黄芩素对H_2O_2诱导肾小管上皮细胞凋亡的影响机制研究

目的探究黄芩素对过氧化氢(H_2O_2)诱导肾小管上皮细胞活性、凋亡的影响及其机制。方法将体外培养的肾小管上皮NRK52E细胞株随机分为5组,对照组为正常培养,H_2O_2组为500μmol/L H_2O_2干预细胞24 h,H_2O_2组+黄芩素(50μmol/L)、H_2O_2组+黄芩素(100μmol/L)、H_2O_2组+黄芩素(200μmol/L)为加入不同浓度黄芩素和500μmol/L H_2O_2处理细胞;四甲基偶氮唑(MTT)检测细胞的活性,脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)检测细胞的凋亡率,蛋白质印迹法(Western Blot)检测含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Caspase-3)、活化的Caspase-3(Cleaved Caspase-3),试剂盒检测细胞中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)。结果 H_2O_2诱导NRK52E细胞活性降低(P0.05)、凋亡率增加(P0.05),SOD活性降低(P0.05),MDA活性增加(P0.05),Cleaved Caspase-3蛋白水平显著升高(P0.05);与H_2O_2组相比,不同浓度黄芩素提高NRK52E细胞的活性(P0.05),降低凋亡率(P0.05),提高SOD活性(P0.05),降低MDA活性和Cleaved Caspase-3蛋白水平(P0.05)。结论黄芩素可抑制肾上腺上皮细胞氧化应激反应,并通过下调磷酸化Caspase-3蛋白水平,从而抑制细胞凋亡,减轻细胞损伤。     

护肾固精方对大鼠系膜细胞增殖周期的影响

目的探讨中药复方护肾固精方对大鼠系膜细胞(MC)生物学行为的影响。方法采用体外培养大鼠MC和血清药理学方法,分为护肾固精方血清组、脂多糖(LPS)病理组及正常对照组,将不同浓度的作用物加入MC共同培养,培养后的MC制成单细胞悬液,经流式细胞仪检测后,计算出细胞周期中的G0/G1期、S期、G2/M期各时期的百分比及S期抑制百分比、细胞PI。结果不同浓度的作用物对MC增殖周期有不同影响。LPS血清能明显刺激MC增殖,表现为G0/G1期细胞百分比减以及S期细胞增加;细胞的S期抑制百分比明显下降,而细胞的PI则显著增高;中、高浓度的中药血清明显抑制MC增殖,表现为G0/G1期细胞百分比增加及S期细胞减以,细胞的S期抑制百分比明显增加,而细胞的PI则显著降低。并且使大量MC阻滞在G0/G1期,能诱导MC发生凋亡。结论护肾固精方治疗系膜增殖性肾炎等肾小球疾病的作用机理之一,可能与抑制MC增殖和促其细胞凋亡有关。     

护肾固精方对单侧输尿管梗阻大鼠肾组织中BMP-7、TGF-β_1表达的影响

目的:观察护肾固精方对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾间质纤维化(RIF)的影响,并探讨其防治RIF的作用及其机制.方法:制备大鼠单侧输尿管梗阻实验性RIF模型,随机分为3组:假手术组、单侧输尿管梗阻组、护肾固精方治疗组,观察比较各组大鼠一般情况,肾脏大体形态及病理学改变,并采用免疫组化方法检测骨形态发生蛋白-7(BMP-7)和转化生长因子-β1(TGF-β1)在各组大鼠肾组织中的表达.结果:假手术组肾脏病理未见异常;中药组大鼠术后各时相点肾组织病变较UUO组同期轻(P＜0.05).UUO组14天后肾脏中BMP-7表达较少,21天时则仅有微量表达(P＜0.01),护肾固精方可以提高BMP-7表达水平,与假手术组同一时相点相比有所减弱(P＜0.05).TGF-β1在假手术组中几乎无表达,在UUO组随梗阻时间延长,TGF-β1表达逐渐增加;中药组与UUO组同一时相点比较,TGF-β1阳性表达明显减弱(P＜0.05).结论:护肾固精方可以通过提高BMP-7表达水平、降低TGF-β1表达发挥其延缓肾间质纤维化进程的作用.     

2型糖尿病患者中医药治疗与血管并发症风险的相关性研究

目的探讨2型糖尿病(T2DM)患者中医药治疗与血管并发症风险的相关性。方法根据治疗方案不同将1 250例T2DM患者分为中医药治疗组400例和非中医药治疗组850例。比较2组患者临床资料,并总结出治疗T2DM患者10种常用的单味中药和10种常用的复方中药,应用泊松回归模型和Cox比例风险回归模型对2组患者血管并发症发病率及危险比进行分析。结果 2组患者性别、年龄、合并疾病(高血压、高血脂)情况和磺脲类、二甲双胍、胰岛素使用情况比较差异均无统计学意义(P均0.05);中医药治疗组中α-葡萄糖苷、格列奈类、噻唑烷二酮类抗糖尿病药物率明显高于非中医药治疗组(P均0.05)。10种常用的单味中药为丹参、天花粉、黄芪、山药、葛根、石斛、玄参、麦冬、苍术、大黄,10种常用的复方中药为白虎加人参汤、玉泉丸、六味地黄丸、知柏地黄丸、济生肾气丸、白虎汤、杞菊地黄丸、甘露饮、八味地黄丸、血府逐瘀汤。中医药治疗组患者中风发病率及危险比均显著低于非中医药治疗组(P均0.05),2组糖尿病足、慢性肾脏疾病发病率及危险比比较差异均无统计学意义(P均0.05)。结论T2DM患者中风风险与中医药治疗有关,中医药辅助治疗T2DM可预防中风的发生。     

TNF-ɑ基因rs1800629多态性与糖尿病肾病风险的相关性研究

目的研究TNF-ɑ基因rs1800629多态性与糖尿病(T2DM)肾病(DN)风险的相关性。方法选取2014年6月至2017年6月西安医学院第二附属医院肾脏内分泌科收治的T2DM患者600例,其中正常白蛋白尿和T2DM-DN患者各300例,T2DM-DN患者中包含微量白蛋白尿组和超量白蛋白尿组各150例;另外纳入正常葡萄糖耐受人群300例。采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性技术对rs1800629多态性进行基因分型。采用酶联免疫吸附测定血浆TNF-ɑ水平。采用SPSS 19.0在线软件计算rs1800629多态性与T2DM-DN风险的相关性。结果与正常糖耐量组的最小等位基因A的频率(16.17%)相比,T2DM-正常白蛋白尿患者的频率(26.33%)显著增高,而T2DM-DN患者的频率(33.17%)更高。逻辑回归分析结果显示,与野生等位基因型G相比,最小等位基因A与糖尿病肾病和大量白蛋白尿风险显著相关(P<0.05)。与等位基因型GG相比,AA基因型与糖尿病肾病、微量白蛋白尿和大量白蛋白尿风险均显著相关(P<0.05)。此外,与参考等位基因型GG相比,携带AA基因型的患者TNF-ɑ水平显著更高(P<0.05)。结论 TNF-ɑ基因rs1800629的A等位基因和AA基因型与糖尿病肾病风险显著相关。