AMPK-mTOK信号通路参与百草枯致PC12细胞的自噬抑制作用

目的探讨AMPK-mTOR信号转导通路在百草枯(paraquat,PQ)诱导大鼠肾上腺髓质嗜铬细胞瘤细胞(PC12)自噬异常中的调控作用。方法用终浓度0、25、50、100、200、300、400 μmol/L PQ处理PC12细胞24 h,300 μmol/L PQ处理细胞不同时间(6、12、24、48 h),四甲基偶氮唑蓝(MTT)检测细胞相对存活率,确定剂量/时间-效应关系;终浓度0、100、200、300 μmol/L PQ处理细胞24 h,分光光度法检测培养上清中乳酸脱氢酶(LDH)活力;二氯荧光素双醋酸盐(DCFH-DA)法检测细胞内活性氧(ROS)水平;单丹磺酰尸胺(MDC)染色法观察自噬溶酶体的表达及分布变化;免疫荧光(IF)检测微管相关蛋白1轻链3(LC3)表达水平;免疫印迹法(Western blot)检测自噬相关蛋白LC3Ⅱ、p62、Beclin1及AMPK-mTOR信号通路蛋白p-AMPK、p-mTOR表达水平。结果与对照组比较,100、200、300、400 μmol/L PQ染毒组的细胞存活率明显降低,且呈剂量依赖关系,差异有统计学意义(P<0.05)。300 μmol/L PQ处理细胞不同时间(6、12、24、48 h),细胞存活率随染毒时间的延长而下降,其中12、24、48 h染毒组的差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组比较,100、200、300 μmol/L PQ染毒组细胞上清液中LDH活力明显升高,细胞内ROS荧光强度明显增高,差异有统计学意义(P<0.05);MDC染色结果显示,PQ染毒组的自噬溶酶体在核周分布密度降低、荧光强度减弱、自噬水平降低;免疫荧光结果显示,PQ染毒组的LC3荧光强度减弱,细胞自噬水平下降,与MDC染色结果一致。Western blot结果显示,与对照组比较,PQ染毒组的自噬相关蛋白LC3Ⅱ、Beclin1表达水平均明显降低,而p62蛋白表达水平升高,差异有统计学意义(P<0.05)。200、300 μmol/L PQ染毒组的p-AMPK蛋白表达水平降低,p-mTOR蛋白表达水平升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论PQ致PC12细胞损伤过程中,细胞自噬水平降低,AMPK-mTOR信号通路发挥调节作用。     

安五脂素对α-黑色素细胞刺激素诱导的小鼠黑色素瘤B16F10细胞中黑色素生成的影响及机制

目的研究安五脂素对小鼠黑色素瘤B16F10细胞黑色素生成的影响及机制。方法体外培养B16F10细胞,用MTT法检测B16F10细胞存活率。随后实验分为细胞对照组、α-黑色素细胞刺激素(α-MSH)诱导模型组和模型+安五脂素5,10和20μmol·L^-1组,培养48 h。NaOH裂解法和多巴氧化速率法检测细胞内黑色素含量和酪氨酸酶活性,WST-1法检测细胞内超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)水平,化学荧光法检测活性氧(ROS)水平,实时-定量PCR检测血红素加氧酶1(HO-1)mRNA表达水平,Western印迹法检测核因子E2相关因子2(Nrf-2)和HO-1蛋白表达水平。结果安五脂素5,10和20μmol·L^-1对B16F10细胞存活无影响。与细胞对照组相比,模型组黑色素含量和酪氨酸酶活性显著升高(P<0.01);SOD活性降低(P<0.01),MDA和ROS水平升高(P<0.01);Nrf-2蛋白及下游HO-1 mRNA和蛋白表达显著降低(P<0.01)。与模型组相比,模型+安五脂素10和20μmol·...     

