芥子气体内生物标志物的监测及其代谢与分布研究进展

芥子气（HD）是一种糜烂性化学战剂,能造成皮肤、眼睛及呼吸系统的损伤。HD的中毒机制虽早有研究,但迄今尚未完全阐明;目前认为,HD有两个亲电碳原子,是典型的双功能烃化剂,它的化学性质和代谢机制主要取决于它们的亲电反应,生理条件下,可与体内多种亲核性基团如氨基、巯基、羟基、羧基、磷酸基及咪唑基等反应,产生广泛复杂的生物学作用。从化学反应的结果来看,HD进入体内后通过烃化、水解、氧化、裂解等代谢步骤,形成硫二甘醇(TDG)、谷胱甘肽结合物、蛋白加合物、DNA加合物等多种生物标志物,而检测和研究这些标志物对于我们了解HD的损伤机制及HD的分布代谢过程是很有帮助的。TDG及硫二甘醇亚砜（TDGO）是HD的主要水解、氧化产物,也是HD在体内的重要代谢产物,研究快速、灵敏、简便的TDG分析检测方法成为HD医学防护研究的重要内容之一。谷胱甘肽分子中的巯基具有较强的活性,能迅速与进入体内的HD等有毒物质络合,起到解毒的作用,研究发现,HD可与两分子谷胱甘肽结合生成SBSANE,而SBSANE经β裂解酶作用,同时硫原子上发生氧化反应,生成SBMTE, SBMSE, MSMTESE等无毒的代谢物,这些化合物在正常人体中不存在,因此它们是HD中毒后特异性的生物标志物,文章就这些化合物的检测方法及临床应用做了介绍。HD与蛋白质及DNA反应形成共价加合物,相比于游离代谢产物,它们可在体内存在较长时间。HD与蛋白的加合物种类较多,而报道较多的是血红蛋白和白蛋白加合物,血红蛋白中的谷氨酸、缬氨酸,半胱氨酸、天门冬氨酸、赖氨酸、色氨酸、组氨酸残基均可被HD烷基化,其中血红蛋白N端缬氨酸加合物（HETE Val）可实现灵敏的检测,而且它也是HD染毒的长效生物标志物;白蛋白34位半胱氨酸作为亲核位点可与各种亲电试剂反应,链霉蛋白酶酶解烷基化的白蛋白成三肽（HETE-S-Cys-Pro-Phe）,检测限可低至体外染毒1 nmol·L^-1;另外,研究发现人表皮角蛋白也是HD结合显著的重要靶点。HD与DNA的主要反应位点是脱氧鸟苷的N⁷位,产物有N⁷-HETEG和HD双(鸟嘌呤-7)加合物,还可与其它位点反应产生N³-HETEA, O⁶-HETEG和O⁶-(2-HETE)-2′-脱氧鸟苷等加合物, 而N⁷-HETEG占DNA烃化总产物的60%~70%,是HD中毒的重要生物标志物,HD发挥细胞毒性被认为是从DNA的烃化作用开始的,因此分析HD-DNA加合物在研究HD中毒机制方面也具有重要意义。放射标记HD染毒发现,HD进入动物体内后,毒剂迅速分布到组织各部,血液中HD原型浓度在染毒后半小时内迅速减少;而占毒剂染毒量的50%~80%在3 d内随尿液排出体外;大鼠皮肤染毒后,约25%存留于皮肤,至少70%进入血液循环并迅速分散到组织各部,其中5%~8%与血液反应;家兔HD皮肤染毒模型中,与珠蛋白N端缬氨酸反应的HD只占HD染毒总量的0.15‰左右,进入家兔血液系统且与血液反应的HD仅占家兔染毒总量的1%左右,动物种属间对HD的耐受也存在较大的差异。文章最后就国际反恐形势及处理和销毁化学武器的需要,对HD的研究方向做了展望。     

军事医学科学院毒物分析实验室获准国际禁止化学武器组织生物医学样品分析指定实验室经验体会

国际禁止化学武器组织（OPCW）自2009年起先后组织了5次生物医学样品分析信心建立测试,并于2016年2月启动第1次正式生物医学效能水平测试。军事医学科学院毒物分析实验室（AMMSLTA）全程参与并以优异成绩通过,最终成功获准首批OPCW生物医学样品分析指定实验室。本文介绍了指定实验室建立的背景、申报条件,以及毒物分析实验室申报过程和经验体会。     

