抗钠-钙交换体α-1_((106-145))抗体对大鼠离体心功能的影响及其机制

目的观察1～103nmol·L-1抗钠-钙交换体(NCX)α-1(106-145)肽段抗体对离体大鼠心功能的影响并分析其作用机制。方法用化学合成的NCXα-1(106-145)肽段主动免疫新西兰大耳白兔制备并纯化抗体,利用Langendorff离体灌流系统观察其对大鼠离体心功能的影响;利用全细胞膜片钳技术观察其对心肌细胞钠-钙交换电流、L-型钙电流、瞬时外向钾电流和内向整流钾电流的影响。结果经主动免疫后兔体内抗α-1(106-145)抗血清滴度明显升高,Protein A纯化后抗体浓度为13.1 g.L-1。与对照组相比,1～10 nmol·L-1α-1抗体可使大鼠离体心脏左室发展压(LVDP)和左室压最大上升速率(+dp/dtmax)明显增加(P<0.01),并使左室压最大下降速率(-dp/dtmax)减小(P<0.01),且KB-R7943(2μmol·L-1)可使α-1抗体(1 nmol·L-1)的上述效应进一步增强。然而,102～103nmol·L-1α-1抗体则可使大鼠离体心脏LVDP、±dp/dtmax呈不同程度地下降(P<0.01)。全细胞膜片钳实验结果表明,在1～103nmol·L-1浓度范围内,抗α-1抗体对大鼠心肌细胞外向和内向Na+/Ca2+交换电流均表现出剂量依赖性的抑制效应,对瞬时外向钾电流和内向整流钾电流均无明显影响。此外,102～103nmol·L-1α-1抗体对L-型钙电流也具有抑制作用。结论低浓度α-1抗体(1～10 nmol·L-1)可明显增强心肌收缩,这一效应与其在低浓度时专一性抑制Na+/Ca2+交换电流有关;高浓度α-1抗体(102～103nmol·L-1)则可同时抑制心肌收缩和舒张,该作用与其同时抑制Na+/Ca2+交换电流和L-型钙电流有关。     

Na~＋/Ca~（2＋）交换体α-2（807-844）抗体的制备及其对大鼠心肌细胞Na~＋/Ca~（2＋）交换电流的抑制作用

目的在制备和纯化抗心肌Na＋/Ca2＋交换体α-2（807-844）肽段抗体的基础上,观察抗体对大鼠心肌细胞Na＋/Ca2＋交换电流及L型钙电流（ICa）、瞬时外向钾电流（Ito）和内向整流钾电流（Ik1）的影响。方法利用人工合成的α-2（807-844）多肽免疫兔制备抗α-2（807-844）抗体,抗血清经Protein A亲和柱纯化,利用全细胞膜片钳技术观察纯化后抗体对心肌细胞Na＋/Ca2＋交换电流（INa/Ca）、L型钙电流（ICa）、瞬时外向钾电流（Ito）和内向整流钾电流（Ik1）的影响。结果经主动免疫,抗Na＋/Ca2＋交换体α-2（840-877）抗血清效价达1∶243 000,纯化后抗α-2（840-877）抗体浓度为7.21mg/mL。纯化后的抗体在SDS-PAGE时出现清晰的2条带,其分子量分别为25kD和50kD左右。在1nmol/L～104nmol/L浓度范围内,抗α-2抗体对成年大鼠心肌细胞外向和内向Na＋/Ca2＋交换电流均表现为剂量依赖性的抑制作用;对Ito和Ik1则均未见明显影响。此外,104nmol/L该抗体对L型钙电流亦具有抑制作用。通过氨基酸序列比对发现,α-2（807-844）肽段与L型钙通道第2结构域孔环（697～730位氨基酸）序列相似度为23.7%,可能是抗体对L型钙通道出现交叉反应的原因。结论在1nmol/L～103nmol/L浓度范围内,抗心肌Na＋/Ca2＋交换体α-2（807-844）抗体可特异性抑制大鼠心肌Na＋/Ca2＋交换活动;对L型钙通道电流、瞬时外向钾通道电流和内向整流钾通道电流均未见明显影响。     

抗钠一钙交换体α-2（807-844）抗体对Langendorff灌流大鼠离体心功能的影响

目的观察1～103nmo｜／I。抗钠－钙交换体（NCX）α-2（807-844）肽段抗体对离体大鼠心功能的影响。方法化学合成的Ncxa－α-2（807-844）肽段主动免疫新西兰大耳白兔制备并纯化抗体,采用Langendorff离体心脏灌流系统观察对大鼠离体心功能的影响。结果主动免疫后免体内抗α-2（807-844）抗血清滴度明显升高,经ProteinA纯化后获得浓度为7．21mg／mL的抗体;与对照组比较,1～10nmol／Lα-2抗体可明显增加大鼠离体心脏左室发展压（LVDP）及左室压最大上升速率（＋dP／dtmax,P〈0．01）,且使左室压最大下降速率（-dP／dtmax）减小（P〈0．01）;然而,102～103nmol／Lα-2抗体则可不同程度地降低正常大鼠离体心脏LVDP、±dP／dtmax（P〈0．01）。结论抗钠一钙交换体α-2（807-844）肽段抗体对离体大鼠心功能的作用与其浓度有关。在低浓度时,α-2抗体可使心肌收缩增强;而较高浓度的α-2抗体可同时抑制心肌收缩和舒张。     

