超高效液相色谱快速检测万古霉素浓度方法的建立和性能评价

目的建立一种基于超高效液相色谱(UPLC)技术快速测定血清万古霉素浓度的方法并评价其性能。方法以去甲万古霉素为内标,以0.3 mol/L硫酸锌水溶液为蛋白沉淀剂,对血清样本进行前处理。色谱柱为Phenomenex Kinetex C18柱(100 mm×2.1 mm,2.6μm),流速为0.5 mL/min,检测波长为220 nm,柱温40℃。流动相A为25 mmol/L磷酸二氢钾缓冲液(pH值为2.5),流动相B为乙腈,进行梯度洗脱,并对方法的线性、准确度(加标回收率)、精密度、携带污染率、定量限和检测限等分析性能进行评价。分别采用UPLC和高效液相色谱(HPLC)测定50例患者血清万古霉素浓度,并对测定结果进行方法学比对和评价。结果UPLC测定万古霉素的线性范围为2.0~99.6μg/mL,定量限和检测限分别为1.0和0.1μg/mL。低、中、高浓度样本的平均批内变异系数(CV)分别为3.28%、2.21%、2.59%,批间CV分别为5.73%、2.75%、0.82%。低浓度(2.0μg/mL)、中浓度(19.9μg/mL)、高浓度(79.6μg/mL)加标样本的平均加标回收率分别为104.06%、99.80%、100.19%。中浓度样本的携带污染率为0.57%,高浓度样本的携带污染率为0.19%。UPLC和HPLC测定患者血清万古霉素浓度具有良好的相关性(r=0.9919)。结论建立了基于UPLC技术的万古霉素血药浓度监测方法,该方法的重现性好、快速、简便、灵敏度高、准确度高,适用于临床常规万古霉素药物浓度监测。     

SFOD-LPME-HPLC测定金线莲中对羟基苯乙酮和香草乙酮

目的：建立漂浮有机液滴凝固液相微萃取-高效液相色谱（SFOD-LPME-HPLC）法测定金线莲中对羟基苯乙酮和香草乙酮含量的方法。方法：利用SFOD-LPME技术对中药材金线莲中低峰度组分对羟基苯乙酮和香草乙酮进行富集,最后运用HPLC进行分析。优化后的萃取实验条件：60 μL的十二醇为萃取溶剂,1 000 μL的四氢呋喃为分散溶剂,15 mL样液加入氯化钠4.50 g,pH为4.0,40℃水浴,以1 500 r·min^-1转速搅拌萃取40 min。色谱条件：色谱柱：Agilent TC-C₁₈（4.6 mm×250 mm,5 μm）;流动相：甲醇-0.1%乙酸（25：75）;流速：1.0 mL·min^-1;柱温：31.5℃;检测波长：275 nm。结果：对羟基苯乙酮和香草乙酮的线性范围均为2~24 ng·mL^-1,检测限分别为0.06 ng·mL^-1和0.17 ng·mL^-1,富集倍数分别为166和140,测得福建南靖组培金线莲中对羟基苯乙酮和香草乙酮的含量分别为1.69 μg·g^-1和0.72 μg·g^-1,回收率在95.29%~104.30%之间。结论：该法具有集富集、净化于一体的特点,可成为简单、可靠、快速的中药质量控制前处理和测定方法。