丹莪妇康颗粒生产工艺研究简

目的 研究生产丹莪妇康颗粒的最佳生产工艺条件.方法 对剂型选择、提取工艺路线及制剂工艺技术等方面进行考察.结果 丹莪妇康颗粒的最佳生产工艺条件为将处方药材用70％乙醇浸渍24 h后,以3～5 mL/min渗漉,收集5倍量漉液,减压回收乙醇并浓缩至相对密度为1.30（50℃）;药渣与其余药材加8倍量水煎煮2次,2 h/次,合并煎液,滤过,滤液浓缩至相对密度为1.30（50℃）;合并稠膏,减压干燥成干膏,粉碎,过80目筛,得干膏粉,加入糊精和甜菊素适量,混均,以70％乙醇制软材,用16目筛制粒,干燥,过14目筛整粒,即得.结论 优选的丹莪妇康颗粒生产工艺,既保证了产品质量,又节约了能源,降低生产成本,适合于工业化大生产.     

ITS2序列鉴定十大功劳属药用植物

目的:基于ITS2序列鉴定十大功劳属药用植物,以避免该属物种药用基原混乱。方法:收集十大功劳属物种作为实验材料,采用改良的CTAB法提取总DNA,经PCR扩增、双向测序和序列拼接,应用MEGA 6.0对该属13个物种43条ITS2序列进行序列变异分析,计算种内种间Kimura 2-parameter(K2P)距离,构建系统邻接(NJ)树。结果:十大功劳属13个物种43条ITS2序列分析结果表明,各物种种内最大(平均)K2P距离均不大于种间最小(平均)K2P距离;系统NJ树结果显示,十大功劳属其中9个物种各自聚为一支。结论:ITS2序列对十大功劳属药用植物具有较好鉴定效果,为该属药用植物的临床用药安全提供了分子依据。     

木蝴蝶总黄酮提取工艺优选

目的 筛选木蝴蝶总黄酮的最优提取工艺.方法 以木蝴蝶苷B为对照品,采用紫外-可见分光光度法,以木蝴蝶总黄酮含量为评价指标,以提取方法、提取溶剂种类、提取溶剂体积分数、提取温度、提取时间、料液比为考察因素,优选最佳提取工艺,并进行验证.结果 最佳提取工艺为采用回流提取法,以75％乙醇为提取溶剂,料液比为1:20(m/V)...     

龙蔓藤茶辅助降血脂功能实验研究

摘 要 目的： 研究龙蔓藤茶调节血脂的作用。方法: 用高脂饲料喂养雄性SD大鼠,随机分为模型组、龙蔓藤茶高剂量组37.80 g·kg^-1、中剂量组12.60 g·kg^-1、低剂量组6.30 g·kg^-1及降脂药物组（180 mg·kg^-1）,连续给药30 d,观察各组大鼠体质量、血清总胆固醇( TC )、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C) 等指标的变化。结果:各给药组体质量增长与模型组比较,差异无统计学意义（P＞0.05）,大鼠未出现明显中毒症状;模型组实验后的TC和TG明显高于实验前（P＜0.05）;给药30 d后,与模型组比较,龙蔓藤茶37.80 g·kg^-1剂量组可显著降低高脂饲料大鼠血清TC和TG水平（P<0.05）。结论: 龙蔓藤茶具有辅助降血脂的作用。     

