大鼠肠系膜微血管对光动力作用敏感性的研究

目的　比较不同分级的微血管对光动力作用组织敏感性差异 ,了解微循环因素对光动力作用敏感性的影响。方法　采用改良大鼠肠系膜活体微循环观察法 ,以Wistar大鼠为研究对象 ,采用显微数码相机录像和IMAGEPRO图像处理系统 ,选择红细胞流柱宽度百分比为评价指标 ,实时观测不同分级微血管在光动力作用中的改变及差异。结果　光动力作用时 ,微血管内皮细胞肿胀 ,红细胞聚集 ,白细胞贴壁 ,附壁血栓形成 ,管腔狭窄 ,红细胞流径减小 ,血流停滞 ,管腔闭塞。血卟啉衍生物介导光动力治疗时 ,毛细血管、微静脉、微动脉、小静脉 ,小动脉血管完全闭塞的时间分别为 6、1 6、1 8、2 2、2 6min,血卟啉单甲醚介导光动力治疗时各级微血管完全闭塞的时间为 6、1 8、30、32、4 4min ,竹红菌乙素介导光动力治疗时 ,各级微血管完全闭塞的时间为 1 6、2 6、36、4 0、5 8min。不同血管的红细胞流柱宽度百分比下降速度差异有显著意义 (P <0 0 5 )。结论　在相同的光动力条件下 ,各级微血管反应敏感性差异显著 ,由强到弱依次表现为 :毛细血管 >微静脉 >微动脉≈小静脉 >小动脉。微血管对血卟啉衍生物、血卟啉单甲醚和竹红菌乙素所介导的光动力损伤敏感性规律一致。     

治疗视网膜脉络膜新生血管的竹红菌乙素光动力学疗法实验系统的建立

目的 建立一种治疗视网膜脉络膜新生血管的竹红菌乙素光动力学疗法实验系统。方法 1.在裂隙灯显微镜下开创激光窗口，光纤连接激光器和裂隙灯显微镜，使激光和裂隙灯照明同光路到达眼底，作为照射系统；2．通过四甲偶氮唑盐(MTT)法检测光敏剂竹红菌乙素(HB)体外光敏性，和苯并卟啉衍生物单酸A环(BPD-MA)相比，初步判断其光敏性；3．以光敏剂HB为例，青紫蓝兔为实验对象，进行PDT治疗，通过眼底观察，荧光眼底造影、光学显微镜和电子显微镜检查照光部位的生物学效应，检测建立的实验系统的实用性，可靠性。结果 照射系统输出稳定，由激光器发出的功率和裂隙灯显微镜的激光窗口末端的输出的功率的耦合率为60％。国产HB体外光敏性和BPD-MA相似。HB-PDT仅对脉络膜毛细血管造成损伤而对周围正常组织损伤小，达到选择性治疗目的，有进一步研究价值。结论 新建立的照射系统和光敏剂光敏性体外评价系统，以及体内观察生物学效应的方法，可作为初步判定光敏剂是否适合治疗视网膜或脉络膜新生血管的方法。     

竹红菌乙素脂质体对鸡肉垂皮肤光动力效应的初步研究

目的:观察竹红菌乙素(HB)脂质体对鸡肉垂皮肤的光动力效应.方法:莱亨鸡14只,分为对照组、单纯照光组、单纯给药组和光动力学治疗(photodynamic therapy,PDT)组.PDT组分为0.25和0.5mg·kg-1组,每个肉垂划出两个直径1cm的圆形区域,分别照射10和20 min,功率密度为100 mW·cm-2,印照光剂量为60和120 J·cm-2.莱亨鸡静脉注入光敏剂后,立即用532 nm激光照射,之后每天进行大体观察,并于d 3和d 14取材,HE染色,光镜下观察.结果:HB脂质体剂量为0.25和0.5 mg·kg-1时,均可引起鸡肉垂表皮层破溃结痂,约14 d痂退后明显褪色,病理表现为真皮浅层毛细血管的闭锁,表皮细胞增生,两组无明显差别;激光能量密度为60 J·cm-2组表皮损伤的程度要明显弱于120 J·cm-2,但均产生明显的褪色效果.结论:HB脂质体对鸡肉垂真皮浅层毛细血管网具有较好的破坏作用,但对正常表皮也产生可逆性损伤.     

