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1.
2.
目的:获得热休克蛋白90β(HSP90β)基因干扰和过表达慢病毒表达系统,并检测其在人骨肉瘤细胞株Saos-2中的表达水平。方法:设计合成shRNA,以慢病毒表达质粒构建HSP90β干扰和过表达载体,酶切电泳、测序技术鉴定载体构建是否成功。重组病毒转染H1299细胞,以嘌呤霉素筛选稳定转染的Saos-2细胞,通过荧光显微镜观察计数获得转染效率。将感染好的细胞分为干扰NC组(NEG-shRNA)、干扰组(shRNA-HSP90β)、过表达NC对照组(NEG-pEZ)及过表达组(pEZ-HSP90β)。通过qRT-PCR 与Western blotting 分别从mRNA 和蛋白表达水平验证目的基因的干扰和过表达水平。结果:插入慢病毒表达载体的基因片段与目的基因的碱基序列完全一致。病毒包装成功后,嘌呤霉素最小致死浓度1 μg/ml,感染复数200,感染人Saos-2的感染效率达80%,其中shRNA-HSP90β组干扰效率为86.35%,pEZ-HSP90β组的mRNA相对表达量增加2.8倍。进一步研究发现,shRNA-HSP90β组较NEG-shRNA组中HSP90β蛋白表达明显降低,pEZ-HSP90β组较NEG-pEZ组HSP90β蛋白表达增加。结论:HSP90β基因干扰和过表达慢病毒载体构建成功,并能够在Saos-2中稳定表达。 相似文献
3.
妊娠期附件包块包括生理性包块、炎性包块、良性肿瘤、恶性肿瘤等,近年来发生率有上升趋势。妊娠期卵巢生理性包块多在妊娠中、晚期或产后自行消失;卵巢良性肿瘤若无并发症出现,未阻塞产道,妊娠期可密切观察;而妊娠期卵巢恶性肿瘤危及母胎安全,需积极干预处理。因此,孕期对于卵巢恶性肿瘤的诊断和鉴别诊断具有重要的意义。在诊断过程中,影像学检查及肿瘤标志物的结果需考虑妊娠本身的影响。文章主要阐述妊娠期附件包块的诊断方法及特点。 相似文献
4.
目的建立青霉素杂质谱HPLC分析方法,并将其转换成UPLC/UHPLC方法。方法以青霉素混合降解溶液为样品;首先分析《中国药典》(2010年版,ChP2010)方法甲醇-缓冲盐二元流动相色谱系统的缺陷;再利用实验设计理念,以响应曲面法(response surface methodology,RSM)的中心组合设计(central composition design,CCD)对色谱系统进行优化,满意度函数法确定最优色谱条件,并优化梯度洗脱条件;最后,利用软件对HPLC方法的流速、进样体积和梯度时间进行几何缩放,并通过色谱柱的选择,将其分别转换为UPLC方法和UHPLC方法。结果新HPLC方法:色谱柱为Capcell Pak C18 MGII(4.6mm×250mm,5μm),流速:1.0m L/min,进样体积:20μL;UPLC方法:色谱柱为Cortecs C18(2.1mm×100mm,1.6μm),流速:0.35m L/min,进样体积:2.0μL;UHPLC方法:Cortecs C18(4.6mm×150mm,2.76μm),流速:0.8mL/min,进样体积:10μL。3种方法的检测波长均为225nm,柱温均为34℃;流动相A均为磷酸盐缓冲液(取磷酸二氢钾10.6g,加水至1000mL,用磷酸调pH至3.4)-甲醇(72:14,V/V),流动相B均为乙腈;均为梯度洗脱,但梯度洗脱表不同。结论 3个色谱系统的分离效果(出峰顺序和个数)相似。新HPLC方法可以分离出更多的降解杂质,并明显改善了青霉素峰的拖尾,缩短了分析时间。 相似文献
6.
7.
8.
肠道微生物群被称为人体的第二个基因库,在维持人体平衡中起主要作用。不良饮食习惯、抗生素滥用、病理状态和生活环境改变会对肠道菌群产生负面影响,以引起多种疾病。最新研究发现肠道微生物群与骨质疏松症之间有着密切的联系,同时引入了一个新术语"骨微生物学",该研究领域旨在弥合骨骼生理学、胃肠病学、免疫学和微生物学之间的差距。本文简要介绍了肠道菌群通过免疫系统、新陈代谢和内分泌环境以及其他因素影响骨代谢的潜在机制,通过研究肠道菌群与骨骼健康之间的关系,不仅对于维持骨骼健康和最大程度地减少骨质疏松症很重要,而且对于肠道微生物群是否可作为骨质疏松症新型治疗靶标以及是否可用作骨折预测的生物标志物方面具有重要意义。 相似文献
10.
目的观察针刺对自然分娩产妇使用卡前列素氨丁三醇注射液所引起的不良反应的防治作用。方法使用卡前列素氨丁三醇注射液的自然分娩产妇60例,随机分为针刺组和对照组,每组30例。针刺组给予针刺治疗,对照组不予处理。记录产妇宫体注射卡前列素氨丁三醇注射液时(T_0),注射后5 min(T_1),注射后10 min(T_2),及出产房时(T_3)的血压(BP)、心率(HR)、血氧饱和度(SPO_2),并比较两组不良反应发生率。结果对照组T_1、T_2的收缩压(SBP)、舒张压(DBP)、HR明显高于T_0,差异有统计学意义(P0.05);针刺组各时刻比较,差异无统计学意义(P0.05)。针刺组呕吐、胸闷、腹泻的发生率低于对照组,差异有统计学意义(P0.05);两组恶心和颜面潮红的发生率比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论针刺可以有效地缓解自然分娩产妇因使用卡前列素氨丁三醇注射液所引起的不良反应,产妇循环更平稳。 相似文献