基于PI3K/PDK1/Akt信号通路研究丹参-红花药对对寒凝血瘀型心肌缺血大鼠的保护作用及机制

目的 研究丹参-红花药对对异丙肾上腺素（isoprenaline hydrochloride,ISO）诱导的心肌缺血大鼠的保护作用及其机制。方法 大鼠随机分为对照组、模型组、复方丹参滴丸（73 mg/kg）组和丹参-红花低、中、高剂量（4、8、16 g/kg）组,给予相应药物干预7 d。于第6天开始ig药物1 h后,大鼠于0℃的冰浴中寒冷刺激4 min,sc ISO(85 mg/kg),连续2 d。采用2,3,5-氯化三苯基四氮唑（2,3,5-triphenyltetrazolium chloride,TTC）染色法测定各组大鼠心肌梗死面积;采用TUNEL法检测各组大鼠心肌细胞凋亡情况;采用苏木素-伊红（HE）染色法观察各组大鼠心肌组织病理变化;采用ELISA法检测各组大鼠血浆中肌酸激酶同工酶（creatine kinase,CK）、天冬氨酸转氨酶（aspartate aminotransferase,AST）、乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase,LDH）、CK-肌红蛋白（myoglobin,MB）活性及心肌肌钙蛋白-Ⅰ(cardiac troponin-Ⅰ,CTn...     

基于肠道菌群的丹参-红花药对抗心肌缺血机制探讨

目的 探讨丹参-红花药对抗心肌缺血的机制.方法 将60只SD雄性大鼠随机分为空白对照组(A组,等体积纯净水)、模型组(B组,等体积纯净水)、复方丹参滴丸组(C组,73 mg/kg)及丹参-红花低、中、高剂量组(D1组、D2组、D3组,原药材4,8,16 g/kg),各10只,各组大鼠灌胃给予相应药物或纯净水,每天1次,...     

基于网络药理学和实验验证的丹参-红花药对治疗心肌缺血的作用机制探讨

目的 通过网络药理学和动物实验探究丹参-红花药对治疗心肌缺血的潜在作用和机制。方法 检索中药系统药理学数据库与分析平台（TCMSP）和文献手动补充确定丹参-红花的活性成分及治疗心肌缺血靶点。以“心肌缺血”及“急性心肌缺血”为关键词,在CTD、DisGeNET、GeneCards和OMIM数据库中检索疾病的潜在靶点。利用Venny 2.1.0将筛选得到的有效化学成分靶点与疾病靶点进行交集,确定丹参-红花药对治疗心肌缺血的作用靶点。将交集靶点信息上传至STRING v11.0,构建活性成分-靶点网络及蛋白质相互作用网络（PPI）。通过DAVID数据库对丹参-红花治疗心肌缺血的靶点进行基因本体（GO）功能和京都基因与基因组百科全书（KEGG）通路的富集分析。40只SD雄性大鼠,根据体质量随机分成4组,每组10只,即对照组、模型组、复方丹参滴丸（73 mg·kg^-1·d^-1）组、丹参-红花（生药量16 g·kg^-1·d^-1）组。对照组和模型组大鼠每天ig等量0.9%氯化钠溶液,给药组ig相应剂量的药物,每天1次,共7 d。于第6天,除对照组外,其余各组给药1 h后sc异丙肾上腺素（ISO,85 mg·kg^-1）,连续2 d造模。HE染色观察各组大鼠心肌组织病理变化;蛋白免疫印迹法检测各组大鼠心肌组织磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（p-mTOR）、磷酸化转录激活蛋白3（p-STAT3）、缺氧诱导因子1α（HIF-1α）、血管内皮生长因子A（VEGFA）、血小板衍生生长因子A（PDGFA）和碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）蛋白表达水平。结果 网络药理学筛选得到丹参-红花药对治疗心肌缺血的活性成分91个,靶点246个。PPI网络结果显示主要靶点包括STAT3、MAPK1、JUN、RELA、MAPK3、AKT1、SRC、APP、TNF、PIK3CA、CXCL8、KNG1、IL6、VEGFA、MAPK14、HSP90AA1、MAPK8、EGFR、FOS和IL2等。主要靶点相关的通路涉及血管生成（如HIF-1信号通路和VEGF信号通路）、炎症反应（如NF-κB信号通路和TNF信号通路）和细胞凋亡（如细胞凋亡信号通路和p53信号通路）等。动物实验HE染色结果表明,对照组大鼠心肌细胞正常;模型组大鼠心肌纤维肿胀且有断裂,心肌细胞增宽,局部有明显水肿、渗出、炎性细胞浸润;复方丹参滴丸组与模型组大鼠比较,心肌纤维排列略微紊乱且较窄,病理改变程度有所减轻。丹参-红花组大鼠的心肌纤维排列整齐,细胞形态结构完整,心肌纤维肿胀轻,无毛细血管扩张,接近正常心肌形态。蛋白质免疫印迹检测结果表明,与对照组比较,模型组大鼠心肌组织中HIF-1α、VEGFA、PDGFA和bFGF的蛋白表达水平显著升高（P＜0.05、0.01）,p-mTOR和p-STAT3的蛋白表达水平显著下降（P＜0.05、0.01）。与模型组比较,丹参-红花显著上调了p-mTOR、p-STAT3、HIF-1α、VEGFA、PDGFA和bFGF的蛋白表达水平（P＜0.05、0.01）。结论 丹参-红花可能通过上调与血管生成密切相关的蛋白水平来促进急性心肌缺血模型大鼠缺血心肌组织的血管生成,从而改善其缺血性损伤。     

丹参⁃红花药对对心肌缺血大鼠CYP450酶活力和mRNA表达的影响

目的探讨丹参?红花药对对心肌缺血大鼠CYP450酶活力和mRNA表达的影响。方法大鼠随机分为模型组、空白对照组、丹参?红花(3∶1)组、丹参?红花(2∶1)组、丹参?红花(1∶1)组,连续给药15 d后麻醉大鼠,取出肝脏,每组10只用于检测3种探针底物的浓度,其余10只用于实时荧光定量PCR(RT?PCR)测定CYP1A2、CYP2E1和CYP3A2 mRNA表达。结果与模型组相比,丹参?红花药对(3∶1,2∶1)组大鼠非那西丁、氯唑沙宗、咪达唑仑的代谢消除率降低(P<0.05);与空白组比较,模型组大鼠CYP1A2、CYP2E1和CYP3A2 mRNA表达水平升高(P<0.05)。与模型组相比,丹参?红花药对(3∶1,2∶1)组大鼠CYP1A2、CYP2E1和CYP3A2 mRNA表达水平降低(P<0.05)。结论丹参?红花药对(3∶1,2∶1)可下调模型大鼠CYP1A2、CYP2E1和CYP3A2 mRNA表达,显著抑制酶活力,在3∶1比例下作用最强。