抗钠-钙交换体α-2(807-844)抗体对Langendorff灌流大鼠离体心功能的影响

目的观察1～103 nmol/L抗钠-钙交换体(NCX)α-2(807-844)肽段抗体对离体大鼠心功能的影响。方法化学合成的NCXα-2(807-844)肽段主动免疫新西兰大耳白兔制备并纯化抗体,采用Langendorff离体心脏灌流系统观察对大鼠离体心功能的影响。结果主动免疫后兔体内抗α-2(807-844)抗血清滴度明显升高,经Protein A纯化后获得浓度为7.21mg/mL的抗体;与对照组比较,1～10nmol/Lα-2抗体可明显增加大鼠离体心脏左室发展压(LVDP)及左室压最大上升速率(+dP/dtmax,P<0.01),且使左室压最大下降速率(-dP/dtmax)减小(P<0.01);然而,102～103 nmol/Lα-2抗体则可不同程度地降低正常大鼠离体心脏LVDP、±dP/dtmax(P<0.01)。结论抗钠-钙交换体α-2(807-844)肽段抗体对离体大鼠心功能的作用与其浓度有关。在低浓度时,α-2抗体可使心肌收缩增强;而较高浓度的α-2抗体可同时抑制心肌收缩和舒张。     

Na+/Ca2+交换体α-2(807-844)抗体的制备及其对大鼠心肌细胞Na+/Ca2+交换电流的抑制作用

目的 在制备和纯化抗心肌Na+/Ca2+交换体α-2(807- 844)肽段抗体的基础上,观察抗体对大鼠心肌细胞Na+/Ca2+交换电流及L型钙电流(ICa)、瞬时外向钾电流(Ito)和内向整流钾电流(Ik1)的影响.方法 利用人工合成的α-2(807-844)多肽免疫兔制备抗α-2(807- 844)抗体,抗血清经Protein A亲和柱纯化,利用全细胞膜片钳技术观察纯化后抗体对心肌细胞Na+/Ca2+交换电流(INa/Ca)、L型钙电流(ICa)、瞬时外向钾电流(Ito)和内向整流钾电流(Ik1)的影响.结果 经主动免疫,抗Na+/Ca2+交换体α- 2(840-877)抗血清效价达1∶243000,纯化后抗α-2(840- 877)抗体浓度为7.21 mg/mL.纯化后的抗体在SDS - PAGE时出现清晰的2条带,其分子量分别为25 kD和50 kD左右.在1 nmol/L～104 nmol/L浓度范围内,抗α-2抗体对成年大鼠心肌细胞外向和内向Na+/Ca2+变换电流均表现为剂量依赖性的抑制作用；对Ito和Ik1则均未见明显影响.此外,104 nmol/L该抗体对L型钙电流亦具有抑制作用.通过氨基酸序列比对发现,α- 2(807 - 844)肽段与L型钙通道第2结构域孔环(697～730位氨基酸)序列相似度为23.7％,可能是抗体对L型钙通道出现交叉反应的原因.结论 在1 nmol/L～103 nmol/L浓度范围内,抗心肌Na+/Ca2+变换体α-2(807- 844)抗体可特异性抑制大鼠心肌Na+/Ca2+变换活动；对L型钙通道电流、瞬时外向钾通道电流和内向整流钾通道电流均未见明显影响.     

医护治一体化康复管理模式在脑卒中患者肺康复中的应用

目的 探索医护治一体化康复管理模式在脑卒中患者肺康复中的应用效果。 方法 选取浙江省温岭市第一人民医院2017年6月至2019年6月收治且符合纳入标准的脑卒中合并发肺功能障碍患者69例,其中2018年6月之前收集的34例患者设为对照组,之后收集的35例患者设为观察组。2组患者均给予康复医学科一般常规治疗护理及康复训练（包括运动疗法、电动起立床训练、吞咽训练、呼吸训练器锻炼、胸廓活动度训练和腹式呼吸训练,每日1次,每项训练20 min,5次/周）,观察组此基础上实施医护治一体化康复管理模式治疗,所有康复评估及治疗均由医护治三方共同商讨决定并实施。2组患者的观察时间均为6周。分别于干预前和干预6周后（干预后）,采用改良的Barthel 指数评分、洼田饮水试验评分、用力肺活量（FVC）、1秒用力呼气量(FEV1)、FEV1/FVC%、最大呼气流量（PEF）评定2组患者的日常生活活动（ADL）能力及肺功能,并观察治疗期间因肺部感染使用抗生素的比率。 结果 2组患者干预后的ADL评分和洼田饮水试验评分［对照组（33.97±8.42）和（3.65±0.69）分,观察组（40.43±9.03）和（3.11±0.76）分］均较组内干预前［对照组（18.67±7.51）和（4.09±0.67）分,观察组（19.14±6.80）和（4.11±0.63）］明显改善（P＜0.05）;且观察组的ADL及洼田饮水试验评分较对照组改善更为明显（P＜0.05）。2组患者干预后的FVC、FEV1、FEV1/FVC%、PEF［对照组（2.49±0.33）L、（1.83±0.27）L、（73.40±3.76）%、（2.64±0.32）L/s;观察组（2.83±0.34）L、（2.19±0.30）L、（77.19±4.20）%、（2.98±0.35）L/s］亦较组内干预前有明显改善（P＜0.05）,且观察组上述肺功能指标的改善情况较对照组更为显著（P＜0.05）。对照组和观察组观察期间因肺部感染使用抗生素的比率分别为55.88%（19/34）和22.86%（8/35）,观察组抗生素使用比率明显低于对照组（χ2=7.897,P＜0.01）。 结论 医护治一体化康复管理模式能有效改善脑卒中肺功能障碍患者的吞咽情况、日常生活活动（ADL）能力及肺功能,降低肺部感染发生率。