肺癌细胞裂解物负载对树突状细胞分泌的exosome诱导抗肿瘤作用的影响

目的为制备高效的胞外体（exosome）肿瘤疫苗提供理论依据。方法用细胞因子诱导培养树突状细胞（DC）,将肺癌细胞裂解物负载DC,提取exosome用exosome活化T细胞（负载组）,以未负载DC的exosome（未负载组）及肺癌细胞裂解物负载DC（DC组）活化的T细胞为对照,MTr法检测三组肺癌细胞的杀伤率。结果exosome中有HSP70、HLA及CEA表达。活化T细胞／肺癌细胞为25：1、10：1、5：1时负载组杀伤率均明显高于未负载组及DC组（P均〈0．05）。结论肺癌细胞裂解物负载能增强DC分泌的exosome诱导的抗肿瘤作用;本研究为制备高效的exosome肿瘤疫苗提供了理论依据。     

白细胞介素18基因转染的肺癌细胞对树突状细胞免疫特性的影响

目的：研究IL-18基因转染的肺癌细胞对树突状细胞（DC）表型和免疫活性的影响。 方法：构建含IL-12 P40信号肽序列的分泌型人IL-18表达载体并转染NCI-H460肺癌细胞。从人外周血诱导DC，分为未转染组（NT）、空载体组（PV）、基因转染组（GT）和单纯DC组（PD），用流式细胞仪分别测定未经转染肺癌细胞、空载体转染细胞及基因转染细胞刺激的DC和单纯DC表面CD54、CD80、CD83及CD86的表达。用MTT法测定上述4组DC刺激T细胞增殖的作用。用ELISA法测定上述4组DC培养上清中IL-12的表达量。 结果：分泌型IL-18表达载体酶切及测序结果与预期结果一致。IL-18转染细胞表达IL-18融合基因及18 kD蛋白。GT组DC表面分子的表达、刺激T细胞增殖的作用及IL-12分泌量均高于其余3组。 结论：IL-18基因转染的肺癌细胞可促进DC表面分子表达，增强DC免疫刺激活性及其IL-12的分泌。     

平喘冲剂治疗小儿哮喘临床观察

为观察平喘冲剂治疗小儿哮喘的临床疗效,将196例患儿随机分为治疗组100例口服中药平喘冲剂,对照组96例静脉滴注青霉素、氨茶碱,疗程1周,观察治疗前后喘憋、咳嗽、紫绀、哮鸣音、肺功能、肺阻抗血流的变化。结果：治疗组总有效率为98．00％,对照组总有效率为93．75％,各项检测指标治疗组均优于对照组。提示平喘冲剂具有平喘止咳、化痰通瘀的作用。     

羟基喜树碱两种不同给药途径的药动学研究

目的:比较羟基喜树碱(10-hydroxycamptothecin,HCPT)腹腔内和外周静脉两种不同给药途径的药动学特点.方法:比格犬12只,随机分为两组,每组6只.2 mg/kg HCPT溶于生理盐水10 mL中,腹腔内给药组先腹腔内注入生理盐水290 mL,随后用恒速泵快速注入HCPT;外周静脉给药组腹腔内注入生理盐水300 mL,于股静脉中用恒速泵快速注入HCPT.随后按不同时间点抽取血液和腹腔液,各样本用高效液相色谱分析药物浓度,并用3P87软件包计算药动学参数.结果:HCPT给药1 h后,腹腔给药组的门静脉浓度和外周静脉浓度持续超过外周静脉给药组,两组间门静脉浓度和外周静脉浓度的AUC比分别为为1.08:1和1.45:1.腹腔内给药组的腹腔液HCPT浓度明显高于外周静脉给药组的腹腔液浓度,峰值为60.4倍,AUC为21倍,P值均小于0.001.结论:腹腔内给药组其药动学具有明显优越性,能维持腹腔液和门静脉血更高更持久的血药浓度,因而有利于化疗药物发挥更大的生物学效应,值得临床应用.     

树突状细胞及其肿瘤疫苗

树突状细胞（DC）是功能强大的抗原提呈细胞，在抗肿瘤免疫中处于中心地位。近年来DC疫苗的研究取得较大进展，现就DC的培养、肿瘤患者DC的特点及DC疫苗的构建等作一综述。     