黄芪多糖及其与白芍总苷协同对兔血小板聚集功能的影响

目的:研究黄芪多糖(Astragaluspolysaccha-ride,APS)对血小板聚集功能的作用,并探索其与白芍总苷(totalglucosidesofpaeony,TGP)最佳剂量配比。方法:比浊法测量家兔血小板聚集功能;用均匀设计两因素五水平的实验安排方法观察黄芪多糖和白芍总苷的最佳配伍剂量。结果:黄芪多糖对二磷酸腺苷(ADP)引起的血小板聚集有抑制作用(P<0.01),其与白芍总苷的最佳配伍剂量为121。结论:黄芪多糖和白芍总苷对血小板聚集有协同抑制作用,为中药复方的临床应用提供药理学基础。     

关键部位梗死致痴呆1例

1病历介绍 患者,男,59岁,主因睡眠增多、醒后胡言乱语2 d入院。患者于2011年8月22日下午无明显诱因出现睡眠较前增多,午睡醒后胡言乱语,伴有低热,最高达37.6℃,无头痛、头晕症状,无明显肢体力弱表现,无饮水呛咳、吞咽困难等症。于2011年8月24日就诊于我院急诊科,行脑CT检查示：颅脑垂体瘤术后改变,右侧额叶、左侧基底节区软化灶。     

鼻腔填塞法和缝合法用于鼻中隔矫正术后的效果观察

目的评价鼻腔填塞法和缝合法用于鼻中隔偏曲矫正术后的疗效。方法选取接受鼻中隔偏曲矫正术和双下鼻甲骨折外移术患者60例,随机分成2组。填塞组术后以高分子止血海绵填塞鼻腔;缝合组术后以可吸收缝线缝合鼻中隔黏膜。对比观察舒适度评分、术后鼻腔黏膜水肿程度和鼻中隔血肿、脓肿、粘连、术后治愈率等临床指标。结果缝合组术后12 h、24 h疼痛VAS评分、鼻塞VAS评分和病情严重程度均显著优于填塞组(P均0.05);缝合组术后3 d鼻腔黏膜评分明显优于填塞组(P0.05);缝合组术后1周治愈率显著高于填塞组(P0.05);2组术后7 d并发症发生率比较无显著性差异(P0.05)。结论鼻中隔偏曲矫正术后,缝合法较填塞法能减轻患者痛苦,缩短术后黏膜恢复时间,不增加术后并发症的发生几率。     

宁夏石嘴山地区590例志愿者幽门螺杆菌感染、耐药情况调查分析

目的 通过调查宁夏石嘴山地区590例志愿者幽门螺杆菌（HP）感染及耐药情况,分析该地区HP感染及耐药的特点。方法 选取宁夏石嘴山地区的590例志愿者,采用自拟HP调查问卷的形式调查志愿者的临床资料,采用尿素14C呼气试验（14C-UBT）检测HP感染情况,胃镜下留取HP感染者胃黏膜标本行HP体外培养;取培养菌落采用革兰染色、触酶试验、尿素酶试验法确认为HP菌株后分离培养出的HP菌株,采用Kirby Bauer纸片扩散法检测HP菌株对阿莫西林、呋喃唑酮、四环素、甲硝唑、克拉霉素、左氧氟沙星的耐药性。对比分析不同基线资料志愿者HP感染及耐药情况。结果 590例志愿者经14C-UBT检测共发现300例感染HP,HP感染率为50.84%。300例感染HP志愿者经体外培养共分离出HP阳性菌株160株,HP菌株检出率为53.33%。男性、生活地区为农村、家庭月收入<3 000元、受教育程度在初中及以下、吸烟、经常共用餐具及水杯的志愿者HP感染率较高（P均<0.05）。160例HP阳性菌株中,对甲硝唑、左氧氟沙星、克拉霉素、阿莫西林、呋喃唑酮、四环素耐药的菌株数分别为147、70、69、...     

枳术丸加味治疗幽门螺杆菌阳性十二指肠溃疡的疗效观察

幽门螺杆菌(Hp)感染与慢性胃炎、消化道溃疡、胃癌密切相关，我国各地自然人群中的Hp感染率(成人)均在50％以上，目前对Hp致病机制的研究已从细胞水平进展到分子和基因水平，对于Hp感染的诊断和治疗水平也经历了从单一抗生素治疗、两种药物到铋剂三联治疗的发展过程。由于人们越来越认识到化学合成药物不良反应、研究代价以     

关键部位梗死致痴呆1例

<正>1病历介绍患者,男,59岁,主因睡眠增多、醒后胡言乱语2 d入院。患者于2011年8月22日下午无明显诱因出现睡眠较前增多,午睡醒后胡言乱语,伴有低热,最高达37.6℃,无头痛、头晕症状,无明显肢体力弱表现,无饮水呛咳、吞咽困难等症。于2011年8月24日就诊于我院急诊科,行脑CT检查示:颅脑垂体瘤术后改变,右侧额叶、左侧基底节区软化灶。患者于