人肠道病毒71型及柯萨奇病毒A组16型VP1蛋白的真核表达

目的：克隆人肠道病毒71型（EV71）及柯萨奇病毒A组16型（CA16）的VP1蛋白编码基因，构建相应真核表达质粒在体外进行重组表达，检测其细胞内定位，为EV71及CA16的疫苗研究提供基础。方法：通过PCR扩增分别获取EV71及CA16的VP1编码序列，插入pcFlag载体，分别构建EV71及CA16 VP1与FLAG标签融合的真核表达质粒；瞬时转染人胚肾293T细胞及横纹肌肉瘤RD细胞，Western blot法检测融合蛋白的表达，免疫荧光检测融合蛋白的细胞内定位情况。结果：测序表明两种来源VP1蛋白的重组表达质粒构建正确；分别转染两种不同的细胞后，均可通过Western blot检测到相应蛋白表达；免疫荧光检测显示两种毒株的VP1均表达在细胞质中。结论：外源融合表达EV71或CA16 VP1蛋白的真核表达质粒构建成功；所构建质粒分别转染细胞后，均可在细胞质内检测到VP1融合蛋白的表达。     

人心肌肌钙蛋白玉鲁米诺化学发光酶免疫分析法的建立

目的:制备两株抗人心肌肌钙蛋白玉(human cardiac troponin Ⅰ,cTnⅠ)单克隆抗体,建立鲁米诺化学发光酶免疫分析法。方法:制备腹水型单抗、饱和硫酸铵沉淀法和亲和层析柱Protein G 纯化抗体,并通过SDS-PAGE 和ELISA 对抗体特异性进行鉴定,建立鲁米诺化学发光酶免疫分析法,并对30 份临床血清样本进行检测。结果:本实验制备的两株单抗(分别命名为Ab1、Ab3;亚型都是IgG1)能够识别以cTnⅠ单体、cTnⅠ-C 复合物和cTnⅠ-T-C 复合物不同形式存在的cTnⅠ。Ab1、Ab3 的效价分别为1 :80 万和1 :40 万,亲和力常数分别为1.62×10⁹L/ mol、2.60×10⁸ L/ mol。利用2 株单抗建立的鲁米诺化学发光酶免疫分析法检测范围为:6.25 ~ 400 ng/ ml。对30 份临床样本进行检测,阳性检出率为77.3%,阴性检出率为100%。结论:建立了可以检测以cTn玉单体、cTnⅠ-C 和cTnⅠ-T-C 复合物形式存在的cTnⅠ的鲁米诺化学发光酶免疫分析法,具有更高的实用性。     

缬沙坦与培哚普利治疗肾性高血压临床要分析

目的 观察缬沙坦和培哚普利联合治疗肾性高血压的疗效。方法 将60例慢性肾功能不全高血压患者随机分为3组，分别用缬沙坦（80mg／d）、培哚普利（4mg／d）和缬沙坦（80mg／d）加培哚普利（4mg／d）共治疗24周，单独用药组治疗12周后，若血压≤130／80mmHg（1mmHg=0．1333kPa），继续单独治疗12周，若血压〉130／80mmHg，改为联合用药治疗12周，观察血压、尿蛋白、血肌酐的变化及药物的不良反应。结果 联合用药组血压控制率比单独用药组高（P〈0．05），两种药物均有降低尿蛋白的作用。与治疗前比较，联合用药组第12周后血肌酐有明湿下降（P〈0．05）。单独用药组血压未达标病例再联合用药后血压、尿蛋白、血肌酐均有明显下降（P〈0．05）。联合用药的不良反应与单独用药相比没有明显增加。结论缬沙坦和培哚普利联合治疗肾性高血压，较单独用药能更有效地控制血压、减少蛋白尿、降低血肌酐，具有良好的安全性和耐受性。     

PVC输液器输注青霉素钠的相容性研究

通过模拟临床使用一次性输液器输注青霉素钠注射液,对一次性使用输液器中可沥滤物进行分析。研究中使用了两个不同厂家A、B两种型号的一次性使用输液器,通过高效液相色谱分析发现在输注青霉素钠时并未发生药物吸附,且对有关物质研究也证实没有迁移出新的物质。但通过气相色谱-质谱分析,流经A、B两种型号输液器的药液中均检出环己酮和DEHP,A型输液器中还检出了少量的异辛醇。这些可沥滤物主要是由输液器的生产过程中引入的,且其含量均远低于人体安全摄入量,因此,本研究表明临床治疗中使用一次性输液器输注青霉素钠存在较低风险     

