耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌第1类整合子可变区启动子检测及同源性分析北大核心CSCD

目的了解医院耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌(CR-PA)中第1类整合子可变区启动子的种类和排列方式,分析其与介导的耐药基因表达之间的关系;并明确整合子阳性菌株的同源性情况。方法运用聚合酶链反应(PCR)、琼脂糖凝胶电泳以及测序的方法,以2012-2014年医院临床分离42株第1类整合子阳性CR-PA为对象,检测其可变区启动子和同源性。结果 42株实验菌株中强启动子PcS为2株、弱启动子PcW为2株,剩余38例皆为杂合1型启动子PcH1;位于Pc下游的P2启动子42例皆为-35到-10区间隔有14个碱基序列的无活性型的启动子;42株CR-PA经肠杆菌基因间重复共有序列PCR(ERIC-PCR)基因分型,主要分为A、B、C、D、E 5型,其中A1型32株,A2型6株,B、C、D和E型各为1株,A型菌株主要是来源于ICU及神经外科。结论本地区临床分离CR-PA中第1类整合子可变区的启动子主要以杂合1型启动子PcH1为主,P2启动子全为无活性型;整合子阳性菌株的基因分型间呈现高度的同源性,可能存在着医院的克隆传播。     

创伤弧菌溶细胞素融合蛋白对小鼠单核巨噬细胞产NO及其合酶的影响

目的 研究创伤弧菌溶细胞素融合蛋白(rVvhA)对小鼠单核-巨噬细胞(J774A.1)产生一氧化氮(NO)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达的影响.方法 应用MTT法检测rVvhA对J774A.1增殖的抑制作用;Griess法检测NO含量;RT-PCR和免疫荧光法检测iNOS mRNA和蛋白表达水平.结果 0.8 HU/ml及以上浓度rVvhA可显著抑制J774A.1的增殖;在IFN-γ的辅助作用下,0.4 HU/ml的rVvhA即可诱导J774A.1产生大量NO,显著增加细胞内活性以及iNOS mRNA和蛋白表达水平.结论 rVvhA可诱导巨噬细胞产生NO和iNOS表达,在创伤弧菌的致病机制中具有重要意义.     

宁波地区颅内感染脑脊液病原菌分布及耐药情况

【目的】研究颅内感染脑脊液标本病原菌分布及耐药情况?为临床用药提供参考依据?【方法】收集我院2012年1月至2016年12月脑脊液培养阳性菌株280株?用WHONET56软件统计并分析耐药情况?【结果】革兰阳性菌154株?占55%?革兰阴性菌119株?占425%?真菌7株?占25%?其中?革兰阳性菌以凝固酶阴性葡萄球菌(393%)、肠球菌(43%)和金黄色葡萄球菌(29%)为主?未发现对万古霉素、利奈唑胺和替加环素耐药菌株?革兰阴性菌以鲍曼不动杆菌(254%)、大肠埃希菌(36%)、铜绿假单胞菌(32%)和洋葱伯克霍尔德菌(32%)为主?仅对头孢哌酮/舒巴坦、阿米卡星和替加环素较为敏感?真菌以新型隐球菌(21%)为主?对常见抗真菌药物均敏感?【结论】宁波地区颅内感染的脑脊液病原菌前7位是凝固酶阴性葡萄球菌、鲍曼不动杆菌、肠球菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、洋葱伯克霍尔德菌和金黄色葡萄球菌?耐药状况严重?提示临床应根据药敏结果合理选择抗生素?     

宁波地区耐碳青霉烯类高毒力肺炎克雷伯菌的分子生物学特征研究

目的 研究宁波地区耐碳青霉烯类高毒力肺炎克雷伯菌(carbapenem-resistant hypervirulent Klebsiella pneumoniae, CR-hvKP)分子流行特征,为宁波地区CR-hvKP院内防控及临床治疗提供理论依据。方法 从宁波地区3家医院收集150株耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌,用PCR筛选出CR-hvKP;再用PCR检测其耐药基因和毒力基因。结果 150株耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌中检出14株CR-hvKP,占比为9.33%;主要标本类型为血流感染6株和痰液5株;临床科室分布以ICU(5株)为主,其次为呼吸科(3株)和血液科(3株)。14株CR-hvKP拉丝试验阳性,荚膜血清型以K2为主,整合子均为intI1型;碳青霉烯类耐药基因以KPC-2为主,且发现3株同时携带KPC-2和NDM-1耐药基因;14株CR-hvKP均携带rmpA、kpn、entB、wabG、ureA、fimH毒力基因,其中2株aerobactin基因阳性。结论 宁波地区出现的CR-hvKP以K2荚膜型为主,耐药情况严重,且同时携带耐药及毒力基因,提示临床须合理使用抗生素,加强耐药监测及院感防控,以减少CR-hvKP的传播。     

