A抗原表位模拟多肽融合表达载体的构建及鉴定

目的:构建血型A抗原模拟多肽融合表达载体,初步鉴定融合表达蛋白结合抗A抗体的能力.方法:PCR扩增血型A抗原模拟多肽(P17)和谷胱苷肽S-转移酶(GST)编码基因,并连接成P17-GST.双酶切后克隆入原核表达质粒pET 28 b,酶切、测序鉴定.以BL21(DE3)为表达菌,在IPTG诱导下表达P17-GST融合蛋白,Ni-NTA柱纯化蛋白.红细胞凝集抑制实验分析融合蛋白模拟血型A抗原的能力.结果:成功构建P17基因和GST基因融合的原核表达质粒pET28b-P17-GST,目的基因可以高效表达,纯化的融合蛋白以浓度依赖的方式抑制A型红细胞的凝集作用.结论:血型A抗原的模拟多肽序列与GST的融合表达蛋白可特异性结合抗A抗体,具有替代血型A多糖抗原潜能,为发展新型的抗A抗体滤除材料提供了依据.     

白塞综合征合并静脉栓塞10例分析

目的　探讨白塞综合征合并静脉栓塞的临床特点。方法　回顾性分析 10例白塞综合征并静脉栓塞患者的临床资料。结果　白塞综合征患者下肢静脉血栓较上肢多见 ,以中等以上静脉阻塞为主 ,治疗以足量的激素及免疫抑制剂联合应用 ,免疫抑制剂一般首选环磷酰胺 ,本组 10例显效 8例 ,有效 2例。结论　对于静脉血栓患者临床除了考虑其它系统性疾病外 ,应想到白塞综合征。     

Identification and Characterization of Peptide Mimics of Blood Group A Antigen

In order to investigate peptide mimics of carbohydrate blood group A antigen, a phage display 12-mer peptide library was screened with a monoclonal antibody against blood group A antigen, NaM87-1F6. The antibody-binding properties of the selected phage peptides were evaluated by phage ELISA and phage capture assay. The peptides were co-expressed as glutathione S-transferase （GST） fusion proteins. RBC agglutination inhibition assay was performed to assess the natural blood group A antigen-mimicking ability of the fusion proteins. The results showed that seven phage clones selected bound to NaM87-1F6 specifically, among which, 6 clones bore the same peptide sequence, EYWYCGMNRTGC and another harbored a different one QIWYERTLPFTF. The two peptides were successfully expressed at the N terminal of GST protein. Both of the fusion proteins inhibited the RBC agglutination mediated by anti-A serum in a concentration-dependent manner. These results suggested that the fusion proteins based on the selected peptides could mimic the blood group A antigen and might be used as anti-A antibody-adsorbing materials when immunoabsorption was applied in ABO incompatible transplantation.     

p21对肝癌细胞中survivin转录的影响及调控机制的探讨

目的 研究细胞周期依赖性激酶抑制蛋白p21对人肝癌细胞survivin转录抑制的调控作用,并探讨其相应机制.方法 使用多柔比星处理人肝癌细胞株HepG2,采用脂质体法将质粒pEGFP-C2-p21导入HepG2细胞,用G418筛选转染后的HepG2-p21和HepG2-pEGFP细胞;采用实时定量聚合酶链反应(RQ-PCR)检测p21、p53和survivin的mRNA表达;采用流式细胞仪分析转染后细胞周期的变化;采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测转染后E2F-1和p300的mRNA表达.结果 经多柔比星处理后,HepG2细胞中p21和p53 mRNA的表达先增高,然后逐渐降低;survivin mRNA的表达则相反.转染后,HepG2-p21细胞中p21 mRNA的表达明显增高,分别为HepG2和HepG2-pEGFP细胞的2100.1倍和980.9倍;survivin mRNA的表达却明显降低,分别为HepG2和HepG2-pEGFP细胞的0.5%和0.6%;p53 mRNA的表达差异无统计学意义.流式细胞仪检测显示,HepG2-p21细胞的细胞周期明显阻滞在G0/G1期.HepG2-p21细胞中E2F-1和p300 mRNA的表达水平分别为0.75±0.04和0.18 ±0.06,与HepG2和HepG2-pEGFP细胞比较,含量均明显减低(P＜0.05).结论 p21可能通过抑制survivin的转录调控因子E2F-1和p300 mRNA的表达,从而抑制细胞中survivin的表达,并导致细胞出现G0/G1期阻滞.     

脑炎昏迷病人的脑电图及愈后分析

目的了解脑炎病人的昏迷脑电图(EEG)波形与愈后关系。方法回顾分析25例脑炎病人的昏迷脑电图及愈后情况。结果25例中δ波昏迷9例,8例治愈,1例自动出院;θ波昏迷14例12例治愈,2例自动出院;爆——抑制波昏迷1例自动出院,电静息昏迷1例自动出院。结论脑炎引起昏迷脑电图以θ、δ波昏迷为主,其恢复清醒和痊愈的几率很高,临床很有抢救价值。     

血型A抗原的模拟多肽的表达及功能研究

目的融合表达血型A抗原的模拟多肽，初步鉴定融合蛋白结合抗A抗体的能力。方法PCR克隆扩增血型A抗原模拟多肽（P5）和谷胱苷肽S-转移酶（GST）编码基因，并连接成P5-GST。双酶切后克隆入原核表达质粒pET28b，经E．coil DH5a扩增后纯化并酶切、测序鉴定。以BL21（DE3）为表达菌，在IPTG诱导下表达P5-GST融合蛋白．Ni-NTA柱纯化蛋白。红细胞凝集抑制实验分析融合蛋白模拟血型A抗原的能力。ABO-EIJSA初步分析P5．GST融合蛋白检测血型抗体的效能。结果成功构建P5基因和GST基因融合的原核表达质粒pET28b-P5-GST，目的基因可以高效表达，纯化的融合蛋白具有良好的模拟血型A抗原的能力。基于P5-GST融合蛋白的ABO—ELISA具有一定的检测血浆抗A抗体的能力。结论血型A抗原的模拟多肽序列与GST的融合表达蛋白具有特异性结合抗A抗体的特性，本融合蛋白具有替代血型A多糖抗原潜能，为发展新型的抗A抗体检测方法提供依据。     

护理专业学生临床实习教学综合素质培养的探讨

护理专业学生毕业后能否迅速适应临床工作,成为合格的护理人材,临床实习是关键所在。带教老师在传授职业知识和技能的同时,必须重视护生职业价值态度、合作能力、语言能力、防范护患纠纷能力及创新能力的培养,以适应新世纪护理学科发展的新要求。     

实行医护协作制、提高护理质量

目的 改进护士排班方法,提高护理质量.方法 一名医生与两名护士组成医护小组两名护士新老搭配的排班方式.结果 医护患三位一体,提高了护理质量,服务满意度从原来的91-93%上升到98-100%, 结论改进后的护士排班方法,护士乐于接受,病人满意率增加,同时,缓解了临床护士相对不足的问题,保证了整体护理质量.     

太白蓼挥发油的化学成分和抗菌实验初步研究

目的：研究太白蓼挥发油的化学成分及其抗菌活性。方法：采用水蒸气蒸馏的方法提取太白蓼挥发油，运用气相色谱-质谱联用技术（GC—MS）对其化学成分进行鉴定并对该挥发油的抗菌活性（MIC and MBC）进行了测定。结果：通过NIST质谱库检索，鉴定了其中的13个化合物，运用峰面积归一法确定各个组分的含量，药理实验表明太白蓼挥发油对所选取得8种菌株均有很好的活性。结论：太白蓼的挥发油具有抗菌作用。