乙脑E蛋白主要抗原片段与结核杆菌hsp70在毕赤酵母中的融合表达

目的构建乙脑E蛋白主要抗原片段与结核杆菌热休克蛋白70（Mycobacterium tuberculosis heat shock protein70，Mt．hsp70）基因融合表达载体，并研究其在巴斯德毕赤酵母中的表达情况，为改善发展新的乙脑疫苗打基础。方法以酵母表达载体pPICZa-A为基本单位构建E蛋白基因主要抗原片段与hsp70的融合表达载体，融合基因以酶切位点BamHⅠ连接，用电穿孔法转化酵母X-33，用Zeocin平板筛选重组子，经甲醇诱导表达后，SDS-PAGE和免疫印迹分析表达产物。结果E蛋白基因与hsp70的融合表达载体构建成功，SDS-PAGE显示，其相对分子质量为114kD，与实际大小相符，经凝胶薄层扫描分析，表达量为33mg／L，经Western印迹验证，有良好的抗原性。结论E—hsp70融合蛋白在酵母中的表达为下一步研究hsp70是否能作为E蛋白免疫时的理想佐剂作准备。     

缺血性脑卒中后非痴呆认知功能障碍的危险因素

目的 探讨缺血性脑卒中后非痴呆认知功能障碍(cognitive impairment no dementia,CIND)的危险因素.方法 以19～80岁汉族初发缺血性脑卒中患者为研究对象,起病后3个月采用简易智能量表和美国精神疾病统计和诊断于册第4版修订本进行认知测定,利用单因素和多元Logistic回归分析研究CIND患者的危险因素.结果 185例研究对象纳入统计分析,42例诊断为CIND,占22.7%.多因素Logistic回归分析发现,大面积和中等面积梗死(OR:4.687,P＜0.05;OR:4.734,P＜0.05)、糖尿病(OR:2.887,P＜0.05)是缺血性卒中后CIND的独立危险因素.结论 糖尿病、梗死面积是缺血性脑卒中后CIND的独立危险因素.     

早期肠内营养在重症脑血管病治疗中的应用

目的探讨早期肠内营养支持在重症脑血管病治疗中的临床应用价值。方法选择笔者所在科室2008年1月～2011年6月收治的重症脑血管病患者112例,随机分为治疗组和对照组,各56例。治疗组给予肠内营养制剂,对照组给予肠外营养治疗,分别于营养支持治疗后1d和21d后对两组患者的生化指标,以及21d后免疫学指标和NIHSS评分、并发症发生率等指标进行比较。结果两组患者营养支持治疗后1d在生化指标等各项观察指标差异无统计学意义(P>0.05),治疗21d后治疗组各项生化指标均显著好于对照组(P<0.05);治疗组21d后免疫学指标除IgM和IgG外均显著好于对照组(P<0.05);两组NIHSS评分均有改善,但治疗组改善优于对照组(P<0.05);治疗组并发症发生率显著低于对照组(P<0.05)。结论早期肠内营养干预能够改善急性重症脑血管病患者的营养、免疫状态,降低并发症发生率,有助于改善患者近期的预后,值得临床推广。     

白藜芦醇抑制人牙龈成纤维细胞炎症和氧化应激的机制研究

目的 探讨白藜芦醇（RSV）对牙龈卟啉单胞菌脂多糖（LPS）诱导的人牙龈成纤维细胞（HGF）的炎症和氧 化应激的调节作用。方法 原代培养HGF,将细胞分为实验1和实验2：实验1细胞分为对照组、LPS组、RSV 20 μmol/L 组、RSV 40 μmol/L组、RSV 80 μmol/L组、LPS+RSV 20 μmol/L组、LPS+RSV 40 μmol/L组和LPS+RSV 80 μmol/L组;实 验2细胞分为对照组、LPS组、LPS+RSV 40 μmol/L 组、LPS+RSV 40 μmol/L+E5564组和LPS+E5564组。通过CCK-8 法评估细胞活力。利用酶联免疫吸附试验测定白细胞介素（IL）-1β、IL-6、IL-8、肿瘤坏死因子（TNF）-α、超氧化物歧 化酶（SOD）、丙二醛（MDA）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）水平。通过Western blot分析测量蛋白的表达水平。结 果 20、40和80 μmol/L RSV对HGF均没有明显的细胞毒性作用。在LPS诱导的HGF细胞中,40和80 μmol/L RSV 通过下调IL-1β、IL-6、IL-8和TNF-α的表达减弱炎症反应,降低了MDA的含量,并显著提高了SOD的水平,80 μmol/L RSV显著提高了GSH-Px水平（P＜0.05）。此外,20、40和80 μmol/L RSV可诱导Toll样受体4（TLR4）/MyD88/NF-κB 信号通路的失活,其均可降低TLR4、MyD88和p-p65蛋白的表达水平（P＜0.05）。TLR4抑制剂（E5564）通过下调IL- 1β、IL-6、IL-8和TNF-α的产生以及上调GSH-Px水平进一步增强了RSV对炎症和氧化应激损伤的缓解作用（P＜ 0.05）。结论 RSV可通过诱导TLR4/MyD88/NF-κB信号通路失活,减轻LPS导致的HGF炎症和氧化应激损伤。     

