Lactuside B增加大鼠脑缺血后海马和纹状体GRP78 mRNA的表达

目的:探讨高翅果菊提取物Lactuside B对大鼠脑缺血后海马和纹状体GRP78mRNA表达的影响。方法:清洁Ⅱ级SD雄性大鼠,体质量280～320g,随机分为6组,即:模型组、假手术组、阳性药物对照组(尼莫地平1mg·kg-1)、Lactuside B12.5、25和50mg·kg-1组,每组8只。采用大鼠大脑中动脉阻塞法复制脑缺血再灌注损伤模型,所有大鼠均阻塞2h再灌注。各组动物于再灌注后给予腹腔注射相应的实验药物(模型组、假手术组动物给予等体积的纯化水),bid,给药1d和3d后分别处死各组的4只动物取脑备用。神经缺失症状评分法进行神经功能测定;RT-PCR技术分别检测大鼠海马和纹状体不同时间段GRP78mRNA的表达。结果:给药1d和3d后,Lactuside B各剂量组动物的神经行为学评分均降低,与模型组比较均有显著性差异(P<0.05或P<0.01);Lactuside B各剂量组动物海马和纹状体的GRP78mRNA表达均明显增多,与模型组比较差异有显著性(P<0.05或P<0.01);除用药1d时纹状体GRP78mRNA的表达在各组间有量效关系外,其余各组的高剂量组作用较差;海马的Lactuside B各剂量组GRP78mRNA的表达优于阳性对照组(P<0.05或P<0.01),而纹状体只有用药3d时此种作用才明显。结论:Lactuside B的抗脑缺血作用与其持续上调海马和纹状体的GRP78mRNA表达有关。     

c-erbB-2的表达与非小细胞肺癌多药耐药的关系

目的探讨c-erbB-2基因表达和非小细胞肺癌的化疗耐药性的关系,初步明确c-erbB-2基因在介导非小细胞肺癌(NSCLC)耐药机制中的作用。方法应用MTT法对54例未经化疗的非小细胞肺癌进行体外化疗药物敏感性测试,观察非小细胞肺癌分别对环磷酰胺、阿霉素、顺铂+氟尿嘧啶三种单药和联合用药方案耐药情况;用免疫组织化学方法检测c-erbB-2基因的表达,并对其表达情况与对应的化疗耐药性进行相关分析。结果54例NSCLC化疗敏感性检测结果显示:32例(59.3%)对环磷酰胺耐药,31例(57.4%)对阿霉素耐药,25例(46.3%)对顺铂+氟尿嘧啶耐药。其中,11例(20.4%)对3种用药均敏感,16例(29.6%)对3种用药均耐药,其耐药性与组织学类型和分化程度无关(P>0.05)。c-erbB-2在54例非小细胞肺癌中总的阳性表达率为53.7%,其中鳞癌和腺癌相比c-erbB-2的表达无显著性差异(P>0.05)。c-erbB-2的表达与3种化疗用药的耐药性均呈显著正相关(P<0.05),并且不同表达程度间也有显著差异性(P<0.05)。结论c-erbB-2在非小细胞肺癌中有较高的阳性表达,其参与介导了NSCLC固有化疗耐药的机制。     

Lactuside B对脑缺血再灌注损伤后大鼠海马和纹状体神经生长因子mRNA表达的影响

目的探讨高翅果菊提取物Lactuside B(LB)对大鼠脑缺血/再灌注损伤海马和纹状体神经生长因子mRNA表达的影响。方法 SD雄性大鼠,随机分为6组(8只/组)即模型组、假手术组、阳性对照组、LB高剂量、中剂量和低剂量组。采用大脑中动脉阻塞2 h再灌注24 h和72 h动物模型、各组在相应时间点处死一半动物,以RT-PCR技术分别检测大鼠海马和纹状体不同时间段NGF mRNA的表达情况。结果模型组NGFmRNA在海马和纹状体表达明显增多,再灌注72 h海马和纹状样NGF mRNA表达显著下降;在海马,用药后LB各剂量组NGF mRNA表达增多,与模型组比较有显著差异(P<0.01);与阳性对照组比较中、低剂量组有显著差异(P<0.01),且中、低剂量组用药72 h时NGF mRNA表达较多,与用药24 h比较有显著差异(P<0.05)。在纹状体,LB各剂量组NGF mRNA表达同样增加,与模型组比较有显著差异(P<0.01),与阳性对照组比较其低、中、高剂量组均有显著差异(P<0.01或P<0.05),LB用药72 h时中、低剂量组NGF mRNA表达更多,与用药24 h比较有显著差异(P<0.05)。结论 LB对大鼠海马和纹状体的NGF基因产生了较大的影响,其抗脑缺血再灌注损伤的作用机制可能与LB能够上调二部位的NGF mRNA有关。     

