药学综合性、自主设计性实验的理论与实践

创新能力培养是国家为培养适应创新型国家建设需要的高素质人才而对大学教育提出的要求。在实验教学中开设综合性、自主设计性实验,是我校开展创新能力培养的重要内容,是培养学生严谨求实的科研态度,勇于探索、敢于创新的科研精神,团结协作的团队合作意识的有效举措,是提高学生获取信息、处理信息以及分析问题和解决问题能力的有效方式。本文就药学综合性、自主设计性实验在创新能力培养中的理论、实践和教学效果三个方面做了探讨。     

白芨多糖对大鼠血小板聚集、疑血功能及TXB2、6-keto-PGF1α表达的影响

目的：观察白芨多糖对大鼠血小板聚集、凝血功能及血浆血栓素B2（TXB2）、6-酮-前列腺素F1α（6-keto-PGF1α）水平的影响,探讨白芨多糖的止血机制.方法：健康SD大鼠60只,随机分为正常对照组（生理盐水）、白芨多糖高剂量组（12 g/kg）、白芨多糖中剂量组（6 g/kg）、白芨多糖低剂量组（3 g/kg）、云南白药组（0.4g/kg）,连续给药14 d;股动脉采血,测定各组大鼠血小板聚集率、凝血酶原时间（PT）、凝血酶时间（TT）、部分凝血活酶时间（APTT）、纤维蛋白原（FIB）、TXB2和6-keto-PGF1α水平.结果：与空白对照组比较,白芨多糖中、高剂量能增加大鼠血小板聚集率,缩短PT、APTT和TT,显著增加FIB、TXB2含量和降低6-keto-PGF1α含量（P＜0.05或P＜0.01）.结论：白芨多糖可能通过激活内源性,外源性凝血系统,促进血小板聚集和调节TXB2、6-ke-to-PGF1α的水平,发挥止血功能.     

止血生物效价用于白及品质评价的研究

采用凝血酶时间(TT)将对照物质维生素K1注射液与白及参照物质进行对比检定,对白及参照物质进行标化,建立了白及体外测定凝血酶时间的生物活性测定方法,运用"量反应平行线法"(3.3)对不同产地的白及进行止血生物效价测定。白及参照物质量效之间具有良好的线性关系(Y=66.332-23.913X,R2=0.995 3),测得不同产地白及止血生物效价为821.93~1 187.53 U·g-1,并均能通过可靠性检验(偏离直线P>0.05,偏离平行P>0.05)。该方法仪器精密度(RSD3.8%)、中间精密度(RSD 4.6%)、重复性(RSD 3.2%)、稳定性(RSD 3.7%)较好,所建立的白及止血生物效价检测方法可靠,操作简便,重复性好,可用于白及止血生物效价的测定。     

UPLC-Q-TOF/MS同时测定强力天麻杜仲胶囊中5种成分的含量

目的 建立UPLC-Q-TOF/MS同时测定强力天麻杜仲胶囊中天麻素、京尼平苷酸、松脂醇二葡萄苷、苯甲酰新乌头原碱及蛇床子素含量的方法。方法 采用Waters ACQUITY UPLC,色谱柱为CORTECSTM C₁₈柱（4.6 mm×150 mm,2.7 μm）,流动相为乙腈（A）-0.1%甲酸水溶液（B）梯度洗脱,电喷雾离子源（ESI）,正负离子模式,质量扫描范围为50~1 200 Da。结果 5种被测成分在线性范围内均具有良好的线性关系（r² ≥ 0.997 4）,平均回收率在99.533%~107.525%,RSD ≤ 2.56%。结论 应用UPLC-Q-TOF/MS法分离效果及重复性好,且快速、简便,可作为强力天麻杜仲胶囊的质量控制方法。     

紫金莲的化学对照品研究

目的:建立从紫金莲中制备白花丹醌对照品的方法.方法:用萃取、低压硅胶柱层析、重结晶等方法对紫金莲乙醇提取物进行分离纯化,通过质谱、核磁其振、薄层色谱及高效液相色谱等方法对其分离产物进行结构鉴定和纯度测定.结果:制备得到的白花丹醌对照品经薄层色谱检查无杂质,二维和三维高效液相色谱检查为单一成分,纯度在98%以上,符合中药化学对照品含量测定要求.结论:建立的制备白花丹醌对照品的方法简单,对照品纯度高,可作为紫金莲及其制剂质量研究用化学对照品.     

