菊花总黄酮含药血浆对干眼症细胞模型Bax mRNA及Bcl-2mRNA表达的影响

目的观察菊花总黄酮含药血浆对大鼠泪腺上皮细胞干眼症模型中Bax mRNA及Bcl-2 mRNA表达的影响。方法将培养生长状态良好的大鼠泪腺上皮细胞随机分为无雄激素培养组(空白组)、雄激素培养组(雄激素组)、无雄激素培养黄酮组(菊花总黄酮组),分别加入空白血浆、丙酸睾酮、菊花总黄酮含药血浆干预48 h,然后加入100μmol/L H_2O_2继续培养60 min诱导细胞凋亡。RT-PCR法检测泪腺上皮细胞中Bax mRNA及Bcl-2 mRNA的表达情况。结果雄激素组和菊花总黄酮组Bax mRNA表达量均明显低于空白组(P均0.05),Bcl-2 mRNA表达量均明显高于空白组(P均0.05),雄激素组和菊花总黄酮组比较差异均无统计学意义(P均0.05)。结论菊花总黄酮含药血浆有可能通过抑制泪腺上皮细胞中Bax mRNA表达及促进Bcl-2 mRNA表达的途径,起到抑制泪腺上皮细胞凋亡的作用。     

益气养阴活血利水法联合康柏西普对非增殖期糖尿病视网膜病变患者视网膜电图的影响

目的:观察益气养阴活血利水法联合康柏西普对非增殖期糖尿病视网膜病变(NPDR)患者视网膜电图(ERG)的影响。方法:60例(82眼)NPDR患者,采用随机数字表法分为两组,对照组30例(40眼)玻璃体腔注射康柏西普,每月1次,治疗组30例(42眼)在对照组的基础上加用益气养阴活血利水中药口服治疗。治疗3个月后,观察两组患者BCVA、ERG,OCT检测两组患者CMT情况。结果:两组患者治疗前后不同时间BCVA、暗适应及明适应ab波振幅、CMT差异有统计学意义(P<0.05),治疗后不同时间两组患者BCVA、明暗适应ab波振幅、CMT相比,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:益气养阴活血利水法联合康柏西普较单纯康柏西普治疗能更好的减轻NPDR患者视网膜水肿,提高视力、暗适应及明适应a、b波振幅,降低CMT。     

益气养阴活血利水中药复方治疗视网膜脱离复位术后患者的疗效观察

目的观察益气养阴活血利水中药复方治疗视网膜脱离复位术后患者的临床疗效。方法将786例视网膜脱离复位术后患者,随机分为益气养阴活血利水中药复方治疗组(中药复方组,265例)、益脉康片对照组(益脉康组,263例)和常规疗法对照组(常规组,258例)。各组患者在行视网膜脱离复位术后予常规抗炎、止血治疗,术后第2周始,中药复方组、益脉康组分别服用益气养阴活血利水中药复方、益脉康片,常规组不另服药。3组用药时间均为6周,观察3组患者术后1周(用药前)、术后7周及随访1年后的视力、视网膜电图变化和视网膜脱离复发情况。结果视力改善情况中药复方组优于益脉康组及常规组(P0.01)。各组用药后及随访1年后与用药前比较暗适应及明适应a、b波振幅升高(P0.01),中药复方组明适应a波、b波峰时缩短(P0.01)。用药后及随访1年后,中药复方组与益脉康组及常规组比较,暗适应及明适应a、b波振幅升高(P0.01),明适应a波峰时缩短(P0.01)。中药复方组视网膜脱离复发率较其他两组降低,但差异无统计学意义(P0.05)。结论益气养阴活血利水中药复方能够改善视网膜复位术后患者的视力,改善视网膜电图,从而改善患者视功能。     

菊花总黄酮含药血清对干眼细胞模型AR、NF-κB磷酸化蛋白及TGF-β1表达的影响＊

目的 观察菊花总黄酮在体外条件下对泪腺上皮细胞中雄激素受体（Androgen Receptor，AR）的调控作用及对下游的核因子κB（Nuclear Factor kappa B，NF-κB）、转化生长因子-β1（transforming growth factor-beta1，TGF-β1）的表达影响。方法 以过氧化氢（H₂O₂）诱导泪腺上皮细胞凋亡，建立细胞模型，设立无雄激素培养空白对照组、含雄激素培养对照组、无雄激素培养黄酮治疗组。以MTT法摸索含药血清最佳干预加入量；免疫印迹实验（Western Blot）以及实时荧光定量PCR法（Quantitative Real-Time PCR，qPCR）检测泪腺上皮细胞中AR、NF-κB及TGF-β1的表达情况；并应用雄激素受体阻断剂氟他胺进行AR阻断后再次检测上述指标 。结果 MTT法检测后计算得出含药血清干预细胞的最终浓度为13.2%；无雄激素培养黄酮治疗组及含雄激素培养对照组中AR、NF-κB及TGF-β1的表达增强，与空白对照组对比有显著差异（P<0.01）；无雄激素培养黄酮治疗组中NF-κB表达量比含雄激素培养对照组表达量低，两者间的差异有统计学意义。氟他胺及含药血清干预后，无雄激素培养黄酮治疗组及含雄激素培养对照组中AR及NF-κB的表达未见提高，无统计学意义。结论 菊花总黄酮对泪腺上皮细胞可能存在拟雄激素效应，从而使AR、NF-κB表达增加，并通过上调TGF-β1的表达，可能起到在泪腺局部的抗炎作用。     

