大鼠肠道自发荧光微生物的分布

目的 探讨不同发育阶段大鼠肠道自发荧光微生物在肠道内的分布。方法 采用Kinetics IVIS小动物活体成像系统的荧光检测技术对不同发育阶段SD大鼠肠道内自发荧光微生物在肠道内的分布位置进行检测和评估。先对体外培养的大肠杆菌标准菌株进行荧光检测,然后在同一检测条件下分别对大肠杆菌的分布位置进行检测。扩大荧光检测激发光波长范围,去除饲料和粪便等外来自发荧光物质的荧光背景,分别检测出生3、14 d和60 d的SD大鼠肠道内自发荧光微生物的分布。结果 大肠杆菌在485～535 nm激发波长范围内能发荧光。大肠杆菌在出生3 d的SD大鼠肠道系统中主要分布于胃,少量分布于回肠;在出生14 d的SD大鼠肠道系统中主要分布于胃和盲肠,少量分布于回肠;在出生60 d的SD大鼠肠道系统中主要分布于回肠内,少量分布于空肠、结肠和盲肠内。扩大荧光检测激发光波长范围后,自发荧光微生物在出生3 d的SD大鼠肠道系统中主要分布于回肠,其次是胃;在出生14 d的SD大鼠肠道系统中主要分布于胃,其次是盲肠,少量分布于回肠和空肠;在出生60 d的SD大鼠肠道系统中均有分布,主要分布于回肠和盲肠。结论 采用小动物活体成像系统荧光检测技术检测自发荧光肠道微生物,对研究肠道微生物在寄主不同发育阶段肠道内的分布有一定的帮助和指导作用,为肠道微生物与寄主和经胃肠道给药关系的研究提供一定的依据。     

海莲叶乙醇提取物的抗氧化作用和对黑素的抑制作用

目的 研究海莲叶乙醇提取物（BLE60）的抗氧化和抑制黑素作用，并对它的皮肤刺激性进行评价。方法 首先通过检测二苯代苦味酰肼(DPPH)自由基和细胞活性氧（ROS）研究BLE60的抗氧化活性，接着在小鼠 B16 黑色素瘤细胞上研究BLE60对酪氨酸酶和黑素的抑制作用，然后以western blotting检测BLE60对酪氨酸酶表达的影响，最后通过家兔皮肤多次给药研究BLE60的皮肤刺激性。结果 BLE60能清除DPPH自由基和UVA诱导的ROS，同时也抑制细胞酪氨酸酶活性和减少黑素产生和酪氨酸酶表达。BLE60多次给药对家兔皮肤无刺激性。结论 BLE60具有抗氧化和抑制黑素活性，且对皮肤无刺激性。BLE60主要通过下调酪氨酸酶表达来降低酪氨酸酶活性，从而抑制黑素产生。     

科罗索酸抗肺癌作用机制的初步研究

目的研究科罗索酸(CRA)对人肺癌细胞A549生长的影响,初步探讨其抗肿瘤作用机制。方法采用MTT法检测不同浓度下CRA对肺癌细胞A549的体外生长的影响,建立生物发光标记的人肺癌细胞A549裸小鼠荷瘤模型,IVIS小动物活体成像系统检测实体瘤的生长情况,免疫组织化学法分析肿瘤组织中血管内皮生长因子(VEGF)和CD34的表达,以CD34阳性血管数作为微血管密度(MVD)。结果 CRA对A549的体外作用IC50值为26.8μg/ml。体内抗肿瘤实验中,不同剂量的CRA对A549实体瘤均有一定的治疗效果,VEGF和CD34蛋白的含量也有不同程度的影响。结论 CRA对人肺癌细胞A549实体瘤具有一定的治疗作用,其作用机制可能与抑制肿瘤组织中VEGF和CD34蛋白的表达有关。     

正常大鼠和2型糖尿病大鼠血糖值检验中快速血糖仪与生化仪的对比研究

目的通过对比快速血糖仪与生化仪检测正常大鼠血糖(Glu)值和Ⅱ型糖尿病模型大鼠的血糖(Glu)高值结果的差异及稳定性,探究两种检验方式的检验特点及有效的应用价值,为血糖试验即时准确检验血糖值提供科学可靠的依据。方法 sPf级雄性Wistar正常大鼠100只,180-220 g,造模大鼠体重200-240 g,按体重序分为正常组大鼠和模型组大鼠,其中正常组40只,采用快速血糖仪与生化仪对比检测血糖值,20只大鼠/1次;模型组大鼠60只,采用2%链脲佐菌素(stZ)腹腔注射进行Ⅱ型糖尿病大鼠造模,选取造模成功的大鼠40只,同正常组大鼠,采用快速血糖仪与生化仪对比检测血糖值,20只大鼠/1次。快速血糖仪检测组采用大鼠尾静脉取血;生化仪检测组采用戊巴比妥钠麻醉动物后颈外静脉采血。观察正常大鼠和Ⅱ型糖尿病模型组大鼠进行快速血糖仪和生化仪检测正常血糖和血糖高值对比差异研究。结果正常组大鼠快速血糖仪和生化仪两种检测血糖值方法比较,P 0.05,无统计学差异。模型组大鼠快速血糖仪和生化仪两种检测血糖值方法比较,P 0.05,无统计学差异。结论临床前动物试验血糖检测时,快速血糖仪和常规生化仪均有良好准确度,但前者临床前试验操作简单,使用更方便快捷,用血量少,有更高的应用价值。     

