大鼠前脂肪细胞的原代培养分化

 目的 建立一种简便的大鼠前脂肪细胞的原代培养方法。 方法 无菌取成年Wistar大鼠的腹股沟纯脂肪颗粒，采用酶消化法进行原代培养。在倒置显微镜下观察细胞形态及生长情况，以油红O脂肪染色法进行原代培养细胞的鉴定。 结果 培养细胞的形态学观察显示，脂肪细胞贴壁后初为类圆形，3 d 后渐成梭形；7~8 d 细胞增殖明显，形状由多角梭形变为椭圆形，并开始积聚脂肪颗粒；10 d 后细胞呈椭圆形、圆形，胞内积聚大量脂肪颗粒。培养 10 d 的细胞经油红 O 染色后于普通光镜下观察，见细胞内出现红染颗粒，可以鉴定细胞分化为前脂肪细胞。 结论 成功建立了大鼠前脂肪细胞的原代培养方法，为脂肪内分泌学研究提供了制备适用细胞模型的手段。     

白脉膏剂贴敷对裸鼠穴区组织内血管和肥大细胞的影响

目的：通过体表穴区贴敷白脉膏剂，观察裸鼠皮肤组织血管和肥大细胞数量的变化，以了解该药物对组织微循环血流的作用。方法：BALB／C—nu成年裸鼠15只，分为白脉膏剂贴敷组和对照组。动物贴敷白脉膏剂7天后，分别在2组动物的背部取涂药部位（以第4胸椎为中心）和同体未涂药部位，以及对照组相应部位的皮肤组织，进行切片染色观察。结果：在涂白脉膏剂的真皮深层以下的组织内可见明显扩张的血管和肥大细胞数量增多。在同体对照或对照组的皮肤组织内，虽也见少量扩张的血管，但明显少于涂药皮肤组织内的血管数量。统计学处理结果显示白脉膏组涂药部位的皮肤组织内血管数量和肥大细胞数量，均明显多于同体未涂药部位和对照组的数量，有非常显著性差异（P〈0．01）。结论：白脉膏剂对涂药部位皮肤组织有明显的扩张血管作用和促肥大细胞聚集作用。     

青鹏膏剂贴敷裸鼠穴区对皮肤内血管和肥大细胞的影响

目的:通过体表穴区贴敷藏药制剂(青鹏膏剂),观察裸鼠皮肤组织血管和肥大细胞数量的变化,以了解该药物对微循环血流的作用,方法:健康成年裸鼠15只,分为青鹏膏剂贴敷组和对照组。动物贴敷青鹏膏剂7天后,分别在两组动物的背部取涂药部位(以第4胸椎为中心)和相应未涂药部位皮肤组织,进行切片染色观察。结果:在涂青鹏膏剂的真皮深层以下的组织内明显可见扩张的血管和肥大细胞数量数量增多。在同体对照或对照组的皮肤组织内,虽也见少量扩张的血管,但明显少于涂药的皮肤组织内的血管数量。统计学处理结果显示青鹏膏剂组涂药部位的皮肤组织内血管数量和肥大细胞数量,均明显多于同体未涂药部位和对照组的数量,有非常显著性差异(P<0.001)。结论:青鹏膏剂对涂药部位皮肤组织内的血管明显有扩张作用和促肥大细胞聚集作用。     

电针和悬灸对“大椎”穴区肥大细胞脱颗粒不同影响的研究

目的:观察电针和悬灸对大鼠穴区肥大细胞(mast cells,MCs)分布和脱颗粒的不同影响,以探索针灸治病的机制。方法:正常成年Wistar大鼠15只,分为对照组、电针组和悬灸组。电针(疏密波,频率3~10 Hz,电压2~4 V)或悬灸(2壮)"大椎"穴20 min后,取"大椎"穴区组织恒冷箱切片,甲苯胺兰染色,显示皮肤、皮下组织和肌肉组织内MCs的分布、数量和脱颗粒情况。结果:在穴区组织内,从真皮至皮下组织、肌肉组织均可见MCs存在和脱颗粒发生。悬灸刺激的"大椎"穴区的组织切面中心部位,从皮肤表面至皮下组织内MCs数量很少,但中心周边的MCs数量多,脱颗粒明显。悬灸组发生脱颗粒的MCs数量明显多于对照组和电针组,电针组脱颗粒细胞明显多于对照组,差异均有显著性意义(P<0.05,0.01)。结论:电针和悬灸对穴区组织内MCs的数量、分布以及细胞的脱颗粒的影响明显不同,艾灸对MCs脱颗粒的影响强于电针。     

针刺大鼠耳穴及体穴治疗实验性胃溃疡的疗效与肥大细胞的关系

目的:研究针刺耳"胃"穴及体穴"足三里"治疗实验性胃溃疡过程中,穴区内肥大细胞(mastcells,MC)的分布和功能变化与疗效的相关性。方法:正常成年Wistar大鼠30只随机分为对照组、模型组、电针组,每组10只。后2组首先在胃窦前壁肌层与浆膜层之间注入0.05ml20%冰醋酸制作胃溃疡模型,电针组在造模后连续7d电针(2/15Hz,1mA,30min)胃溃疡大鼠耳"胃"及"足三里"穴。取耳"胃"及"足三里"穴区组织恒冷箱切片,乙酰胆碱酯酶组化染色并用甲苯胺兰复染,显示皮肤真皮层MC的分布、数量和脱颗粒情况;取胃窦前壁含溃疡的胃组织,石蜡包埋,切片,行苏木精-伊红(HE)染色,电镜下观察胃窦前壁黏膜层的形态变化。结果:对3组大鼠的穴区真皮层MC进行对比观察,其中模型组MC总数量均明显多于电针组和对照组(P<0.01);模型组MC脱颗粒率明显高于电针组与对照组,电针组细胞脱颗粒率明显多于对照组,3组间差异均非常显著(P<0.01)。HE染色结果显示:对照组胃壁黏膜面光滑无变化;而模型组胃窦壁黏膜面有很明显的溃疡缺损,并已超过黏膜肌层;电针组胃窦壁黏膜面稍有缺损,尚未达黏膜肌层。结论:耳穴、体穴区组织内MC的总数及脱颗粒率的变化不但可反映胃溃疡的严重程度,还与针刺耳穴及体穴治疗胃溃疡的疗效密切相关。     

针灸效应与经穴肥大细胞相关性研究概况

本文根据近期国内外对肥大细胞(Mast cells,MCs)的研究进展,及其与针灸经络有关的研究报道,在阐述MCs的形成、分布、分型、形态学特征、脱颗粒及其生物学效应的基础上,分析归纳了针灸效应与穴区组织内MCs的数量、脱颗粒变化的相关性,以及它们对循经感传的作用机制。综述结果表明,MCs作为穴区组织的特征成分之一,与针灸效应的产生密切相关;MCs通过对神经、免疫、循环等系统的影响,参与机体生理和病理的调控过程。本文为今后进一步了解和探索MCs与经络之间的关系提供了参考资料。