密蒙花总黄酮对去势雄鼠干眼症泪腺TGF-β_1及其基因表达的影响

目的观察密蒙花总黄酮对去势雄鼠导致干眼症泪腺TGF-β1及其基因表达的影响。方法90只健康1月龄SPF级Wistar雄性大鼠切除双侧睾丸及附睾建立干眼症模型;30只匹配大鼠切开阴囊而不切除睾丸作为假手术组。手术1周后,雄激素治疗组用丙酸睾酮注射液1 mg/kg股四头肌内注射,每3日1次（30只模型鼠）;密蒙花总黄酮治疗组以密蒙花总黄酮0.02 g/kg与生理盐水混悬液灌胃,每日1次（30只模型鼠）;正常组（30只正常鼠）、假手术组、模型组（30只）以生理盐水灌胃,每日1次。造模1、3、5个月后各组随机抽取10只大鼠处死,取双眼泪腺组织免疫组织化学法检测TGF-β1的表达,采用实时定量PCR（real-time PCR）法荧光定量检测TGF-β1mRNA的表达。结果造模5个月后,正常组和假手术组大鼠泪腺组织细胞中几乎无TGF-β1阳性表达,而模型组、雄激素治疗组和密蒙花总黄酮治疗组大鼠泪腺组织细胞中TGF-β1大量阳性表达,表现为大量棕黄色颗粒沉着。正常组、假手术组大鼠泪腺组织细胞中TGF-β1的平均光密度值（OD）高于模型组,差异有统计学意义（P〈0.05）;密蒙花总黄酮治疗组和雄激素治疗组大鼠泪腺组织细胞中TGF-β1的平均OD值大于模型组,差异有统计学意义（P〈0.05）;密蒙花总黄酮治疗组的大鼠泪腺组织细胞中TGF-β1的平均OD值小于雄激素治疗组,差异有统计学意义（P〈0.05）。TGF-β1mRNA在不同组大鼠泪腺组织细胞中的表达差异比较与TGF-β1表达相同（P〈0.05）。结论密蒙花总黄酮可抑制去势雄鼠干眼症泪腺炎症反应,上调TGF-β1mRNA的表达以增加TGF-β1的合成是其作用途径之一。     

密蒙花提取物对干眼症雄兔泪腺局部炎症反应影响的研究

目的:观察密蒙花提取物对去势所致干眼症雄兔基础泪液分泌量、泪腺局部炎症因子TGF-β1、IL-1β、TNF-α的影响,探讨密蒙花提取物抗雄激素水平下降所致的干眼症的作用机制。方法:将30只日本大耳雄兔随机分为空白组(A),模型组(B),治疗组(C、D、E),每组6只,对B、C、D、E组行去势术建立动物模型,对C、D、E组分别以密蒙花提取物1倍剂量和2倍剂量以及染料木黄酮连续灌胃1月,对全部实验兔行Schirmer I试验,采用免疫组织化学的方法,对兔泪腺组织中炎症因子TGF-β1、IL-1β、TNF-α进行检测。结果:C、D、E组Schirmer I试验测量值明显高于B组(P(0.01),泪腺导管及腺泡上皮细胞中,IL-1β、TNF-α阳性表达的细胞数均明显低于B组而TGF-β1阳性表达的细胞数均明显高于B组(P(0.01)。以上检测结果C、D组均优于E组(P(0.05)。结论:密蒙花提取物对于雄激素水平所致兔干眼症有良好的实验疗效,其作用机制可能与其中主要成分黄酮类物质拟雄激素效应调节体内性激素水平有关,从而可抑制泪腺局部炎症反应来起到疗效。     