具抗肿瘤活性海洋细菌HY108的发酵优化

目的对海洋细菌HY108进行发酵工艺的优化,以提高菌株发酵液的抗肿瘤活性。方法采用MTT检测法检测菌株发酵液对人肝癌细胞SMMC-7721的抑制率,对该菌株的培养基组成和发酵条件进行了确定。结果通过对该菌株产抗肿瘤活性物质的发酵培养基和发酵条件的优化,菌株发酵液对肿瘤细胞的抑制率提高了近20%,为提高抗肿瘤先导化合物的产率提供了理论依据。结论通过优化,获得最佳发酵培养基为：玉米粉3%、葡萄糖0.5%、蛋白胨0.2%和酵母粉1.2%,pH6.5～7.0;最佳发酵条件为：种龄24h,以2%的接种量接种,28℃的条件下150r/min振荡培养3d。     

预防性葛根素抑制UVB诱导的HaCaT细胞凋亡

目的探讨预防性葛根素对UVB诱导的HaCa T细胞凋亡的影响。方法 HaCa T细胞与0.49、1.0mg.mL-1葛根素孵育1h后,以30mJ.cm-2UVB直接照射细胞,24h后收集细胞测定细胞凋亡率和p53蛋白。结果葛根素预处理HaCa T细胞的凋亡率下降,同时细胞表达的p53蛋白减少。结论预防性葛根素抑制UVB诱导的HaCa T细胞凋亡,可能与下调p53蛋白有关。     

海莲叶提取物对胃癌细胞增殖的抑制作用及对小鼠急性毒性试验

目的 研究海莲叶提取物（BSLE）对人胃癌细胞增殖的抑制作用及其对小鼠的急性毒性。方法 先以CCK-8细胞增殖抑制试验测试BSLE对人胃癌细胞SGC-7901和MGC80-3的抑制作用。再以流式细胞术观察BSLE对人胃癌细胞周期的影响。然后建立人胃癌细胞SGC-7901和MGC80-3的裸小鼠皮下移植瘤模型,观察BSLE对胃癌细胞皮下移植瘤的抑制作用。最后将BSLE以9.6 g/kg剂量对小鼠单次给药,观察其急性毒性大小。结果 BSLE在细胞实验中剂量依赖性地抑制两种常见的胃腺癌细胞SGC-7901和MGC80-3的增殖,对这两种细胞的IC50分别为31.02 μg/mL和35.23 μg/mL。在裸小鼠抑瘤试验中,BSLE随着剂量增加对胃癌细胞皮下移植瘤生长的抑制作用逐渐增强,相对肿瘤增殖率（T/C）均低于40%。流式细胞术的结果显示BSLE能增加肿瘤细胞进入G0/G1期的细胞比率,提示它可能作用于G0/G1期。BSLE的急性毒性反应主要为腹泻和体重增长缓慢。结论 BSLE对胃癌细胞增殖有抑制作用,其作用机理可能与阻滞细胞G0/G1期有关。BSLE对小鼠的急性毒性反应较少且症状轻。     

ELISA 法检测食蟹猴血浆中rhCNB 多肽的方法学评价

目的:酶联免疫吸附法(ELISA)定量测定食蟹猴血浆中rhCNB多肽的方法学评价。方法:利用双抗体夹心ELISA法,对rhCNB多肽的方法学灵敏度、线性范围、精密度与准确度和回收率进行方法学验证。结果:该方法特异性高,在0.195~12.5 ng/ml的线性范围内,线性关系良好,标准曲线方程为Y=15.1X-0.26,R~2=0.996 8,定量下限(LLOQ)为0.195 ng/ml;该方法的批内精密度CV分别为3.55%、1.39%和4.71%;批间精密度CV分别为1.59%、3.2%和3.8%,均5%,准确度在91.9%~108.8%之间,方法回收率在88.5%~108.3%之间,110%,说明该ELISA方法的准确度较高。符合验证要求。结论:双抗体夹心ELISA法灵敏度高、通量大、重复性、准确度及精密度好,可用于生物样品中rhCNB多肽的定量检测。     

通体结香技术产沉香的提取物灌胃KM小鼠的急性毒性研究

目的:考察KM小鼠灌胃给药接受过量通体结香技术产沉香的提取物后可能出现的急性毒性反应。方法:采用"最大给药量法"进行试验灌胃给予小鼠通体结香技术产沉香的提取物,观察记录小鼠的中毒症状及死亡情况,并于14 d后剖检小鼠观察其主要脏器。结果:以40 g·kg-1剂量给药后,小鼠均未产生明显的毒性症状,其体重与阴性对照组小鼠体重比较无显著差异(P0.05),且大体剖检生命脏器未见异常。结论:通体结香技术产沉香的提取物对KM小鼠无明显毒性。可认为成人以临床常用剂量服用通体结香技术产沉香药材安全可行。     

肺腺癌转录本1及其信号通路与非小细胞肺癌的关系研究进展

转移相关肺腺癌转录本1(MALAT1)最初被发现在早期非小细胞肺癌（NSCLC）中过表达。MALAT1因其结构的特殊性呈现的半衰期使其在NSCLC组织或血液中被检测到,并在NSCLC发生、发展中起关键作用。MALAT1的表达与NSCLC的肿瘤大小、分期、转移和远处浸润显著相关。MALAT1可促进NSCLC进展,其机制为下调miR-202表达,通过miR-185-5p上调鼠双微体4表达,下调叉头框蛋白P3泛素化影响轧棉厂复合亚基1转录;靶向miR-374b-56上调富含丝氨酸/精氨酸的剪接因子7表达;靶向miR-200a上调锌指E盒结合同源盒因子家族表达。因此,MALAT1可作为NSCLC患者早期诊断、病情评估、预后预测的生物标志物。