小叶黄杨非生物碱类成分

目的:研究小叶黄杨的非生物碱类化学成分。方法:应用MCI、正相硅胶、RP-18反相硅胶以及葡聚糖凝胶Sephadex LH-20等各种柱色谱技术对小叶黄杨乙酸乙酯与正丁醇萃取物进行分离纯化,并根据理化常数及波谱数据对分离得到的化合物进行鉴定。结果:共分离得到10个化合物,分别鉴定为4’,5-二羟基-3,3’,6,7-四甲氧基黄酮(1),4’,5-二羟基-3,6,7-三甲氧基黄酮(2),3’,4’,5-三羟基-3,6,7-三甲氧基黄酮(3),松脂素(4),3’-O-去甲基表松脂素(5),阿魏酸甲酯(6),对羟基肉桂酸甲酯(7),黄花菜木脂素A(8),紫丁香苷(9),异落叶松脂素-4-O-β-D-葡萄糖苷(10)。结论:化合物1,4~7,9~10均系首次从该种植物中分离得到。     

鸡眼睛乙酸乙酯部位化学成分研究

目的:研究鸡眼睛乙醇提取物中等极性的乙酸乙酯萃取部位的化学成分,为民族药鸡眼睛的开发应用提供科学依据。方法:通过各种色谱分离技术对鸡眼睛乙醇提取物乙酸乙酯萃取部位进行分离纯化,根据化合物的理化性质和波谱数据鉴定其结构。结果:从鸡眼睛乙醇提取物乙酸乙酯萃取部位分离得到7个化合物,分别鉴定为:香草醛(vanillin,1),香草酸(vanillic acid,2),5-羟甲基糠醛(5-hydroxymethylfurfural,3),芥子醛(sinapic aldehyde,4),齐墩果酸(oleanolic acid,5),没食子酸(gallic acid,6),原儿茶酸(protocatechuic acid,7)。结论:其中化合物2～7为首次从该属植物中分离得到。     

黔产白及的化学成分

目的:对黔产白及药材进行化学成分研究。方法:应用MCI、正相硅胶、Sephadex LH-20凝胶以及半制备型HPLC分离纯化,运用1H-NMR,13C-NMR,ESI-MS等现代波谱技术对化合物的结构进行鉴定。结果:从黔产白及中分离得到其中7个化合物,经波谱数据及理化性质鉴定为α-异苹果酸(1),4,4’-二羟基二苯基甲烷(2),留兰香木脂素B(3),gymnoside V(4),4,4’-二羟基苄基硫醚(5),gymnoside IX(6)以及gymnoside X(7)。结论:7个化合物均为首次从该属植物中分离得到。     

紫金龙乙醇组分对脂多糖诱导的RAW264.7细胞分泌炎症因子的影响

目的:研究紫金龙乙醇组分(AVEC)对脂多糖(LPS)诱导小鼠单核巨噬细胞RAW 264.7分泌炎症因子的影响。方法:用脂多糖(10μg·L-1)刺激生长良好的RAW 264.7细胞24 h建立体外细胞炎症模型,以MTT法测定不同浓度AVEC对RAW 264.7细胞的毒性作用,Griess试剂法检测一氧化氮(NO)含量,ELISA法检测细胞上清液中肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白介素6(IL-6)含量。结果:AVEC在低于400 mg·L-1时对RAW 264.7细胞无毒性作用。与空白对照组相比,LPS可以明显诱导RAW 264.7细胞分泌炎症因子TNF-α,IL-6和NO(P<0.01);与模型组相比,100~400 mg·L-1的AVEC可明显下调LPS诱导的RAW 264.7细胞释放炎症因子TNF-α,IL-6和NO(P<0.05,P<0.01),并呈现良好的剂量依赖关系。结论:AVEC可以抑制脂多糖诱导的RAW 264.7细胞炎症反应,其抗炎作用可能与减少炎症因子TNF-α,IL-6和NO有关。     

血人参水溶性化学成分的UHPLC-DAD-Q-TOF-MS/MS分析

目的: 采用超高压液相色谱-二级管阵列检测器-四级杆-飞行时间质谱(UHPLC-DAD-Q-TOF-MS/MS)联用技术,在负离子模式下开展血人参水煎煮提取物中化学成分的一级及二级质谱研究,分析血人参的水溶性化学成分. 方法: 液相色谱条件为Synergi Hydro-RP色谱柱(2.0 mm×100 mm,2.5 μm),0.1%甲酸乙腈-0.1%甲酸水溶液梯度洗脱.质谱条件为Bruker Daltonics micro TOF-Q质谱仪,电喷雾离子源,负离子模式,毛细管电压2 800 V,二级质谱碰撞能量11～25 eV;源内碰撞诱导裂解(CID)及其二级质谱条件:源内CID能量25～35 eV,碰撞能量12～17 eV. 结果: 共推测出15个化合物的化学结构,分别为没食子酸、原儿茶酸-3-O-葡萄糖苷、原儿茶酸、原儿茶醛、丁香酸葡萄糖苷、龙胆酸、儿茶素、表儿茶素、原花青素B类同分异构体4个、棕儿茶素A类同分异构体3个. 结论: 除化合物表儿茶素外,其他14个化合物均为该植物首次报道.研究结果为血人参及其制剂的开发和质量标准制定提供了依据.