两种新型竹红菌乙素衍生物在人胃腺癌BGC-823细胞中吸收规律的研究

目的探讨两种新型光敏剂5-氨基-1-戊磺酸竹红菌乙素衍生物（PENSHB）和15位脱乙酰基13位3-氨基-1-丙磺酸竹红菌乙素衍生物（DPROHB）在人胃腺癌BGC-823细胞中的吸收规律。方法以浓度为4μM的PENSHB、DPROHB对人胃腺癌BGC-823细胞分别孵育0、0.5、1、2、4和8 h,用荧光分析法测定细胞内光敏剂含量,通过浓度-荧光强度标准曲线换算成光敏剂浓度,绘制每种光敏剂的孵育时间-细胞含量的关系曲线。以浓度为0.5、1、2、4和8μM的两种光敏剂分别孵育BGC-823细胞4 h后,测定细胞内荧光强度,绘制光敏剂的孵育浓度-细胞含量关系曲线。结果 BGC-823细胞对PENSHB和DPROHB的吸收含量随孵育时间的延长而增加,两者变化趋势相近,孵育1 h内细胞吸两种新型光敏剂收含量增加较快,4 h达到平台。在本实验的浓度范围内PENSHB和DPROHB的细胞吸收量随孵育浓度的增高而增加,基本呈线性关系,上升趋势相似。两者在细胞内的吸收含量依赖孵育时间及孵育浓度。结论两种新型竹红菌乙素衍生物PENSHB和DPROHB在提高水溶性及光动力效应的同时,细胞吸收特性良好,是有潜在应用前景的新型光敏剂。     

竹红菌素光敏剂血管外扩散和光漂白动力学研究

光动力疗法目前是鲜红斑痣和黄斑变性等常见微血管疾病的临床首选疗法。显然,将光动力作用限制于病灶微血管的精确光动力疗法是微血管类疾病治疗的理想目标。光敏剂通过静脉注射进人血管后,可以随血流传输和在血管内皮细胞吸附,同时也会向血管外扩散;     

新型光敏剂4SB的光谱特性及与血清蛋白相互作用的研究

目的研究新型光敏剂17,4-位氨基磺酸竹红菌乙素衍生物（17-4-amino-1-butane-sulfonic acid-hypocrellin B,4SB）的光谱特性及其与人血清白蛋白（human serum albumin,HSA）的相互作用规律,为4SB临床和基础研究提供实验依据。方法使用分光光度计和荧光光谱仪测量4SB在PBS和HSA溶液中的吸收光谱和荧光光谱,并与临床使用的光敏剂血卟啉衍生物（hematoporphyrin derivative,HpD）作对比,研究HSA对4SB光谱的影响。将4SB溶于HSA溶液后持续震荡,不同的时间点测定4SB吸收光谱和荧光光谱,观察4SB与HSA作用的时间规律。观察HSA对4SB吸收和荧光光谱的影响：将浓度为0、1.25、2.5、5.0、10和20μM/ml的HSA加入5μM/ml的4SB中,测定吸收光谱和荧光光谱。HSA与4SB相互的荧光淬灭：将不同浓度的4SB加入HSA中,测定4SB的荧光光谱;将不同浓度的4SB加入HSA中,测定HSA的荧光光谱。结果 4SB在600 nm以上的波段较HpD的吸收有很大提高,在人血清溶液体系中此峰红移且增强了2.3倍。4SB与HSA的结合时间是30 min。HSA与4SB是1对1的特异性结合,且位点在色氨酸残基附近。结论 4SB在红光波段吸收好,与白蛋白结合后增强了对光的吸收,与白蛋白1∶1结合,是一种有开发前景的光敏剂。     

竹红菌乙素脂质体对鸡冠皮肤光动力效应的初步研究

目的　观察竹红菌乙素脂质体 (HB liposome)光动力学疗法对鸡冠皮肤的光敏损伤特点。方法　成年来亨鸡 4 5只 ,随机分为对照组 9只 ,PDT组 36只。PDT组动物静脉分别注射HB liposome 0 2 5、0 5、0 75mg/kg ,给药后即刻用铜蒸气激光照射 ,功率密度分别为 5 0、1 0 0mW/cm2 ,能量密度分别为 30、6 0、1 2 0J/cm2 ,于照射后第 1、3、7、1 4、2 8天进行肉眼和光镜观察。结果　光敏剂剂量为 0 2 5、0 5mg/kg时 ,以功率密度为 1 0 0mW /cm2 的铜蒸气激光混合光照射 2 0min ,肉眼和光镜观察显示来亨鸡鸡冠的真皮乳头层毛细血管网破坏明显 ,表皮层无明显损伤 ,褪色效果明显。结论　HB liposome光动力学疗法对鲜红斑痣模型—来亨鸡鸡冠有着良好的褪色效果。     