基于ITS2序列的禹州漏芦和漏芦药材基因识别

目的：应用ITS2序列鉴别禹州漏芦和漏芦药材的真伪,为临床准确用药提供可靠的基因识别方法。方法：收集多基原药材禹州漏芦基原物种蓝刺头和华东蓝刺头共14份样品和漏芦药材基原物种祁州漏芦8份样品,经实验获取ITS2序列,结合GenBank中20条相关近缘混伪品序列,建立以上物种和混伪品的DNA条形码鉴定方法;将从市场上收集的11份禹州漏芦和20份漏芦药材的ITS2序列与以上序列进行比对分析和构建系统NJ树。结果：禹州漏芦两个基原物种的序列主导单倍型相同;禹州漏芦和漏芦药材基原物种最大K2P距离均小于其与混伪品的种间最小K2P距离;系统NJ树分析均能准确区分禹州漏芦和漏芦药材与各自混伪品。药材检测结果表明,11份禹州漏芦中10份为正品,1份为伪品;20份漏芦中2份为正品,18份为伪品。结论：本研究建立了基于ITS2序列的禹州漏芦和漏芦药材DNA 条形码鉴定方法,可用于快速鉴别禹州漏芦和漏芦药材真伪。     

半枝莲总生物碱的纯化分离及其抗肿瘤活性研究

目的 筛选半枝莲总生物碱的纯化分离最优方法及抗肿瘤活性最好部位。方法 通过大孔树脂色谱法及酸提碱沉法分别纯化半枝莲总生物碱,利用紫外光谱法测定各部分总生物碱含量;同时,对各分离部位进行人肝癌细胞(HepG2)细胞毒活性考察,并用Anneix V/PI双标记法检测活性最好部位对细胞凋亡的影响。结果 半枝莲最优的纯化方法为大孔吸附树脂法,其中细胞毒活性表现最好的部位为大孔树脂70%乙醇洗脱部分。细胞流式实验结果显示在一定浓度范围内70%乙醇洗脱部分对HepG2细胞的凋亡呈剂量依赖性。结论 半枝莲生物碱能有效的诱导肿瘤细胞发生凋亡,且大孔树脂70%乙醇洗脱所得生物碱抗肿瘤活性最强。本研究为半枝莲中具有抗肝癌作用总生物碱的筛选提供了可靠方法,也为中药半枝莲经济价值的评估提供了一定参考依据。     

基于网络药理学和分子对接的半枝莲二萜类化合物抗肝癌作用机制

目的基于网络药理学和分子对接技术探讨半枝莲二萜类成分抗肝癌的作用机制。方法根据文献调研( 1987年 1月至 2022年 7月)获得的 155个半枝莲二萜类化合物,通过 SwissADME平台筛选后得到符合条件的 93种活性成分,并通过 Swiss Target Prediction网络平台预测得到其中 65个化合物可能的作用靶点;通过 GeneCards、OMIM、PharmGkb、TTD、DrugBank以及 GEO、TCGA数据库获取与肝癌有关的靶点,利用 Cytoscape软件构建可视化“活性成分 -靶点 -肝癌”网络作用图,并通过度值筛选主要活性成分;使用 String平台进行蛋白质–蛋白质相互作用( PPI)网络功能富集分析,利用 Cytoscape软件构建 PPI可视化网络图,通过 cytoHubba插件的评分规则筛选出核心靶点和关键靶点;采用 R语言软件包对半枝莲二萜抗肝癌的作用靶点进行基因本体( GO)功能和京都基因和基因组数据库( KEGG)通路富集分析;使用 AutoDock vina软件对主要活性成分与关键靶点进行对接分析。结果筛选出半枝莲二萜中 6种活性成分包括 Scutebarbolide I、Scutebata O、Scutelinquanine D、Scutellone F、 Scutellone H和 Scutebarbatine J,预测得到 10个抗肝癌核心靶点,其中蛋白 STAT3、MAPK1、MAPK3、HSP90AA1、PIK3R1和 PIK3CA为关键靶点。基因富集分析得到 953个 GO功能条目和 137条通路( P<0.05);分子对接结果显示,半枝莲二萜活性成分与关键靶点间存在潜在结合位点;网络药理学分析表明半枝莲二萜成分可能通过肽基 .丝氨酸磷酸化、肽基 .丝氨酸修饰、磷酸酶结合、蛋白质丝氨酸 /苏氨酸激酶活性等生物学过程,作用于 STAT3、MAPK1、MAPK3、PIK3R1、PIK3CA等关键蛋白的表达,进一步调控癌症中蛋白多糖、化学致癌受体激活、催乳素信号通路、癌症程序性死亡受体配体 1(PD-L1)表达和程序性死亡受体 1(PD-1)检查点通路等信号通路,发挥治疗肝癌作用。结论半枝莲二萜类化合物能够通过多分子、多靶点、多通路、多作用机制达到治疗肝癌作用。     

