标化合物对宫颈癌和顺铂耐药宫颈癌细胞的增殖抑制活性及作用机制。结果 化合物7h具有一定的抗肿瘤活性和逆转顺铂耐药作用,对VEGFR-2及下游PI3K/AKT信号通路蛋白的磷酸化具有一定的抑制作用,并在0.5,1.0,1.5μmol·L^-1浓度内对P-gp蛋白表达量与空白组相比无显著性差异。结论 化合物7h的抗宫颈癌活性和逆转顺铂耐药作用,可能与其抑制了VEGFR-2和P-gp靶点有关。     

深圳市耐多药结核患者二线药物耐药及相关因素分析

目的分析深圳市耐多药患者(MDR-TB)二线药物耐药状况以及其相关危险因素。方法选择2015—2017年深圳市耐药监测项目中的MDR-TB作为研究对象,采用比例法检测所有菌株的二线药物(氧氟沙星、阿米卡星、卡那霉素、卷曲霉素、对氨基水杨酸钠和丙硫异烟胺)敏感性,并通过单因素和多因素分析MDR-TB二线药物耐药性的危险因素。结果 209例MDR-TB患者中,有96例(45.93%)至少对1种二线药物产生耐药,其中氧氟沙星的耐药率最高,为30.62%(64/209),有4例为广泛耐药患者(XDR-TB)。多因素分析结果显示,45～59岁为MDR-TB二线药物耐药的危险因素(OR=2.125,95%CI:0.580～7.783,χ~2值=15.325,P值=0.0010.05)。结论深圳市MDR-TB患者中二线药物耐药情况严重,45～59岁为二线药物耐药的相关危险因素。     

补肾活血汤对内分泌治疗乳腺癌术后患者生活质量的影响

目的:观察补肾活血汤对内分泌治疗乳腺癌术后患者生活质量的影响。方法:将符合纳入标准的乳腺癌术后患者80例随机分为治疗组和对照组各40例,2组均采用内分泌治疗,治疗组同时服用补肾活血汤,对照组服用安慰剂,连续治疗3个月后评价疗效。结果:治疗组总有效率为52.5%,优于对照组的27.5%(P0.05);治疗组治疗后社会/家庭、功能、生理、情感情况与附加关注5个方面的FACT-B量表评分均较治疗前提高(P0.05),对照组治疗后仅附加关注1项评分较治疗前有所提高(P0.05);治疗后治疗组在改善社会/家庭、功能、生理、情感情况方面均优于对照组(P0.05)。结论:补肾活血汤能够有效改善内分泌治疗乳腺癌术后患者的生活质量。     

胆酸-羟丙基-β-环糊精包合物的物相鉴别及体外鼻黏膜渗透评价

目的 通过羟丙基-β-环糊精包合胆酸,对包合物进行物相鉴别,提高胆酸的鼻黏膜渗透性。方法 采用相溶解度法、扫描电子显微镜法(SEM)、傅立叶变换红外光谱法(FT-IR)、差示扫描量热法(DSC)、核磁共振波谱法(NMR)对包合物进行物相鉴别;采用体外鼻黏膜渗透试验评价羟丙基-β-环糊精对胆酸鼻黏膜渗透性影响。结果物相鉴别证明包合物形成,相溶解度曲线为A_L型,包合常数K=564.30 L/mol;采用羊鼻黏膜进行渗透试验,胆酸-羟丙基-β-环糊精包合物的渗透系数和稳态流量分别为胆酸的1.46、144倍。结论 采用羟丙基-β-环糊精包合胆酸,形成了胆酸-羟丙基-β-环糊精包合物,并能提高胆酸鼻黏膜渗透性。     

补肾活血汤对乳腺癌骨转移模型裸鼠Bax/Bcl-2及cleaved Caspase-3蛋白表达的影响

目的：观察补肾活血汤对乳腺癌骨转移模型裸鼠细胞凋亡及B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)相关X蛋白(Bax)/Bcl-2及切割型胱天蛋白酶-3(cleaved Caspase-3)蛋白表达的影响,探讨其抑制骨质破坏的作用机制。方法：将30只BALB/c雌性裸鼠随机分成空白组6只、造模组24只。将乳腺癌细胞株4T1经裸鼠右下肢胫骨注射构建乳腺癌骨转移模型,将成膜裸鼠随机分为模型组、补肾活血汤组、唑来膦酸组、联合用药组,每组6只。补肾活血汤组予以补肾活血汤中药灌胃36.67 g·kg^-1,每日1次,唑来膦酸组予以皮下注射100μg·kg^-1,每周2次,联合用药组给予相同剂量补肾活血汤组灌胃联合唑来膦酸皮下注射,正常组和模型组予以等体积蒸馏水灌胃,连续14 d,次日脊柱脱臼法处死,观察裸鼠一般情况及体质量变化,截取每组裸鼠右下肢,称重,X射线扫描及苏木素-伊红(HE)染色观察裸鼠骨组织形态学变化、原位末端标记法(TUNEL)检测裸鼠骨组织凋亡情况,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测裸鼠骨组织中Bax/Bcl-2及cleaved Caspase...     

肝白血病因子融合基因阳性急性淋巴细胞白血病1例报告

肝白血病因子(E2A-HLF)是由t(17；19)(q22；p13)易位产生的融合基因，多见于B淋巴细胞白血病，患者常合并高钙血症及凝血功能异常，虽经规范治疗，但仍易早期复发，预后差。本文报道1例E2A-HLF融合基因阳性急性淋巴细胞白血病(ALL)。     

用差示扫描量热法测定葡萄糖酸锌的热稳定性

用差示扫描量热法(DSC)测定葡萄糖酸锌的热稳定性,用Kissinger方程和Ozawa方程计算反应活化能,分别为96.9和93.6 kcal·mol~(-1)。