超高效液相色谱法同时测定瑞香狼毒中伞形花内酯和狼毒色原酮的含量

目的：建立超高效液相色谱（UPLC）法测定瑞香狼毒药材中伞形花内酯和狼毒色原酮的含量。方法：超高效液相色谱法,Waters BEH C₁₈（2.1 mm×100 mm,1.7 μm）色谱柱;流动相为乙腈（A）-0.1%磷酸水溶液（B）,进行梯度洗脱;检测波长伞形花内酯为327 nm,狼毒色原酮为297 nm;流速0.3 mL·min^-1;进样量2 μL,柱温25℃。结果：伞形花内酯、狼毒色原酮的线性范围分别为0.74~19.64 μg·mL^-1（r=0.999 9）、14.70~352.8 μg·mL^-1（r=0.999 8）,平均回收率分别为99.20%,99.63%,RSD分别为1.81%,1.65%。13批瑞香狼毒药材中伞形花内酯的含量范围为0~0.602 mg·g^-1,狼毒色原酮的含量范围6.08~33.37 mg·g^-1。结论：该方法操作简便、快速、重复性好、结果准确可靠,可用于中药瑞香狼毒的质量控制。     

HPLC-ELSD法快速测定生脉注射液中糖类成分含量

目的：利用高效液相色谱-蒸发光散射检测法（HPLC-ELSD）建立生脉注射液中糖类成分快速定量分析方法。方法：采用Alltech Prevail^TM Carbohydrate ES （4.6 mm×250 mm,5 μm）色谱柱,以乙腈和水为流动相梯度洗脱,流速0.8 mL·min^-1,柱温30℃,进样量20 μL,ELSD漂移管温度65℃。结果：生脉注射液中果糖、葡萄糖、蔗糖和麦芽糖成分达到基线分离,浓度在179.0~2 864 μg·mL^-1（r=0.996 8）,49~784 μg·mL^-1（r=0.998 1）,39~642 μg·mL^-1（r=0.996 8）,30~480 μg·mL^-1（r=0.999 3）范围内均呈现良好的线性关系。平均回收率（n=3）在98.34%~100.7%之间,RSD ≤ 3.8%。结论：该方法快速、准确,可用于生脉注射液中糖类成分的定量检测。     

高效液相色谱法同时测定四逆散中6种抗抑郁成分含量

目的：建立高效液相色谱法同时测定四逆散中6种抗抑郁成分：柴胡皂苷A、芍药苷、橙皮苷、柚皮苷、新橙皮苷和甘草苷含量的方法。方法：采用高效液相色谱法,色谱柱为Agilent Zorbax C₁₈色谱柱（4.6 mm×150 mm,5 μm）,流动相为水（A）-乙腈（B）,梯度洗脱,流速为1.0 mL·min^-1,柱温为30℃,检测波长为203 nm,进样量为20 μL。结果：柴胡皂苷A、芍药苷、橙皮苷、柚皮苷、新橙皮苷和甘草苷的线性范围分别为2.12～33.86 μg·mL^-1（r²=1.000 0）、5.91～94.60 μg·mL^-1（r²=0.999 9）、2.12～33.86 μg·mL^-1（r²=0.999 9）、7.26～116.2 μg·mL^-1（r²=1.000 0）、13.5～216.0 μg·mL^-1（r²=0.999 9）、2.02-32.33 μg·mL^-1（r²=0.999 9）。精密度、重复性和稳定性试验RSD均符合要求。柴胡皂苷A、芍药苷、橙皮苷、柚皮苷、新橙皮苷和甘草苷的加样回收率分别为102.77%、101.49%、101.18%、101.26%、99.06%。结论：本法灵敏简便、准确度高,适用于同时测定四逆散中6种抗抑郁成分柴胡皂苷A、芍药苷、橙皮苷、柚皮苷、新橙皮苷和甘草苷的含量,可用于四逆散的质量控制。     

反相高效液相色谱法同时测定芪香胶囊中红景天苷、芍药苷及毛蕊异黄酮葡萄糖苷的含量

目的：建立高效液相色谱法同时测定芪香胶囊（黄芪、红景天、赤芍、红花）中红景天苷、芍药苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷3种活性成分的含量。方法：采用Phenomenex Luna色谱柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）,以乙腈（A）和水（B）为流动相,梯度洗脱[0~11 min,A-B（10：90）,11~40 min,A-B（18：82）,40~45 min,A-B（10：90）],流速1.0 mL·min^-1,柱温为35℃,检测波长：230 nm。结果：红景天苷在55.07~192.8 μg·mL^-1、芍药苷在65.45~229.1 μg·mL^-1、毛蕊异黄酮葡萄糖苷在10.74~64.44 μg·mL^-1 范围内均呈良好线性关系;相关系数分别为0.999 8,0.999 7,0.999 8;红景天苷、芍药苷和毛蕊异黄酮葡萄糖苷的回收率分别为99.90%,100.88%,100.06%,样品溶液在24 h内稳定,含量分别为1.422 2,3.183 3,0.250 0 mg·g^-1。结论：该方法经验证,可为芪香胶囊多指标质量评价及控制提供科学依据。     