心叶双蝴蝶化学成分分析

目的:研究心叶双蝴蝶全草中的化学成分。方法:取心叶双蝴蝶全草,粉碎,分别用90%,60%乙醇渗漉提取,减压回收溶剂得浸膏。加适量的水使浸膏分散溶解,分别用石油醚、乙酸乙酯和水饱和正丁醇进行萃取,得到石油醚部位、乙酸乙酯部位和正丁醇部位。取乙酸乙酯部位和正丁醇部位分别用硅胶柱色谱,大孔树脂,Sephadex LH-20葡聚糖凝胶,反相制备液相色谱等多种方法对其进行反复分离纯化,并通过~1H-NMR和~(13)C-NMR等波谱技术进行结构鉴定。结果:从乙酸乙酯萃取部位以及正丁醇萃取部位中分离得到7个化合物,分别鉴定为1,7-二羟基-3,8-二甲氧基口山酮(1),8-羟基-1,2,6-三甲氧基口山酮(2),ancerin(3),异牡荆素(4),异荭草素(5),morroniside(6),6'-O-B-D-glucopyranosylmoroniside(7)。结论:化合物3,6,7为首次从该植物中分离得到;同时,所分离得到的化合物具有一定的抗炎、抗菌、保肝、抗凝血及血小板聚集、保护心肌细胞等活性,为进一步开展其药效物质基础研究以及该药材的开发利用提供了很好的参考依据。也为双蝴蝶属植物的化学亲缘关系研究提供了一定的依据。     

半枝莲抑制结肠癌细胞迁移和侵袭实验研究

目的:探讨半枝莲对结肠癌细胞迁移和侵袭的抑制作用及相关机制。方法:体外培养结肠癌SW620、CCL-228细胞系,用浓度为10 μmol/L半枝莲进行干预。将SW620、CCL-228细胞分为对照组(不做任何处理)、10 μmol/L半枝莲组、Rac1L61组(Rac1L61过表达质粒转染细胞)、联合组(Rac1L61过表达质粒转染细胞后加入10 μmol/L半枝莲)。实时细胞分析(RTCA)系统评估半枝莲对细胞的抑制作用,MTT法检测细胞活力,划痕实验检测细胞迁移,Transwell实验检测细胞侵袭,Western blotting法检测Rac1、p-PAK1、MMP2、MMP9蛋白表达水平。结果:10 μmol/L半枝莲组SW620、CCL-228细胞中Rac1、p-PAK1蛋白表达均低于对照组,差异有统计学意义(均P<0.05)。转染过表达Rac1质粒后,SW620、CCL-228细胞Rac1、p-PAK1蛋白表达均升高,而用10 μmol/L半枝莲干预可逆转这种效应。10 μmol/L半枝莲组SW620、CCL-228细胞侵袭和迁移能力均低于对照组,差异有统计学意义(均P<0.05)。转染过表达Rac1质粒后,SW620、CCL-228细胞侵袭和迁移明显增强,而用10 μmol/L半枝莲干预可逆转这种效应。10 μmol/L半枝莲组MMP2、MMP9蛋白表达低于对照组(均P<0.05)。转染过表达Rac1质粒后,SW620、CCL-228细胞MMP2、MMP9蛋白表达均升高,而用10 μmol/L半枝莲干预可逆转这种效应。结论:半枝莲通过调节Rac1/PAK1信号通路活性,减少MMP9、MMP2表达而降低结肠癌细胞迁移和侵袭能力。