Lactuside B对大鼠脑缺血再灌注损伤后大脑皮质和海马CHOP mRNA表达的影响

 目的 探讨lactuside B对脑缺血再灌注损伤大鼠海马和纹状体转录因子CHOP mRNA表达的影响。方法 SD雄性大鼠,280~320 g,随机分为缺血再灌24 h假手术组、模型组、阳性对照组、lactuside B 12.5、25、50 mg·kg^-1组和缺血再灌72 h组,共12组,每组4只。采用大鼠大脑中动脉缺血再灌注损伤模型,选取神经缺失症状评分为1~3分的动物入组, 各组动物均按5 mL·kg^-1的容积腹腔注射相应的实验药物。大鼠脑缺血2 h, 于再灌注24和72 h后分别处死动物,逆转录聚合酶链反应技术检测大鼠脑海马和纹状体组织不同时间点CHOP mRNA的表达。结果 不同再灌时间的模型组动物神经缺失症状评分增高,与假手术组相比有显著性差异（P<0.01）;用药后阳性对照组和lactuside B各剂量组的神经缺失症状评分均下降,与模型组比较有显著性差异（P<0.01）。另外,结果显示3个剂量组（12.5、25和50 mg·kg^-1）的lactuside B均能降低大鼠大脑皮质与海马CHOP mRNA的表达,与模型组比较有显著性差异（P<0.05,P<0.01）,其多数剂量组的作用优于阳性对照药尼莫地平（P<0.01）。总体上各组存在较好的量效关系,但只有中剂量组有较好的时效关系。结论 Lactuside B的抗脑缺血作用与其下调大鼠大脑皮质和海马的CHOP mRNA表达有关,有一定的研发价值。     

蓝萼香茶菜乙素对AGZY细胞周期及凋亡的影响

目的:研究蓝萼香茶菜乙素对AGZY细胞周期及细胞凋亡的影响。方法:MTT法测定蓝萼香茶菜乙素对AGZY的细胞毒作用;PI染色、流式细胞术观察蓝萼香茶菜乙素对AGZY细胞周期及细胞凋亡的影响。结果:蓝萼香茶菜乙素对AGZY细胞的IC50为0.11mmol/L,且随着蓝萼香茶菜乙素剂量增加对AGZY细胞抑制作用增强;蓝萼香茶菜乙素可以降低AGZY细胞G2/M期细胞数量,阻止细胞分裂。结论:蓝萼香茶菜乙素可阻滞AGZY细胞的生长,阻滞细胞进入G2/M期,并诱导AGZY细胞凋亡。     

黄芪对N-甲基-N-亚硝脲诱导大鼠光感受器细胞凋亡的预防途径

背景:视网膜色素变性是非炎症性、双侧进行性的视网膜变性,其特征是光感受器细胞因发生凋亡而丢失,最终导致失明。中药黄芪在阻止该病的进程上显示出了良好的前景。目的:观察黄芪对N-甲基-N-亚硝脲致SD大鼠视网膜损伤的保护作用。设计:随机对照动物实验。单位:新乡医学院药学院。材料:实验于2004-03/12在中山大学中山眼科中心药理实验室完成。雌性SD大鼠114只,由中山大学中山医学院动物中心提供,N-甲基-N-亚硝脲为美国Sigma公司产品,黄芪注射液为成都地奥九泓制药厂生产(生产批号:国药准字Z99060535,2mL/支,主要成分为黄芪)。方法:选用雌性SD大鼠114只,30只用于视网膜层形态学分析;30只用于细胞凋亡检测;54只用于胞核内核因子κBp65活性的检测。采用抽签法随机分组,每组6只。于大鼠生后47d,分别经腹腔注射不同剂量的黄芪(2.5,5和10g/kg),1次/d,除对照组外,其余组的大鼠同时于生后50d腹腔注射N-甲基-N-亚硝脲60mg/kg。在N-甲基-N-亚硝脲处理不同时间后处死动物,取眼球,视网膜形态学分析测量周边视网膜的总厚度,TUNEL试剂盒检测光感受器细胞凋亡,转录因子试剂盒分析核因子κBp65的活性。主要观察指标:各组视网膜厚度、凋亡指数和胞核内核因子κBp65的活性比较。结果:黄芪可剂量依赖性地显著增加周边视网膜总厚度和降低N-甲基-N-亚硝脲引起的光感受器细胞凋亡指数。黄芪注射液10g/kg还可时间依赖性地上调视网膜细胞胞核内核因子κBp65的活性。但其对N-甲基-N-亚硝脲引起的中心视网膜损伤无明显的保护作用。结论:黄芪通过上调视网膜细胞胞核内核因子κBp65的活性,抑制光感受器细胞凋亡,从而部分地保护N-甲基-N-亚硝脲引起的视网膜损伤。     