高效液相色谱-荧光检测法测定盐酸帕罗西汀在小鼠血浆和脑组织中的蛋白结合率

目的:建立生物样品中盐酸帕罗西汀浓度的高效液相色谱-荧光检测方法,测定盐酸帕罗西汀在小鼠血浆和脑组织中的蛋白结合率。方法:以盐酸普萘洛尔为内标,血浆和脑组织匀浆样品采用醋酸乙酯萃取,采用高效液相色谱-荧光检测方法,其中色谱柱为Eurospher 100-5 C₁₈柱(250 mm×4 mm, 5 μm);流动相为乙腈-0.5%三乙胺水溶液=35:65(磷酸调pH值至3.5);柱温:40℃;流速:1 mL·min^-1;检测波长:激发波长295 nm,发射波长350 nm,进样量:20 μL。蛋白结合率的测定采用平衡透析法。结果:血浆和脑匀浆液中盐酸帕罗西汀在0.05~10 μg·mL^-1范围内线性关系良好,血浆与脑匀浆液基质提取回收率均>75%;日内、日间精密度均<10%。磷酸盐缓冲液盐酸帕罗西汀在0.005~0.5 μg·mL^-1内线性良好,定量下限为0.005 μg·mL^-1,且日内、日间精密度均符合要求。当血浆和脑匀浆液中盐酸帕罗西汀质量浓度为1.0,3.0,6.0 μg·mL^-1时,血浆蛋白结合率分别为(96.14±0.38)%,(96.07±0.88)%,(97.25±0.23)%;脑组织蛋白结合率分别为(99.84±0.031)%,(99.83±0.021)%,(99.80±0.041)%。结论:本研究建立的分析方法快速、简单、灵敏、准确,可用于生物样品中盐酸帕罗西汀含量的测定。小鼠血浆和脑组织中盐酸帕罗西汀蛋白结合率高,只有极少的药物以游离形式存在而发挥作用。     

高效液相色谱法测定人血清中替考拉宁浓度的不确定度评定

目的：评定高效液相色谱（HPLC）法测定人血清中替考拉宁浓度的不确定度。方法：HPLC法测定人血清中替考拉宁浓度，分析评定测定精密性、天平称量、工作液制备、血清样品制备、液相色谱仪、提取回收率、标准曲线拟合、对照品纯度、样品均匀性以及温度等因素对结果的影响，计算各因素的相对标准不确定度，最终计算合成标准不确定度和扩展不确定度。结果：当置信概率为95%时，人血清中低（6 μg·mL^-1）、中（20 μg·mL^-1）、高（50 μg·mL^-1）浓度替考拉宁的扩展不确定度分别为U（L）=0.63 μg·mL^-1，U（M）=1.87 μg·mL^-1，U（H）=5.08 μg·mL^-1，其测量结果可分别表示为（6.18±0.63）、（20.74±1.87）、（50.09±5.08）μg·mL^-1。结论：HPLC法测定人血清中替考拉宁浓度的不确定度主要由标准曲线拟合、样品提取过程（特别是低、高浓度）引入。     

高效液相色谱法同时测定人血清中茶碱及其代谢物1,3-二甲基尿酸浓度

目的：建立一种同时测定人血清样品中茶碱及其代谢物1,3-二甲基尿酸血药浓度的HPLC方法。方法：血清样品经乙腈沉淀除去蛋白,选择对乙酰氨基酚为内标,真空浓缩、复溶后采用HPLC分析。色谱柱为：Agilent ZORBAX SB-C₁₈柱（150 mm×4.6 mm,5 μm）,流动相为乙腈∶0.3%甲酸溶液（5∶95）,检测波长为280 nm,流速为1 mL·min^-1,进样量为20 μL。结果：茶碱、1,3-二甲基尿酸的血清浓度线性范围分别为0.50~40.00 μg·mL^-1和0.10~12.80 μg·mL^-1,两者的线性关系均良好（R分别为0.998 8和0.999 7）,最低定量下限分别为0.50,0.10 μg·mL^-1。茶碱和1,3-二甲基尿酸低、中、高质量浓度的提取回收率分别为80.22%,87.25%,89.23%和87.03%,80.01%,87.95%,二者批内和批间RSD均小于15%。结论：该方法简便、准确,特异性和灵敏度能够满足临床测定人血清中茶碱及其代谢物1,3-二甲基尿酸浓度的要求,适用于评价和研究人体内茶碱的药动学影响,指导临床用药。     