针对微血管类疾病病灶和给药特点设计竹红菌素衍生物

竹红菌素是我国具有资源和基础研究领先优势的天然光敏剂,具有光敏化活性高、暗毒性低等理想光敏剂的主要特征,但其吸收波长短和水溶性差是临床实用化的主要障碍。针对这些问题,近年研究的主要进展有:(1)发现在2,5,8,13,14,17等众多取代位中,17位西佛碱衍生物具有最高的光敏化活性;(2)实现竹红菌素衍生物脂水双亲性的定     

不同参数竹红菌乙素-光动力治疗对兔脉络膜毛细血管层的生物学效应

背景：世界各国都在进行光敏剂开发，治疗脉络膜新生血管(CNV)疾病的工作，本实验是国内少数几家利用国产光敏剂治疗CNV之一。目的：观察不同治疗参数竹红菌乙素一光动力治疗(HB-PDT)对青紫蓝兔脉络膜毛细血管层生物学效应以及对视网膜的非选择性损伤，选择适宜PDT治疗方案，为进一步探讨HB-PDT治疗CNV提供先期研究工作。设计：随机对照的实验研究。地点和材料：实验在北京解放军总医院和北京理工大学完成，以青紫兰兔为实验材料。干预：使用光纤连接532nm激光器和裂隙灯显微镜，作为照射系统。青紫兰兔耳缘静脉内注射竹红菌乙素，532nm光线激发光敏剂。使用不同PDT方案进行实验，每组实验眼3例，同时以单纯照光组和单照药物组作为对照。主要观察指标：PDT后第1天行视网膜观察、荧光眼底造影和组织学检查，观察照光部位及其表面正常组织的变化。结果：在PDT后第1天，单纯照光组和单纯药物对照组眼底和组织学无改变；在HB剂量为1．0mg／kg，532nm连续激光激发光敏剂，功率密度120～700mW／cm^2，能量密度14．4～60J／cm^2，可以导致脉络膜毛细血管层的闭塞，对视网膜外层有损害，内层无明显改变。HB剂量1．0mg／kg，功率密度300～600mW／cm^2，照光时间100～80s，能量密度30～50J／cm^2是适宜的治疗方案。结论：HB对视网膜和脉络膜的生物学效应与光敏剂的剂量、照光时机、功率密度、能量密度密切相关。生物学效应与能量密度呈量效依赖性关系。     

不同参数竹红菌乙素-光动力治疗对兔脉络膜毛细血管层的生物学效应

背景世界各国都在进行光敏剂开发,治疗脉络膜新生血管(CNV)疾病的工作,本实验是国内少数几家利用国产光敏剂治疗CNV之一.目的观察不同治疗参数竹红菌乙素-光动力治疗(HB-PDT)对青紫蓝兔脉络膜毛细血管层生物学效应以及对视网膜的非选择性损伤,选择适宜PDT治疗方案,为进一步探讨HB-PDT治疗CNV提供先期研究工作.设计随机对照的实验研究.地点和材料实验在北京解放军总医院和北京理工大学完成,以青紫兰兔为实验材料.干预使用光纤连接532nm激光器和裂隙灯显微镜,作为照射系统.青紫兰兔耳缘静脉内注射竹红菌乙素,532 nm光线激发光敏剂.使用不同PDT方案进行实验,每组实验眼3例,同时以单纯照光组和单照药物组作为对照.主要观察指标PDT后第1天行视网膜观察、荧光眼底造影和组织学检查,观察照光部位及其表面正常组织的变化.结果在PDT后第1天,单纯照光组和单纯药物对照组眼底和组织学无改变;在HB剂量为1.0mg/kg,532 nm连续激光激发光敏剂,功率密度120～700 mW/cm2,能量密度14.4～60 J/cm2,可以导致脉络膜毛细血管层的闭塞,对视网膜外层有损害,内层无明显改变.HB剂量1.0 mg/kg,功率密度300～600 mW/cm2,照光时间100～80 s,能量密度30～50 J/cm2是适宜的治疗方案.结论HB对视网膜和脉络膜的生物学效应与光敏剂的剂量、照光时机、功率密度、能量密度密切相关.生物学效应与能量密度呈量效依赖性关系.