肿瘤坏死因子-α在正畸牙移动中作用的研究进展

肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）为一种单核细胞因子,参与体内的炎症反应,同时在核因子κ B受体活化因子配体的共同作用下可以促进破骨细胞的形成。正畸牙齿移动是在机械应力作用下牙周组织与骨组织共同改建的过程,需要破骨细胞与成骨细胞及其他牙周因子共同作用。正畸治疗过程中,在正畸力的作用下牙周组织会处于轻微炎症的状态,产生的各种炎症因子对牙周组织改建有促进作用。其中TNF-α在正畸牙齿移动过程中发挥着重要作用,能够促进破骨细胞形成,同时对成骨细胞的形成也有一定影响。本文对肿瘤坏死因子-α在正畸牙齿移动中作用的研究进展进行综述。     

rs2231142位点多态性与川东北地区人群原发性痛风的关系

目的:检测ABCG2基因rs2231142位点多态性与川东北地区原发性痛风的相关性,为该地区原发性痛风的发病机制研究提供线索.方法: 收集川东北地区原发性痛风样本175 例和正常健康体检样本277 例,Taqman-MGB探针法分析rs2231142位点多态性与原发性痛风的相关性.结果: rs2231142位点各基因型分布频率在痛风患者和正常人群之间比较差异有统计学意义(P＜0. 01),等位基因A在痛风患者中的携带频率显著高于正常人群,分别为43. 7%和31. 6% (P＜0. 01).结论: rs2231142位点A等位基因和AA基因型为川东北地区原发性痛风发病的易感因素.     

应用AdEasy-1腺病毒系统构建含人nm23-H1基因的重组腺病毒质粒

目的应用AdEasy-1腺病毒载体系统制备含人nm23-H1基因的重组腺病毒载体。方法设计带有限制性内切酶KpnⅠ和XhoⅠ双酶切位点的引物,利用PCR法从质粒pMD18-T-nm23-H1上克隆出nm23-H1 cDNA并定向连接至穿梭载体pShuttle-CMV上,行KpnⅠ和XhoⅠ双酶切鉴定和测序。将pAdEasy-1腺病毒骨架载体电转化B J5183感受态细菌,Pm eⅠ酶线性化并去磷酸化处理重组质粒pShuttle-CMV-nm23-H1,并电转化含pAdEasy-1的B J5183感受态细菌,利用卡那霉素筛选,PacⅠ酶切鉴定,重组腺病毒质粒在XLGold-10感受态细菌中大量扩增,产物行PCR鉴定。结果经KpnⅠ和XhoⅠ双酶切pShuttle-CMV-nm23质粒得到460bp的片段,该片段经测序与nm23-H1基因序列一致,重组腺病毒质粒pAdEasy-nm23-H1经PacⅠ酶切后可以得到3.0kb和4.5kb的片段,大量扩增重组腺病毒质粒后行PCR仍然得到460bp的片段。结论利用AdEasy-1腺病毒系统成功构建含人nm23-H1基因重组腺病毒质粒。     

痛风合并糖尿病患者的临床指标分析

目的：通过对痛风合并糖尿病患者及痛风不合并糖尿病患者的血尿酸、血脂等指标进行对比分析,探讨痛风合并糖尿病与相关指标的关系。方法收集2010年5月至2013年1月我院门诊或住院确诊的痛风患者共215例,分为痛风血糖正常组（177例,A组）和痛风合并糖尿病组（57例,B组）,分别搜集其临床资料及检测肝肾功能、血脂、血糖水平并进行统计学分析。结果 B组年龄、动脉收缩压及舒张压、血尿酸水平、总胆固醇、极低密度脂蛋白明显高于A组（P＜0.05或0.01）,高密度脂蛋白低于A组[（1.00±0.32）mmol/L vs．（1.13±0.37）mmol/L,P＜0.05];Spearman相关分析发现,血尿酸水平与年龄（r＝0.125,P＜0.05）、体重指数（r＝0.218,P＜0.01）、总胆固醇（r＝0.200,P＜0.01）、极低密度脂蛋白（r＝0.274,P＜0.01）、血糖（ r＝0.162,P＜0.01）呈正相关,与高密度脂蛋白呈负相关（ r＝0.186, P＜0.05）;而血糖水平与年龄（ r＝0.155,P＜0.05）、体重指数（ r＝0.160, P＜0.01）、腰臀比（ r＝0.203, P＜0.01）、动脉收缩压及动脉舒张压（r＝0.204,P＜0.01;r＝0.157,P＜0.05）、总胆固醇（r＝0.283,P＜0.01）、甘油三酯（r＝0.234,P＜0.01）、极低密度脂蛋白（r＝0.299,P＜0.01）、载脂蛋白B100（r＝0.170,P＜0.01）、血尿酸（r＝0.162,P＜0.01）、胱抑素C（r＝0.200,P＜0.05）呈正相关,与高密度脂蛋白（r＝-0.136,P＜0.05）呈负相关。结论痛风合并糖尿病者较痛风不合并糖尿病者血脂代谢更紊乱,腹型肥胖及血压升高更明显,增龄,肥胖,总胆固醇增高、高极低密度脂蛋白和低高密度脂蛋白血症的痛风患者可能是并发糖尿病的危险因素。     

CTLA-4 在骨重建中发挥免疫调节作用的研究进展

CTLA-4 作为免疫负调节因子,通过抑制T 细胞活化,参与调控机体免疫反应的平衡。近年来CTLA-4 免疫球蛋白生物制剂在自身免疫疾病、移植排斥反应、抗肿瘤药物等领域获得的基础研究成果颇具应用价值。CTLA-4 能够抑制T细胞活化调节免疫反应,从而减少RANKL、TNF-α等细胞因子的表达,能够直接或间接地调控破骨细胞的成熟,参与破骨细胞主导的骨破坏与骨重建。本文就当前CTLA-4 在自身免疫疾病中减缓骨破坏的作用、CTLA-4 对破骨细胞成熟过程的间接与直接的影响作用以及CTLA-4 在局部组织中对关节对牙周组织与牙槽骨骨重建的作用等这些最新的相关研究做此综述,并展望未来可能的基础研究与临床应用方向。