超高效液相色谱法同时测定南、北五味子中的7种木脂素含量

目的：建立UPLC测定五味子中7种木脂素的方法,并测定不同地区的南、北五味子中木脂素成分含量。方法：色谱柱ZORBAX Eclipse Plus C₁₈ column （1.8 μm,100 mm×2.1 mm）;流动相乙腈-水,梯度洗脱;流速0.3 mL·min^-1;柱温40℃;检测波长220 nm;进样体积1 μL。结果：各成分即五味子醇甲、五味子醇乙、五味子酯甲、五味子酯乙、五味子甲素、五味子乙素、五味子丙素之间基本达到基线分离,且线性关系良好,线性范围分别为0.984~246.000,0.636~159.000,0.552~138.000,0.472~1.180,0.952~2.380,1.120~2.810,0.436~1.090 μg·mL^-1（r>0.999 6）。平均加样回收率在98.29%~102.5%之间,RSD在1.4%~1.9%之间。结论：所建立的测定方法快速、稳定、可靠,适用于不同产地南、北五味子中木脂素含量的测定。     

高效液相色谱法检测干血滤纸片中卡马西平的浓度

目的：建立高效液相色谱法检测干血滤纸片中卡马西平血药浓度的方法。方法：将30 μL含卡马西平的全血滴在滤纸上,室温下晾干至少3 h,待干透后从滤纸上打孔取下6 mm直径的血斑,放入1.5 mL普通离心管中,加入含有内标的甲醇溶液200 μL,超声水浴10 min,涡旋1 min,15 000 r·min^-1离心5 min,取上清进样。色谱柱为AgilentTC-C₁₈柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）,流动相为甲醇-水（55：45）,内标为苯妥英,流速为1.0 mL·min^-1,检测波长为235 nm。结果：卡马西平血药浓度在1.0~32.0 μg·mL^-1范围内与峰面积呈良好线性关系（r=0.999 0）,方法回收率为101.3%~110.5%,提取回收率为59.8%~62.1%。结论：本方法操作简单、准确、可靠,适用于测定干血滤纸片中卡马西平的血药浓度。     

RP-HPLC法同时测定人血浆中左乙拉西坦、奥卡西平及其活性代谢产物的浓度

目的：建立同时测定人血浆中左乙拉西坦、奥卡西平及其代谢产物单羟基卡马西平的含量测定方法,为左乙拉西坦与奥卡西平联合用药治疗癫痫提高临床疗效与用药安全性提供指导。方法：患者血浆样品经乙酸乙酯-二氯甲烷（70：30）沉淀蛋白处理后,以β-萘酚做内标,采用RP-HPLC法同时测定左乙拉西坦、奥卡西平及单羟基卡马西平的含量。色谱柱为Agilent C₁₈反相色谱柱,流动相为：乙腈（A）-水相（B）（由0.3%三氟乙酸与10 mmol·L^-1甲酸铵溶液按2：1体积比混合）梯度洗脱,流速1 mL·min^-1,柱温30℃,进样量10 μL,内标为β内萘酚,检测波长为210 nm （0~13 min）、225 nm （13~25 min）。结果：LEV、OXC、MHD血药浓度分别在2.0~60.0、2.0~60.0、3.0~96.0 μg·mL^-1范围内线性关系良好（r分别为LEV 0.999 7、MHD 0.999 6、OXC 0.999 8）,定量下限分别可达到2.0、2.0、3.0 μg·mL^-1;各组分的日内、日间精密度RSD均小于4%,各方法平均回收率均大于96%,LEV、OXC、MHD低、中、高3个浓度的提取回收率均>85%,稳定性的RSD均<15%。结论：该方法操作简便、快捷,专属性强,结果准确可靠,可用于左乙拉西坦、奥卡西平及其代谢产物单羟基卡马西平的临床血药浓度监测。     

