通窍活血汤通过调节星形胶质细胞Glu-Gln循环降低Glu兴奋性毒性改善CIRI大鼠的神经功能

目的 观察并比较3种不同方法制备的通窍活血汤对脑缺血再灌注损伤（CIRI）大鼠的保护作用,并从星形胶质细胞谷氨酸（Glu）代谢通路探讨其作用机制。方法 选用SPF级雄性SD大鼠,以改良线栓法建立CIRI模型,将造模成功的大鼠随机分为模型组、通窍活血汤水煎组、通窍活血汤酒煎组、通窍活血汤醇提组,并设假手术组,分别给予对应药物灌胃,连续治疗7 d。通窍活血汤3个组的灌胃剂量为6.3 g·kg^-1·d^-1,假手术组和模型组给予同体积生理盐水灌胃。末次灌胃结束后,以神经功能缺损评分（mNSS）检测大鼠神经功能恢复情况,苏木素-伊红（HE）染色观察缺血脑组织的形态学变化,高效液相色谱法（HPLC）检测大鼠缺血脑组织中Glu含量的变化,免疫组织荧光法检测缺血脑组织中谷氨酸转运体-1（GLT-1）和胶质纤维酸性蛋白（GFAP）及谷氨酰胺合成酶（GS）和GFAP的共表达情况;蛋白免疫印迹法（Western blot）检测缺血脑组织中GFAP,GLT-1和GS蛋白的表达情况。结果 与假手术组比较,模型组大鼠mNSS评分显著升高（P<0.01）,缺血脑组织皮质大片坏死,细胞排列紊乱、边界模糊,出现细胞水肿及炎性浸润;缺血脑组织中Glu的含量显著增加（P<0.01）,GLT-1与GFAP共表达及GS与GFAP共表达显著降低（P<0.01）,GFAP蛋白表达显著升高（P<0.01）,GLT-1,GS蛋白表达明显降低（P<0.05,P<0.01）;与模型组比较,3种方法制备的通窍活血组mNSS评分均显著降低（P<0.01）,大鼠缺血脑组织皮质及海马神经细胞的损伤程度均有所减轻;缺血脑组织中Glu的含量均明显减少（P<0.05,P<0.01）,GLT-1与GFAP共表达均明显升高（P<0.05,P<0.01）,GFAP,GLT-1蛋白表达均明显升高（P<0.05,P<0.01）,通窍活血汤酒煎组、通窍活血汤醇提组GS与GFAP共表达明显增加（P<0.05,P<0.01）,GS蛋白的表达显著升高（P<0.01）。与通窍活血汤水煎组比较,通窍活血汤醇提组GLT-1和GFAP共表达及GS和GFAP共表达明显增加（P<0.05）,通窍活血汤酒煎组、通窍活血汤醇提组GS蛋白表达明显升高（P<0.05）,通窍活血汤醇提组Glu含量显著降低（P<0.01）,GFAP,GLT-1蛋白表达明显升高（P<0.05,P<0.01）;与通窍活血汤酒煎组比较,通窍活血汤醇提组GFAP,GLT-1蛋白表达升高（P<0.05,P<0.01）。结论 3种方式制备的通窍活血汤皆可改善CIRI大鼠的神经功能,其作用可能通过促进星形胶质细胞的进一步活化,增加GLT-1和GS表达,促进星形胶质细胞通过Glu-Gln循环清除突触间隙中Glu的过度堆积,降低Glu兴奋性毒性作用而实现。通窍活血汤醇提组在降低缺血脑组织Glu含量、促进星形胶质细活化、增强GLT-1和GS蛋白表达方面优于通窍活血汤酒煎组、通窍活血汤水煎组。     

槲皮素抗脑缺血再灌注损伤作用机制研究进展

脑缺血再灌注损伤（CIRI）是缺血性脑卒中血流供应恢复后出现的脑组织结构和功能进一步损伤的现象，严重影响患者生存质量。CIRI的病理机制复杂，主要涉及兴奋性氨基酸毒性、细胞凋亡、炎症及氧化应激损伤等。研究发现，中药材及其活性成分在CIRI的防治方面显现出独特优势和良好应用前景。槲皮素为植物性黄酮类化合物，广泛存在于多种中药，已有研究证实其可通过抗炎、抗氧化、抑制细胞凋亡、保护血脑屏障、激活线粒体自噬等多种途径改善CIRI，减轻脑损伤，但对于其具体作用机制及分子靶点的研究略有不足。此外，研究人员针对槲皮素生物利用度低和溶解性差的问题，研制出多种改善槲皮素生物活性成分分散状态，提高化学稳定性，增加临床应用率的递送系统；并针对槲皮素长期使用的安全性进行了实验评价，证实低剂量使用槲皮素具有较好的耐受性及安全性。综上，笔者通过对近年来国内外相关文献进行分析，对槲皮素治疗CIRI的作用靶点及机制研究、药物递送及安全性评价等予以综述，以期为槲皮素的进一步开发和推广应用提供理论依据。     

红景天苷对脑缺血损伤的保护作用及机制研究进展

缺血性脑卒中是由多种因素引起脑内动脉狭窄或阻塞,可导致大脑出现缺血、缺氧、神经元坏死和神经功能障碍等病理损伤,具有高发病率、高致残率、高死亡率的致病特点。脑缺血再灌注损伤是其主要的继发性损伤,严重时可导致患者永久性残疾甚至死亡。中医药治疗脑缺血损伤临床疗效显著,随着中医药现代化发展,中药活性成分的提取及应用日益受到重视。红景天苷作为珍稀中药材红景天的主要活性成分,已被临床前试验证明可通过抑制细胞凋亡、抗氧化应激、减轻炎症反应、保护血脑屏障、调节自噬、促进神经重塑及突触再生等多种途径对抗脑缺血损伤。但因其多途径、多通路、多靶点的作用特点,红景天苷改善脑缺血损伤的具体机制尚未完全阐明。笔者通过梳理近十年相关文献,对红景天苷治疗缺血性脑损伤的作用机制予以综述,同时整理了其药代动力学研究及安全性评价的最近进展,以期为中药活性成分的新药研发及临床应用提供理论依据和新的研究思路。