耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌对多黏菌素B体外敏感性检测方法的差异性研究

摘要：目的 了解不同检测方法在耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌(carbapenem-resistant Klebsiella pneumoniae, CRKP)对多黏菌素 B体外药敏检测中的差异,为临床治疗和实验室检测提供依据。方法 选择2018-2020年宁波地区临床分离的CRKP 147株,分 别采用肉汤稀释法、E-test纸片法、仪器法(N335药敏卡)和纸片法检测其体外对多黏菌素B的敏感性,分析4种药敏检测方法所 存在的差异。结果 微量肉汤稀释法、E-test法和仪器检测CRCP对多黏菌素B MIC50分别为1、1和0.5μg/mL,MIC90分别为1、 1和0.5,累积敏感率分别为97.3%、99.3%和98%,具有较高一致性和敏感性;仪器法检测CRKP对多黏菌素B的平均MIC值为 (0.82±0.16)μg/mL,明显低于标准方法的(1.39±0.27)μg/mL,差异有统计学意义(P＜0.01);E-test法和仪器法的基本一致率(EA) 为92.5%和94.6%,标准符合(CA)分别为97.3%和98.6%,严重错误(VME)分别为2.7%和1.4%;重大错误(ME)和小错误(mE)均为 0;纸片法KB值与肉汤稀释法MIC值之间方差分析P＞0.05,故提示KB值与MIC值不具有线性关系。结论 4种方法检测CRKP 对多黏菌素B体外具有较高敏感性;仪器法和E-test法对于多黏菌素B的敏感性检测与微量肉汤稀释法高度一致,但其中仪器法 N335药敏卡检测MIC有所降低,建议标准方法复核。     

社区与医院获得性感染金黄色葡萄球菌毒力因子对比分析

目的了解社区与医院获得性感染金黄色葡萄球菌的毒力因子PVL和TSST-1的携带情况。方法收集社区和医院获得性感染金黄色葡萄球菌菌株184株和262株,PCR检测毒力因子基因pvl和tst,统计分析检出率的差异。结果pvl在社区感染菌株中的检出率(11.96%)高于医院感染(0.76%),在MSSA中的检出率(7.50%)高于MRSA(2.91%);与pvl相反,tst在社区感染菌株的检出率(6.52%)低于医院感染(17.56%),在MSSA中的检出率(5.83%)低于MRSA(21.36%)。对不同感染部位菌株pvl和tst检出率进行两两比较后发现,社区皮肤/软组织感染菌株pvl的检出率最高,而医院感染菌血症菌株中tst的检出率最高。结论 PVL和TSST-1作为金黄色葡萄球菌的2种重要毒素,与感染部位、社区/医院获得性、细菌耐药性、疾病的严重性及转归都可能存在密切关系。     

宁波地区耐碳青霉烯类高毒力肺炎克雷伯菌的分子生物学特征研究

目的 研究宁波地区耐碳青霉烯类高毒力肺炎克雷伯菌(carbapenem-resistant hypervirulent Klebsiella pneumoniae, CR-hvKP)分子流行特征,为宁波地区CR-hvKP院内防控及临床治疗提供理论依据。方法 从宁波地区3家医院收集150株耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌,用PCR筛选出CR-hvKP;再用PCR检测其耐药基因和毒力基因。结果 150株耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌中检出14株CR-hvKP,占比为9.33%;主要标本类型为血流感染6株和痰液5株;临床科室分布以ICU(5株)为主,其次为呼吸科(3株)和血液科(3株)。14株CR-hvKP拉丝试验阳性,荚膜血清型以K2为主,整合子均为intI1型;碳青霉烯类耐药基因以KPC-2为主,且发现3株同时携带KPC-2和NDM-1耐药基因;14株CR-hvKP均携带rmpA、kpn、entB、wabG、ureA、fimH毒力基因,其中2株aerobactin基因阳性。结论 宁波地区出现的CR-hvKP以K2荚膜型为主,耐药情况严重,且同时携带耐药及毒力基因,提示临床须合理使用抗生素,加强耐药监测及院感防控,以减少CR-hvKP的传播。     

携带不同酶型基因耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌对常见抗耐药菌药物的敏感性观察

目的 了解宁波地区耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌（CRKP）菌株携带碳青霉烯酶型基因分布,以及携带不同碳青霉烯酶型基因的CRKP对常见抗耐药菌药物的敏感性。方法 选择2019年1月—2021年12月宁波地区多家中心市医院临床非重复分离的CRKP共150株,采用PCR法检测碳青霉烯酶基因携带情况;采用肉汤稀释法检测常用抗CRKP药物替加环素、多黏菌素B、头孢他啶/阿维巴坦对分离CRKP的敏感性;采用K-B法检测CRKP对8种报道中使用的联合药物的敏感性。结果 宁波地区CRKP菌株主要携带KPC-2型耐药基因,其次是NDM-1型耐药基因,对替加环素、多黏菌素B敏感率均较高;头孢他啶/阿维巴坦对携带A类酶基因的CRKP的作用力较强,对携带B类、D类酶基因的CRKP作用弱;磷霉素、阿米卡星和氯霉素的抑菌圈直径较大,可以作为治疗CRKP感染的联合药物,氨曲南和阿米卡星可用于治疗携带B类酶基因的CRKP感染。结论 部分抗菌药物对携带不同酶型基因菌株敏感性不同。     

酶免疫层析技术和酶抑制剂增强试验在碳青霉烯酶型检测方面的应用及研究

目的 了解酶免疫层析技术(金标法)和碳青霉烯酶抑制剂增强试验在检测CRKP碳青霉烯酶型方面的性能和差异，为实验室检测和临床诊治提供依据。方法 选择宁波地区多中心医院临床非重复分离的CRKP共150株，分别用金标法、酶抑制剂增强试验和PCR法检测CRKP碳青霉烯酶型，并以PCR法作为参考方法，对2种检测方法的酶型检测性能进行分析和评估。结果 在150株实验菌株中发现，共有142株CRKP携带碳青霉烯酶耐药基因，其中携带KPC-2型的菌株，共有92株，占比为61.3%;携带NDM-1型的菌株有22株，占比为14.7%;携带IPM-1型的菌株有12株，占比为8.0%;未检出VIM-1、VIM-2和IMP-2型基因。以PCR方法作为参考方法，通过酶抑制剂增强试验检测出产A类酶、B类酶和D类酶的菌株灵敏度分别为93.5%、88.2%和100.0%。通过金标法检测对于各基因型灵敏度、特异度、准确度、阳性预测值、阴性预测值均>90%。结论 酶抑制剂增强试验和金标法在检测CRKP碳青霉烯酶型上具有较好的敏感性和特异性，并且操作简单方便，适宜在临床实验室开展。