高效液相色谱法同时测定蒙药阿那日-4散中3种成分的含量

目的：建立蒙药阿那日-4散（石榴、肉桂皮、白豆蔻、荜茇）中有效成分没食子酸、桂皮醛和胡椒碱的含量测定方法。方法：采用反相高效液相色谱法以Promosil C₁₈（4.6 mm×250 nm,5μm）为色谱柱;以乙腈-1%冰乙酸水溶液为流动相,梯度洗脱;流速为1.0 mL·min^-1;柱温为30℃;检测波长为290 nm。结果：没食子酸在0.08~0.4μg·mL^-1（r=0.9998）、桂皮醛在0.56~2.81μg·mL^-1（r=0.9996）、胡椒碱在0.52~2.59μg·mL^-1（r=0.9997）范围内与峰面积呈良好的线性关系;其平均回收率（n=6）分别为99.5%（RSD=2.3%）、99.3%（RSD=2.8%）和98.5%（RSD=2.2%）;6批样品中上述3种成分平均含量范围分别为0.198~0.241,2.44~2.61,1.41~1.54μg·g^-1。结论：所建立方法操作简便、稳定可靠、专属性强、准确度及重复性较好,为蒙药阿那日-4散质量检测提供依据。     

反相高效液相色谱法同时测定伊马替尼及伏立康唑血药浓度

目的:建立同时测定人血浆中伊马替尼及伏立康唑浓度的高效液相色谱法。方法:血桨样品经乙酸乙酯-正己烷(75∶25)萃取,选择卡马西平为内标,氮吹浓缩、复溶后采用HPLC分析。ZORBAX SB-C18柱反相柱(250 mm×4.6 mm,5μm)为色谱柱,流动相为甲醇-乙腈-醋酸铵缓冲液(25 mmol·L^-1 CH_3COONH_4,CH_3COOH调pH值至4.5)=20∶32∶48(V/V/V),检测波长264 nm,流速为1 mL·min^-1,柱温35℃,进样量为20μL。结果:伊马替尼、伏立康唑血药浓度线性范围分别为0.10~5.00μg·mL^-1和0.10~6.00μg·mL^-1,两者的线性均良好(r分别为0.998和0.999),最低定量下限均为0.10μg·mL^-1。伊马替尼和伏立康唑低、中、高质量浓度的提取回收率分别为69.21%,71.23%,73.53%和76.23%,78.12%,79.34%,二者批内RSD均小于15%。结论:该方法简便、快速、灵敏度高可满足同时检测伊马替尼和伏立康唑的临床血药浓度监测及药动学研究。     

柱前衍生-气质联用法同时测定人血浆中水杨酸、阿司匹林和氯吡格雷的浓度

目的：建立一种同时测定人血浆中水杨酸、阿司匹林和氯吡格雷浓度的GC-MS方法。方法：使用SH-Rxi-5Sil（30 m×0.25 mm ID，0.25 μm）气相色谱柱，以甲醇作为样品溶剂同时也是甲酯衍生化试剂，在气相进样口高温衬管内衍生化并气相分离，质谱定量检测样本中的水杨酸和阿司匹林衍生物，以及氯吡格雷的含量。结果：水杨酸、阿司匹林和氯吡格雷分别在0.26～127.5μg·mL^-1、1.93～965μg·mL^-1和5.45~2180ng·mL^-1范围内线性良好，三种待测物的定量下限分别可达0.26，1.93，5.45 ng·mL^-1。结论：该方法所用的血浆样本量少，操作相对简便污染小，测定周期短，对水杨酸、阿司匹林和氯吡格雷的测定结果稳定性和重复性良好，可以作为临床血药浓度检测的方法推广。     

中空纤维离心超滤法快速分析血药浓度的研究

目的：建立用同一份血浆样品分析卡马西平（CBZ）游离浓度、总浓度及蛋白结合率的样品前处理方法。方法：加500 μL血浆样品至中空纤维离心装置（HFCF-UF）中,4 000 r·min^-1离心15 min,取滤液直接注入HPLC测定游离浓度（c_f）后,再向该装置中加入200 μL丙酮,混匀5 min,同法进行离心操作,取滤液分析得血浆剩余药物浓度（c₀）,经校正,可得血浆药物总浓度（c_t）,进而计算蛋白结合率（PPB）。结果：c_f和c_t在0.535~21.4 μg·mL^-1的范围内线性关系良好（r²>0.999）,c_t的回收率为98.7%~101.3%,RSD小于1.2%。进行CBZ治疗的20名临床患者的PPB为10.1%~68.9%,其与健康受试者的PPB之间存在统计学差异。结论：该样品前处理方法简单,结果准确,为分析不同生理条件下不同患者的PPB及c_f变化提供有利的手段,进而指导临床开展个性化治疗。