白细胞介素-18基因转染的NCI-H460肺癌细胞生物学特性研究

目的:研究IL-18基因转染的NCI-H460肺癌细胞的生物学特性.方法:设转染组(GT组)、空载体转染组(PT组)和未转染组(NT组),分别以IL-18转染的NCI-H460细胞、pcDNA3.1(+)转染的NCI-H460细胞及未转染的NCI-H460细胞为实验细胞,观察3组细胞生长情况;MTT法测定细胞增殖.Boyden Chamber试验比较细胞侵袭能力.将3种细胞接种裸鼠,观察成瘤时间、生存时间及肿瘤大小.结果:培养第7天3组的细胞数量为GT组(5.92±0.27)×104,PT组(7.20±0.20)×104,NT组(7.09±0.12)×104,72 h时A值为GT组0.97±0.08,PT组1.35±0.07,NT组1.28±0.10,3组穿透滤膜细胞数为GT组27.50±5.72,PT组38.67±6.31,NT组41.33±5.89,GT组细胞增殖及侵袭力低于PT组及NT组.3组成瘤时间为GT组(12.0±2.19) d、PT组(9.17±1.94) d、NT组(8.67±1.86) d,生存时间为GT组(51.67±7.45) d、PT组(40.17±9.83) d及NT组(37.83±10.07) d,肿瘤体积为GT组(2 082.4±670.2) mm3、PT组(3 893.4±316.3) mm3、NT组(3 338.2±725.4) mm3,GT组细胞在裸鼠体内生长速度低于PT组及NT组.结论:IL-18基因转染的NCI-H460肺癌细胞增殖减慢,侵袭性减弱,致瘤性下降,为IL-18用于治疗恶性肿瘤奠定基础.     

抗氧化剂和NF-κB对大肠癌细胞IL-8表达的作用及机制

目的：探讨NF-κB在大肠癌细胞IL-8诱导表达中的作用及抗氧化剂对大肠癌细胞IL-8诱导表达的影响及其机制。 方法： IL-8 mRNA表达采用逆转录/聚合酶链反应(RT/PCR)检测，培养上清IL-8蛋白含量用ELISA检测，EMSA法测定细胞核内NF-κB结合活性。 结果： 抗氧化剂可阻断大肠癌细胞培养体系TNF-α诱导的IL-8生成及IL-8 mRNA的表达, TNF-α可诱导大肠癌细胞NF-κB的激活并被抗氧化剂阻断。 结论： TNF-α诱导的大肠癌细胞IL-8基因和蛋白表达依赖于NF-κB的激活；抗氧化剂可通过抑制NF-κB的活化而阻断IL-8基因和蛋白的诱导表达。     

大肠癌患者血清IL-8和MMP-3水平的临床研究

目的探讨大肠癌患者血清IL-8和MMP-3表达水平及其临床意义.方法应用ELISA方法,对56例大肠癌患者和同期30名健康人的血清IL-8和MMP-3水平进行测定.结果大肠癌患者血清IL-8和MMP-3水平明显高于正常人,IL-8和MMP-3水平与肿瘤大小、血管侵犯、淋巴结受累、肝脏转移及临床病理分期密切相关（P〈0.05）,但与肿瘤部位、组织学类型及患者的性别和年龄等因素无关（P〉0.05）.大肠癌患者血清IL-8和MMP-3水平表达有显著相关性（P〈0.05）.结论 IL-8和MMP-3在大肠癌的发生、发展中具有重要作用,术前检测IL-8和MMP-3可作为大肠癌辅助诊断和病情监测的参考指标.     

Bcap37完全细胞抗原冲击树突状细胞诱导特异性抗乳腺癌免疫实验研究

目的　研究 Bcap37完全细胞抗原冲击树突状细胞 (DC)能否诱导特异性抗肿瘤免疫 ,探索乳腺癌的免疫治疗方法。方法　从人外周血分离单核细胞 ,用 GM- CSF和 IL - 4诱导出 DC,反复冻融制备 Bcap37完全细胞抗原 ,将此抗原冲击的 DC与 T细胞共培养 ,以 7天后分离的 T细胞为效应细胞 ,与肿瘤细胞混合培养 ,MTT法测定对肿瘤细胞的抑制作用。结果　单核细胞经细胞因子诱导 8天 ,形态、表型及功能鉴定为成熟 DC;完全细胞抗原冲击 DC诱导的 T细胞对肿瘤细胞具有明显的抑制作用。结论　 Bcap37完全细胞抗原冲击 DC可有效诱导特异性抗肿瘤免疫     

尖锐湿疣病损组织粗提蛋白对树突状细胞免疫表型的影响

目的 研究尖锐湿疣病损组织粗提蛋白对树突状细胞免疫表型的影响。方法 贴壁法分离脐血和外周血中的单核细胞,流式细胞仪检测树突状细胞特异性表面分子的表达。结果 rhGM-CSF、rhIL-4和LPS可诱导脐血和外周血来源的单核细胞分化为成熟的树突状细胞。尖锐湿疣病损粗提蛋白刺激后的树突状细胞高表达CD86穴脐血91.7%熏外周血88.6%雪和HLA-DR穴脐血88.4%熏外周血85.0%雪熏而包皮刺激组的CD86和HLA-DR的表达较低穴CD86押脐血87.1%熏外周血77.2%;HLA-DR押脐血68.0%熏外周血59.7%雪,空白对照组的CD86表达更低穴脐血83.5%熏外周血62.4%雪,HLA-DR的表达介于前两者之间(脐血72.7%熏外周血68.3%)。结论 尖锐湿疣病损粗提蛋白使树突状细胞部分抗原递呈相关分子表达呈上调趋势,提示尖锐湿疣粗提蛋白可能增强树突状细胞的抗原递呈功能并进而促进T细胞的激活。