2001—2010年北京市、上海市和广东省中药专利分析

目的:选择北京市、上海市和广东省3个代表性地区,分析2001—2010年其中药专利申请数量和专利申请人数量,探讨中国中药专利的发展和分布情况。方法:查询中国知识产权官方网站,获取北京市、上海市和广东省2001—2010年每年中药专利申请数量和专利权利人分布情况。结果:2001—2010年北京市、上海市和广东省中药专利申请总量由多至少的排名是北京市、上海市和广东省;3地区中药专利申请总量和发明专利申请数量在2003—2006年逐渐上升并达到高峰,2006—2010年呈现下降趋势;中药专利申请人主要集中在个人和工矿企业。科研院所、大专院校和工矿企业中药专利申请数量逐年上升,个人中药专利申请数量呈下滑趋势。结论:建议科研院所、大专院校和工矿企业加大对中医药的研发投入,提升对中医药知识产权保护意识,促进中药科学成果生产力的转化,加快中医药的国际化进程。     

nmhaFGF和haFGF 对放线菌素D诱导的人视网膜色素上皮细胞凋亡的保护作用

目的 探讨非促分裂型人酸性成纤维细胞生长因子(non-mitogenic human acidic fibmblast growth factor,nmhaFGF)和 haFGF对放线菌素D诱导的人视网膜色素上皮(human retinal pigment epithelium,hRPE)细胞凋亡的保护作用,同时探讨2种浓度放线菌素D诱导hRPE细胞凋亡模型的复制条件.方法 用0.25 mg·L-1和0.50 mg·L-1放线菌素D诱导hRPE细胞凋亡,用琼脂糖凝胶电泳检测2种浓度放线茵素D诱导hRPE细胞DNA断裂情况,并用流式细胞仪检测放线菌素D诱导hRPE细胞的凋亡率,确定诱导hRPE细胞凋亡的条件,分另q以0.02 mg·L-1、0.06 mg·L-1、0.18 mg·L-1、0.54 mg·L-1和1.62 mg·L-1的nmhaFGF和haFGF预作用于hRPE细胞24 h,并设置正常细胞组和凋亡模型细胞组,观察nmhaFGF和haFGF对hRPE细胞凋亡的作用.结果 0.25 nag·L-1和0.50 mg·L-1放线菌素D诱导hRPE细胞凋亡16 h后细胞凋亡率分别为32.68%和53.27%.琼脂糖凝胶电泳结果显示0.25 mg·L-1放线菌素D诱导细胞凋亡条带清晰,而0.50 mg·L-1放线茵素D诱导hRPE细胞凋亡条带模糊,因此0.25 mg·L-1放线菌素D作用hRPE细胞16 h是诱导hRPE细胞凋亡的最佳条件.在nmhaFGF各剂量组中,随着nmhaFGF浓度升高,hRPE细胞凋亡率明显降低,其中1.62 mg·L-1剂量组细胞凋亡率最低,为(11.49±0.50)%;相同浓度haFGF各剂量组细胞凋亡率也呈现不同程度的降低,但随着haFGF剂量升高,凋亡率下降的趋势不如nmhaFcF剂量组明显,在haFGF剂量组中,1.62 mg·L-1剂量组细胞凋亡率最低,为(14.35±1.02)%,nmhaFGF和haFGF对hRPE细胞凋亡率的下降作用经比较差异无统计学意义.结论 haFGF和nmhaFGF都可以发挥对hRPE细胞凋亡的保护作用.该保护作用可能是通过发挥其非促分裂活性实现的.     

Nodosin对HepG2细胞株的增殖抑制作用及对Bcl-2和Bax表达的影响

 目的:研究传统中药提取物nodosin对体外培养的人肝癌细胞株HepG2的增殖抑制作用,并探讨其对Bcl-2和Bax表达的影响。方法:将不同浓度组（1.25、2.5、5、10和20 μmol/L）nodosin预作用于HepG2细胞24 h,用倒置显微镜观察nodosin对细胞形态学的影响,采用MTT法检测细胞生长抑制率,用流式细胞术检测细胞凋亡率和Bcl-2、Bax的表达。结果:形态学结果显示,随着nodosin剂量的增加,细胞皱缩和漂浮细胞数量增加,流式细胞术检测结果显示随着nodosin药物浓度的增加,HepG2细胞凋亡率增加。Bax的表达随着nodosin剂量的增加逐渐增加, Bcl-2的表达逐渐减少。结论: Nodosin能抑制HepG2细胞株的增殖,呈明显的剂量依赖性,对HepG2细胞的抑制作用是通过增加Bax的表达以及降低Bcl-2的表达诱导细胞凋亡实现的。