筋骨草属药材中哈巴苷和乙酰哈巴苷的含量测定

目的:分析筋骨草属易混淆药材中活性成分哈巴苷和乙酰哈巴苷的含量差异。方法:采用高效液相色谱法,Kromasil C_(18)色谱柱(4.6mm×250mm,5μm);流动相:乙腈-水(12∶88);流速:1.0m L/min,检测波长:207nm。结果:哈巴苷在0.0688~0.8262mg/m L(r=0.9991)范围内线性关系良好,乙酰哈巴苷在0.0538~0.8608mg/m L(r=0.9994)范围内线性关系良好;哈巴苷与乙酰哈巴苷的平均加样回收率分别为98.48%和98.91%,RSD值分别为2.17%和1.60%。结论:该方法简便、准确、重复性好,可作为筋骨草属药材的质量控制方法。3种筋骨草属植物中,筋骨草所含哈巴苷和乙酰哈巴苷含量最低,金疮小草中乙酰哈巴苷含量最高,紫背金盘中哈巴苷含量最高。     

茯芩菌液态发酵合成茯芩三萜的实验研究

目的:探索茯苓菌液态发酵合成茯苓三萜的工艺条件.方法:从碳源、氮源、金属离子、辅助因子及初始pH角度对茯苓菌液态发酵合成茯苓三萜的过程进行系统分析,以确定高效发酵工艺.结果:最佳碳源为葡萄糖、氮源为玉米浆粉、添加金属离子ZnSO4、MnSO4、CuSO4或FeSO4以及辅助因子2-硫代巴比妥、初始pH范围为5～6.结论:通过培养基和发酵条件优化设计可显著提高茯苓三萜的合成效率.     

不同加工方法山银花药材中绿原酸、木犀草苷的含量测定

目的建立高效液相色谱法对不同加工方法山银花药材中绿原酸、木犀草苷2个指标性成分进行含量测定,确定山银花最佳加工方法。方法采用高效液相色谱法,色谱柱:Agi Lent C18(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相:乙腈-0.4%冰醋酸,梯度洗脱;流速:1 m L·min-1;检测波长:350 nm;柱温:25℃。结果不同加工方法山银花中绿原酸、木犀草苷含量有明显变化,其中低温烘干与杀青烘干山银花中绿原酸、木犀草苷含量较高。结论低温烘干法加工山银花外观质量最优,绿原酸、木犀草苷含量最高,应广泛推广应用。     

灰毡毛忍冬内参基因筛选和Mads-box家族基因AGL15的时空表达分析

目的筛选灰毡毛忍冬Lonicera macranthoides基因表达分析的内参基因,研究其Mads-box基因家族AGL15基因(Lm AGL15)的时空表达特性。方法克隆灰毡毛忍冬内参基因18 S r RNA、Ubiquilin、Actin和Efl-β的基因片段,评价了4个基因在不同部位叶、茎和花蕾,以及4个基因在灰毡毛忍冬生长不同时期的稳定性,筛选内参基因,分析Lm AGL15基因的时空表达特性。结果 18 S r RNA表达最稳定,适宜作为内参基因,叶片、茎的Lm AGL15基因相对表达量较低,花蕾相对表达量较高。花蕾不同发育时期,Lm AGL15的相对表达量呈现逐渐降低的变化,20 d后Lm AGL15的相对表达量最低,然后依次是花蕾初期(15 d)、青绿色花蕾期(10 d)、绿白色花蕾期(5 d)。结论 18 S r RNA是适宜的内参基因。叶片、茎和花蕾中,Lm AGL15的相对表达量差异明显。花蕾发育不同时期,Lm AGL15的相对表达量呈逐渐降低的变化,与花蕾开放变化规律相似。     

紫背金盘草中木犀草素的定性分析

目的：确定紫背金盘草中是否含有木犀草素,为紫背金盘草中活性成分的确定和药理作用的研究提供参考。方法：采用薄层色谱法和高效液相法。条件,色谱柱为KromasilC18（4.6 mm×250 mm,5μm）,流动相为甲醇-0.2%磷酸溶液（56∶44,pH3）;流速0.8 ml/min;进样量20μl;紫外检测波长254 nm;柱温25℃。结果：通过薄层色谱法和高效液相法可得出紫背金盘草中不含木犀草素。结论：木犀草素可能不是紫背金盘具有抑菌、抗感染、消肿止痛的活性成分。     

紫背金盘水提物和醇提物解热作用的研究

目的 研究紫背金盘水提物和醇提物的解热作用.方法 采用皮下注射干酵母溶液致大鼠发热模型,从肛门测量体温,观察紫背金盘水提物和醇提物对发热大鼠解热作用.结果 紫背金盘水提物和醇提物均能抑制酵母菌致热大鼠的发热趋势.其药剂是解热作用比阿斯匹林强,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01).结论 紫背金盘水提物解热作用效果更明显.     