固相萃取-气相色谱-串联质谱法检测粮食作物中的T-2与HT-2毒素

目的建立粮食作物中T-2与HT-2毒素的高灵敏度气相色谱-串联质谱(GC-MS/MS)检测方法。方法染毒的粮食样品以柱淋洗方式用甲醇提取后,采用C18固相萃取柱净化富集,再经七氟丁酰咪唑衍生化后,在气相色谱-串联质谱仪上采用选择反应监测(SRM)模式进行检测。结果在染毒大米、小米、糯米和玉米样品中,T-2与HT-2毒素在0.5～100μg/kg范围内均呈现良好的线性关系。在最优分析条件下,两种毒素的最低检出限均在0.05～0.5μg/kg。在2、30、60μg/kg 3个加标浓度下,T-2与HT-2毒素的方法回收率均在47.2%～110.8%。结论该方法操作简便,灵敏度高,适用于各类粮食样品中T-2与HT-2毒素的检测。     

手性选择剂及其在手性药物分离分析中的应用进展

色谱分离法是一种常用的手性拆分方法,它分为直接法和间接法。近年来,采用手性选择剂进行手性拆分的直接法发展迅速,应用广泛。本文则对几类常用的手性选择剂进行了综述,如环糊精、手性冠醚、大环糖肽类抗生素、线性多糖、蛋白质、手性表面活性剂及配体交换复合物等,阐述了其在药物手性分离分析领域中的应用和进展,并探讨了其手性识别机制。     

手性药物对映体的环糊精手性流动相、手性固定相HPLC法拆分

使用β-环糊精(CD)作为手性流动相添加剂或手性固定相,采用反相高效液相色谱法首次拆分了抗胆碱能药物盐酸戊乙奎醚、盐酸苯环壬酯和盐酸卡马特灵。结果表明,3个手性药物4对对映体完全达到基线分离。求得其包络常数、包络比和分离度,并结合其他结构类似的化合物,从结构—分离因子关系的角度研究了其拆分机理。详细研究了影响容量因子和分离度的各种因素。     

用手性固定相HPLC法测定对映体药物

人们已经合成了5ＨＴ受体的激动剂8羟基(双正丙氨基)1,2,3,4四氢化萘(8ＯＨＤＰＡＴ)的类似物,并进行药理活性筛选,以寻找新的、具有口服活性的ＣＮＳ药物。通常这些化合物大多数是以外消旋体进行合成和代谢稳定性筛选的,但有关这些对映体化合物的可能的立体选择性代谢研究却尚未进行。作者研究了两种蛋白亲合相手性ＨＰＬＣ法分析8ＯＨＤＰＡＴ及其3个8酮基吡咯取代类似物(Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ)。生物样品经键合相ＩｓｏｌｕｔｅＣ2柱进行固相萃取,外标法定量,315ｎｍＵＶ检测,可以定量500μＬ的大鼠肝细胞悬液中0.02μｇ·ｍＬ-1的8酮基吡咯取代类似…     

SELEX与适配体在蛋白质研究中的应用

指数富集的配基系统进化(SELEX)是一种从大容量寡核苷酸文库中经反复分离扩增步骤得到针对靶分子的高亲和力高特异性核酸配基—适配体的体外筛选技术。SELEX技术自1990年发展至今,已涌现出多种筛选模式和分离方法。筛选特异结合蛋白质的SELEX技术发展直接影响和指导了适配体在蛋白质功能调控方面的应用。文章综述了多种SELEX技术在筛选蛋白质方面的发展近况,适配体在蛋白质功能研究中的应用,筛选过程中关键性因素的确定及适配体的前后期修饰。     

河豚毒素分析检测方法研究进展

河豚毒素是非蛋白类海洋神经毒素，其强毒性及在医学、军事学等领域的广泛应用为中外学者所重视。本文对近年来河豚毒素检测方法的进展作一综述。     

HPLC法测定佐米曲普坦的含量及有关物质

目的:建立HPLC法测定佐米曲普坦的含量及纯度.方法:采用Zorbax SB-C18色谱柱,分别以甲醇:0.025mol/L磷酸二氢钾(16:84)和甲醇:0.025 mol/L磷酸二氢钾:三乙胺(25:75:0.5,pH=3.5)为流动相,流速为1mL/min,在检测波长为220nm处检测.结果:本品在0.01mg/mL～0.15mg/mL浓度范围内呈直线关系,本品中杂质的最小检测限为0.01%.对4批样品进行检测均未检出杂质,而粗品检出明显杂质.结论:本方法可用于含量测定和有关物质的检查.