密蒙花总黄酮对去势雄鼠干眼症模型角膜和泪腺组织中TNF-α,IL-1β表达的影响

目的:探讨密蒙花总黄酮对去势雄鼠干眼症动物模型角膜及泪腺组织炎症因子表达的影响与组织损伤的关系。方法:选取150只健康1月龄Wistar雄性大鼠随机分为5组(正常组、假手术组、手术对照组、雄激素治疗组、密蒙花总黄酮治疗组,分别用A,B,C,D,E组表示),每组30只。将C,D,E三组实验鼠切除双侧睾丸及附睾;B组只切开阴囊,不切除睾丸,作为假手术对照组,A组不作处理。自造模后1wk,待伤口基本愈合开始用药。A,B,C组以生理盐水灌胃,1次/d;D组用丙酸睾酮注射液大腿肌肉注射,3d1次;E组以密蒙花提取物生理盐水混悬液灌胃,1次/d。各组实验动物分别于用药1,3,5mo后随机取10只,行SchirmerⅠ试验、泪膜破裂时间(break-up time,BUT)及角膜荧光素染色检查并处死各组动物,取双眼泪腺、角膜组织采用免疫组织化学方法观察各组角膜和泪腺组织中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α),白细胞介素1β(interleukin 1β,IL-1β)蛋白的表达。结果:A与B组泪腺、角膜上皮细胞中TNF-α,IL-1β阳性表达均不明显;C组泪腺、角膜上皮细胞中TNF-α,IL-1β阳性表达的细胞数明显高于D,E组(P<0.05);D,E各组间差异不显著(P>0.05)。结论:去势雄鼠干眼症角膜和泪腺组织局部炎症反应可能是角膜损伤和泪腺分泌功能丧失的原因之一,TNF-α,IL-1β表达增加与其炎症反应有关。密蒙花总黄酮能够下调去势雄鼠角膜和泪腺局部TNF-α,IL-1β蛋白的表达,可能是其治疗干眼症的关键机制之一。     

活血通脉利水明目法治疗非缺血型视网膜静脉阻塞的随机对照试验：对眼底荧光血管造影结果的影响

背景：活血通脉利水明目法能明显改善实验性视网膜静脉阻塞后眼底出血情况,作为一种中医治疗非缺血型视网膜静脉阻塞的治疗方法,显效率高,可有效改善中医症状,其作用机制可能与降低血浆黏度,减少无灌注区,建立有效侧枝循环有关。 目的：观察活血通脉利水明目法（散血明目片）对非缺血型视网膜静脉阻塞患者眼底荧光血管造影结果的影响。 设计、场所、对象和干预措施：纳入2005年4月至2007年4月在湖南中医药大学第一附属医院眼科门诊及病房就诊的34例非缺血型视网膜静脉阻塞患者。所有患者分为气滞血瘀和肝阳上亢两种证型。将该34例患者随机分为治疗组与对照组,治疗组给予散血明目片联合中西医常规治疗方法,对照组给予血栓通片联合中西医常规治疗方法。2个月为1个疗程。 主要结局指标：治疗1个疗程后,行眼底照相与眼底荧光血管造影,并进行评价。 结果：治疗组总有效率较对照组高,但差异无统计学意义,而治疗组总显效率与治疗组比较,差异有统计学意义（P〈0.01）;治疗组视网膜循环时间优于对照组,另外治疗组无灌注区、眼底新生血管和侧枝循环建立的改善程度均优于对照组。 结论：活血通脉利水明目法（散血明目片）是治疗非缺血型视网膜静脉阻塞的有效方法,能改善患者视功能,可反映在眼底荧光血管造影的多项指标上。     

加用中医辨证治疗眼内出血的疗效观察

[目的]观察加用中医辨证治疗眼内出血的临床疗效。[方法]100例眼内出血患者随机分为治疗组（50例50眼）与对照组（50例50眼）,治疗组治以中医辨证拟方联合西医常规治疗方法,对照组治以西医常规治疗方法,10天为1个疗程,治疗3个疗程后评价疗效。[结果]治疗组治愈32例,显效12例,好转5例,无效1例;对照组治愈12例,显效10例,好转8例,无效20例;两组差异有显著性（P〈0．01）.[结论]西医常规治疗加中医辨证治疗是治疗眼内出血的有效方法。     

益气养阴活血利水法对兔视网膜脱离后玻璃体腔液中ET-1表达的影响

目的:研究益气养阴活血利水之复明片对兔实验性视网膜脱离后玻璃体腔内ET-1表达的影响。方法:用有色家兔72只设正常对照组(A组),及制作视网膜脱离模型后分模型组(B组)、西药对照组(C组)、复明片组(D组)。并于造模后第7天、14天、21天分别取玻璃体腔液用放射免疫分析方法测定ET-1的表达。结果:视网膜脱离后玻璃体腔中ET-1表达均明显上升,7天时表达骤然升高,对照组明显高于复明片治疗组,且相互间各组比较差异均有统计学意义(P<0.05);14天时结果显示各组表达较7天时明显下调,但仍明显高于正常对照组,西药组与正常对照组、复明片治疗组与正常对照组及复明片治疗组与西药对照组比较差异无统计学意义,其余各组相互间比较差异均有统计学意义(P<0.05);21天时视网膜基本已复位,表达进一步下调,但仍高于正常,且相互间各组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:益气养阴活血利水之复明片能下调视网膜脱离后玻璃体腔中ET-1的表达。