逍遥抗癌解郁方对乳腺癌并发抑郁症小鼠海马神经元突触后致密蛋白95表达的影响

目的观察逍遥抗癌解郁方对乳腺癌并发抑郁症(BCRD)小鼠海马神经元突触后致密蛋白95(PSD95)的影响,探讨其对海马组织的可能保护机制。方法腋下注射4T1炎性乳腺癌细胞联合背部皮下注射皮质酮建立BCRD小鼠模型。随机分为模型组、紫杉醇组、紫杉醇+氟西汀组、逍遥抗癌解郁方组、紫杉醇+逍遥抗癌解郁方组,另取未造模BALB/c小鼠作为正常组。采用悬尾实验和强迫游泳实验检测小鼠抑郁样行为,HE染色观察小鼠海马和乳腺肿瘤病理变化,免疫组化染色和Western blot检测小鼠海马PSD95的表达。结果与正常组比较,模型组小鼠悬尾实验、强迫游泳实验不动时间显著增加(P0.01),海马结构损伤明显,PSD95表达水平显著降低(P0.01);给予逍遥抗癌解郁方干预后,模型小鼠悬尾实验、强迫游泳实验不动时间明显减少(P0.05),海马结构损伤得以恢复,PSD95表达显著升高(P0.01),联合紫杉醇出现肿瘤细胞大面积坏死。结论逍遥抗癌解郁方可改善BCRD小鼠抑郁症状,有效辅助化疗药物抑制乳腺肿瘤增殖,并通过上调突触可塑性相关蛋白PSD95的表达,保护海马组织。     

栀子过氧化物酶、酯酶同工酶的遗传多样性分析

目的 应用同工酶技术研究不同种及居群栀子的亲缘关系和遗传多样性.方法 采用聚丙烯酰胺凝胶不连续垂直板电泳系统,测定了12份不同居群栀子的过氧化氢酶(POD)、酯酶(EST)同工酶酶谱.结果 12份供试材料在2个同工酶系统中均有栀子物种的共同特征谱带,同时又蕴涵着丰富的多态性.结论 栀子居群间的遗传变异较大,而居群内部的分化程度很低.不同居群的栀子与种的特性和地理分布具有一定相关性.该结果为栀子的品种鉴定和合理利用提供了实验依据.     

三七注射液对兔缺血再灌注损伤的延迟预处理作用及信号机制研究

目的：研究三七注射液预处理时实验性兔缺血再灌注损伤的延迟保护作用及其部分信号转导机制。方法：采用心肌梗死面积、血浆乳酸脱氢酶（LDH）、肌酸激酶（CK）、天门冬酸氨基转移酶（AST）水平和组织匀浆液中丙二醛（MDA）含量，超氧化物歧化酶（Mn-SOD）活性作为心肌细胞受损指标，观察三七注射液（150mg／kg体重）预处理24h后时兔缺血再灌注损伤的保护作用及蛋白激酶C（PKC）、抑制荆Chelerythrine chloride（CTC）、酪氨酸激酶（TK）、抑制剂Genistein（GST）对三七注射液预处理作用的影响；并通过免疫组化（SP法）测定预处理24h后，nPKC-ε、核因子-κB（NF-κB）的表达情况。结果：三七注射液预处理能显著缩小缺血再灌注损伤心肌的心梗面积，减少血浆LDH、CK水平和组织匀浆液中MDA生成，并明显提高Mn-SOD活性，CTC、GST可完全取消这种心肌保护作用。三七注射液预处理还可明显增加nPKC-ε、NF-κB的表达，CTC能抑制此作用，但GST仅时NF-κB的表达增加有抑制作用。结论：三七注射液能够模拟缺血预处理延迟保护作用。其机制涉及PKC及TK信号转导途径。可能通过活化nPKC-ε，使下游靶蛋白TK磷酸化而激活，再诱导NF-κB的高度表达产生延迟预处理心肌保护作用。