基于PKCβⅡ/NOX2/ROS信号通路探讨柴胡三参胶囊对心肌缺血再灌注损伤大鼠的保护作用

基于氧化应激介导的程序性细胞死亡探讨心肌缺血再灌注损伤的发病机制,及基于PKCβⅡ/NOX2/ROS信号通路探讨柴胡三参胶囊调节心肌缺血再灌注损伤的机制及作用靶点。结扎左前降支建立心肌缺血再灌注损伤大鼠模型,随机分为6组：假手术组,模型组,柴胡三参胶囊临床等效、高剂量组,N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine)组,蛋白激酶C抑制剂(CGP53353)组。柴胡三参胶囊各剂量组连续给药7 d后,检测各组大鼠心肌梗死面积;苏木精-伊红(HE)染色观察大鼠心肌组织病理形态;TUNEL染色观察大鼠心脏组织凋亡情况;酶联免疫吸附(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)法检测大鼠心肌损伤指标和氧化应激相关指标;流式细胞仪检测心脏组织中活性氧(ROS)水平;蛋白免疫印迹法(Western blot)及实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time quantitative PCR,RT-qPCR)检测大鼠心脏组织相关蛋白及mRNA相对表达水平。结果显示,与假手术组比较,模型组大鼠心肌梗死面积明显,心肌结构紊乱、间质水肿及出血,可见大量空泡,心肌损...     

“柴胡三参胶囊”预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用及其与MLK3-p38 MAPK-NLRP3信号通路的关系

目的：探讨柴胡三参胶囊通过MLK3-p38 MAPK-NLRP3信号通路减轻炎症反应对心肌缺血再灌注损伤（MIRI）大鼠心脏的保护作用。方法：将72只SD雄性大鼠随机分为假手术组、模型组、地尔硫卓组（每日给药量： 51mg/kg）及柴胡三参胶囊低、中、高剂量组（每日给药量： 216、432、864mg/kg），每组12只。各给药组灌胃给予相应药液，假手术组、模型组灌胃等体积生理盐水，均每日1次，连续7d。预处理结束后，除假手术组外，其余各组大鼠采用结扎冠状动脉左前降支并再灌注的方法建立MIRI模型，再灌注结束后立即取血、取全心，假手术组只穿线，不结扎。采用酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测每组6只大鼠血清肌酸激酶同工酶（CK-MB）、心肌肌钙蛋白I（cTnI）含量，苏木素-伊红（HE）染色法观察每组3只大鼠心肌组织病理变化，2，3，5-氯化三苯基四氮唑（TTC）染色法观察每组5只大鼠心肌梗死范围，蛋白质免疫印迹（Western blot）法检测每组3只大鼠心肌组织中混合谱系酶3（MLK3）、p38丝裂原激活蛋白激酶（p38 MAPK）、NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3（NLRP3）、白细胞介素-1β （IL-1β）蛋白表达水平。结果：模型组大鼠血清CK-MB、cTnI含量显著高于假手术组（P＜ 0.01），心肌细胞排列紊乱、肥大水肿，心肌梗死面积占比明显大于假手术组（P＜ 0.01），缺血区心肌组织炎症相关蛋白MLK3、p38 MAPK、NLRP3、IL-1β的表达均显著高于假手术组（P＜ 0.01，P＜ 0.05）。各给药组大鼠血清CK-MB、cTnI水平均显著低于模型组（P＜ 0.01） ；柴胡三参胶囊中、高剂量组与地尔硫卓组大鼠血清CK-MB、cTnI水平显著低于柴胡三参胶囊低剂量组（P＜ 0.01），而此3组大鼠上述指标组间比较差异无统计学意义（P＞ 0.05）。柴胡三参胶囊中、高剂量组及地尔硫卓组大鼠心肌细胞排列较整齐，心肌细胞水肿范围少于模型组，其中以柴胡三参胶囊高剂量组及地尔硫卓组改善最明显。柴胡三参胶囊中、高剂量组与地尔硫卓组大鼠心肌梗死面积占比明显低于模型组（P＜ 0.01），3组大鼠心肌梗死面积占比组间比较差异无统计学意义（P＞ 0.05），柴胡三参胶囊中剂量组、地尔硫卓组大鼠心肌梗死面积占比明显低于低剂量组（P＜ 0.01）。柴胡三参胶囊中、高剂量组及地尔硫卓组大鼠心肌组织MLK3、p38 MAPK、NLRP3、IL-1β蛋白表达水平明显低于模型组和柴胡三参胶囊低剂量组（P＜ 0.01），其中地尔硫卓组MLK3蛋白表达明显低于柴胡三参胶囊高剂量组（P＜ 0.05），NLRP3蛋白表达明显低于柴胡三参胶囊中、高剂量组（P＜ 0.01）。结论：柴胡三参胶囊中、高剂量预处理可减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤，其可能通过MLK3-p38 MAPK-NLRP3信号通路减轻炎症反应实现对MIRI模型大鼠的心肌保护作用。     

王行宽从“间者并行”论治不稳定型心绞痛经验

介绍王行宽教授基于"间者并行"理论论治不稳定型心绞痛的经验。王教授认为,本病病性属本虚标实,多由年老久病体虚、情志不调、饮食失节、劳逸失当、寒邪侵袭等所致。气虚痰瘀内阻为其主要病机,心肝失调为病机关键,终致"不荣则痛"或"不通则痛"。临床上多以两者相兼为患,故以"间者并行"治之,王教授注重辨证遣方用药、分期补通兼施、兼症同治,各有侧重,疗效颇佳。并附验案1则,以资佐证。     

程丑夫从气机升降论治高血压病经验

总结程丑夫教授基于气机升降理论辨治高血压病的临证经验。认为高血压病属于中医学“眩晕”范畴，其病机或为脾胃虚弱，致脾胃升降失常，清阳不升而致眩；或为肝升太过，肺降不及，肝阳上亢而致眩；或为肾水不足，心肾不交，心火独亢上攻脑窍而致眩。治疗强调一身之气需升中有降、降中有升，具体组方从调畅脾胃或平肝降肺或交通心肾入手，基于调整脾胃、肝肺、心肾的整体气机达到周身气机升降平衡以治疗眩晕的目的。