高黏液表型肺炎克雷伯菌的临床分布特征及毒力分析

目的分析医院临床分离的肺炎克雷伯菌的临床分布特征及毒力基因,为临床治疗及医院感染防控提供参考依据。方法收集2022年1至12月宁波市医疗中心李惠利医院临床分离的96株对常规抗菌药物全敏感肺炎克雷伯菌,分析菌株的临床特征并检测其毒力基因。结果96株全敏感肺炎克雷伯菌中,K1、K2、K57为主要荚膜血清型,ST23为主要流行的多位点序列分型表型,其次为ST25、ST86型;高黏液表型肺炎克雷伯菌的铁载体基因ybtS、菌毛定值与黏附基因ycfM以及pLVPK-like毒力质粒pagO基因的携带率均为100.00%,常见的毒力基因如荚膜多糖生成调节基因（rmpA）,铁载体基因（irp-1、fyuA、irp-2、aerobactin、repA）,菌毛定值与黏附基因（mrkD）,脂多糖形成相关基因（wabG）及pLVPK-like毒力质粒相关基因（rmpA2、iroB、icuA、terB、sills）的携带率均高于非高黏液表型肺炎克雷伯菌,差异均有统计学意义（均P＜0.05）;另外,分离出33株pLVPK-like毒力质粒阳性肺炎克雷伯菌。结论宁波市医疗中心李惠利医院高黏液表型全敏感肺炎克雷伯菌的毒力基因携带率较高,毒力质粒传播较为严重,提示宁波地区亟需关注医院感染防控,谨防全敏感肺炎克雷伯菌同时获得毒力质粒和耐药质粒成为“超级细菌”,给临床治疗带来严峻挑战。     

宁波地区颅内感染患者脑脊液病原菌分布及耐药情况

【目的】研究颅内感染脑脊液标本病原菌分布及耐药情况,为临床用药提供参考依据。【方法】收集宁波地区某医院2012年1月至2016年12月脑脊液培养阳性菌株280株,用WHONET 5.6软件统计并分析耐药情况。【结果】革兰氏阳性菌154株,占55.0%;革兰氏阴性菌119株,占42.5%;真菌7株,占2.5%。其中,革兰氏阳性菌以凝固酶阴性葡萄球菌(39.3%)、肠球菌(4.3%)和金黄色葡萄球菌(2.9%)为主,未发现对万古霉素、利奈唑胺和替加环素耐药菌株;革兰氏阴性菌以鲍曼不动杆菌(25.4%)、大肠埃希菌(3.6%)、铜绿假单胞菌(3.2%)和洋葱伯克霍尔德菌(3.2%)为主,仅对头孢哌酮/舒巴坦、阿米卡星和替加环素较为敏感;真菌以新型隐球菌(2.1%)为主,对常见抗真菌药物均敏感。【结论】宁波地区颅内感染患者的脑脊液病原菌前7位是凝固酶阴性葡萄球菌、鲍曼不动杆菌、肠球菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、洋葱伯克霍尔德菌和金黄色葡萄球菌,耐药状况严重,提示临床应根据药敏结果合理选择抗生素。     

奇异变形菌中整合子分布及耐药性分析

目的 了解院内奇异变形菌中各类整合子的携带分布情况、阳性菌株可变区基因盒类型以及其与宿主菌耐药表型的相关性,从而为临床治疗和院内感染控制提供参考。方法 采用PCR扩增和琼脂糖凝胶电泳等方法,将本院2016年1月—2018年12月份从临床标本中分离得到的150株奇异变形菌进行第1、2和3类整合子的筛选,并对整合子阳性菌株可变区进行测序分析以及宿主菌的耐药性进行相关性分析。结果 150株奇异变形菌中携带整合子的菌株共有91株,阳性率为60.7%,其中第1类整合子阳性菌株有30株,占20.0%;第2类整合子阳性菌株22株,占14.7%;同时携带第1和2类菌株39株,占26.0%;未筛出第3类整合子;在91株整合子阳性菌株中,86株可变区出现扩增产物条带,其余5株可变区未见扩增产物;第1类整合子阳性菌株可变区携带的耐药基因盒主要为AadA2、DfrA32,第2类整合子阳性菌株可变区携带耐药基因盒主要为DfrA1;可变区携带AadA2的菌株对庆大霉素和妥布霉素的耐药率显著高于整合子阴性菌株(P<0.01),可变区携带DfrA1或DfrA32的菌株对复方磺胺甲噁唑(即甲氧苄啶/磺胺甲噁唑)的耐药率也明显高于整合子阴性菌株(P<0.01);91株整合子阳性菌株对氨苄西林/舒巴坦、复方磺胺甲噁唑、环丙沙星、庆大霉素、头孢曲松、妥布霉素和左氧氟沙星的耐药率均显著高于整合子阴性菌株(P<0.01)。结论 临床分离的奇异变形菌携带整合子的比例较高,其可变区所携带的耐药基因主要为编码氨基糖苷类和甲氧苄氨嘧啶类抗菌药物的基因,整合子的携带与宿主菌产生的耐药性呈高度相关。     

胆汁来源ESBLs-KP分离株整合子携带与毒力基因和耐药机制关系

目的 研究医院胆汁来源产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌(ESBLs-KP)整合子携带情况与其毒力基因和耐药机制的相关性，为医院院感防控及临床治疗提供参考依据。方法 收集2019年1月-2022年6月宁波市医疗中心李惠利医院肝胆外科胆汁培养阳性肺炎克雷伯菌，筛选出ESBLs-KP;聚合酶链式反应(PCR)检测其整合子、毒力基因和耐药基因。结果 254例中ESBLs-KP 78株，占比30.71%;仅携带整合子IntI1;以K57荚膜基因为主；整合子阳性组与整合子阴性组，除脂多糖相关基因wabG和耐药基因bla_CTX-M-3、bla_CTX-M-9、bla_CTX-M-14存在统计学差异外，其余均无差异；抗菌药物除厄他培南和阿米卡星外，前者耐药率均高于后者；且发现3株整合子阳性高毒力侵袭性ESBLs-hvKP以及20株pLVPK-like毒力质粒阳性肺炎克雷伯菌。结论 医院胆汁来源ESBLs-KP主要携带整合子IntI1;且整合子阳性抗菌药物耐药率均高于整合子阴性；医院整合子、毒力质粒、耐药基因三者的共同传播较为严重，提示医院亟...