穿膜肽介导的NY-ESO-1155-163诱导CTL对黑素瘤A-375细胞的杀伤活性

目的：探讨穿膜肽（cell penetrating peptide, CPP）Tat49-57携带NY-ESO-1155-163抗原肽致敏DC后诱导获得抗原特异性细胞毒性T淋巴细胞（cytotoxic lymphocyte, CTL),并体外检测其对黑素瘤细胞株A-375的杀伤效果。 方法：采集健康志愿者外周血50 ml,用淋巴细胞分离液分离外周血单个核细胞,经细胞因子诱导,获得DC和T淋巴细胞。实验组用Tat49-57-NY-ESO-1155-163致敏DC,待DC成熟后与T淋巴细胞混合诱导产生CTL,并设PBS组和NY-ESO-1155-163组作为对照。流式细胞术检测致敏前后DC的表型,乳酸脱氢酶（LDH）释放法检测抗原肽疫苗致敏DC后诱导的CTL对黑素瘤细胞株A-375的体外杀伤活性,同时与对人肺癌A549细胞株、人白血病K562细胞的杀伤作用进行比较。结果：Tat显著提升NY-ESO-1155-163进入DC的穿膜能力。与NY-ESO-1155-163致敏的DC相比,Tat49-57-NY-ESO-1155-163致敏后DC的CD80/CD86\[(54.9 ±3.3 )% vs (43.8±5.7)%,P<0.05\]和CD40\[(42.1±1.9)% vs (23.7±2.8)%,P<0.05\]的表达率显著升高。Tat49-57-NY-ESO-1155-163刺激DC后诱导培养的T细胞亚群主要以MHC-Ⅰ类分子介导的CD3+CD8+细胞为主。Tat49-57-NY-ESO-1155-163组CTL对A-375细胞的杀伤能力显著高于NY-ESO-1155-163组,且随着效靶比的增加,杀伤活性逐渐增强（P<0.05）。A-375细胞高表达NY-ESO-1,Tat49-57-NY-ESO-1155-163组CTL对A-375细胞具有特异性杀伤作用,杀伤作用显著强于A549和K562细胞（均P<0.05）。结论：Tat49-57可以增强NY-ESO-1155-163抗原多肽的免疫原性,Tat49-57-NY-ESO-1155-163多肽致敏DC能有效诱导CTL抗黑素瘤细胞A-375的特异性免疫应答。     

超声聚焦治疗变应性鼻炎的临床疗效观察

目的:探讨超声聚焦治疗变应性鼻炎的临床疗效。方法:将我院2010-2012年间收治的94例变应性鼻炎患者随机分为超声聚焦治疗组(观察组)和糠酸莫米松喷鼻治疗组(对照组),各47例,应用视觉模拟量表(VAS)对两组患者的临床疗效进行评价,同时观察两组患者治疗前、后的血清学指标变化情况。结果:观察组患者治疗后总有效率为95.7%,显著高于对照组患者的80.9%,组间差异有统计学意义(P<0.05)。两组患者治疗后的IgE、IL-4及IL-12水平较治疗前均有所改善,差异有统计学意义(P<0.05),观察组患者改善情况优于对照组患者,组间差异有统计学意义(P<0.05)。结论:采用超声聚焦手术治疗变应性鼻炎临床疗效好,能够显著改善患者的临床症状,且无创、无毒副作用,值得临床进一步推广使用。     

先天性肾上腺皮质增生症24例分析

我院自1964年至1984年共收治先天性肾上腺皮质增生症24例,其中21羟化酶缺陷18例(失盐型10例);11羟化酶缺陷3例;17羟化酶缺陷、3β-脱氢酶缺陷及     

全面部骨折临床治疗的研究

目的：探讨全面部骨折临床治疗的最佳手术方案。方法：对26例全面部骨折病例采用螺旋CT三维重建定位,设计术式,切开复位,钛板坚强内固定治疗,线型骨折处辅助内镜、90°侧壁螺丝刀从口内或口外隐蔽小切口进路复位固定,术后CT三维重建、牙颌模型复查与术前对比观察。结果：26例术后骨折复位良好,面部外形突度和对称性恢复良好、无明显疤痕。23例咬合关系恢复良好,张闭口运动、咀嚼功能恢复正常;3例咬合关系有后牙早接触,经颌间牵引和调牙合后基本恢复正常。结论：螺旋CT三维重建能显示全面部骨折的立体结构和骨折线的全貌,精确定位分析、设计手术方式,使术中有明确的路经和程序。辅助内镜、90°侧壁螺丝刀,可从口内或口外隐蔽小切口进路复位固定线型骨折,减少组织损伤及避免面部瘢痕,符合微创和美学手术原则,适用于下颌角、升支、颧骨颧弓的线型骨折。     

食管癌患者实施DC-CIK细胞过继免疫治疗联合化疗的观察及护理

目的:探讨树突状细胞-多因子诱导的杀伤细胞(DC-CIK)免疫治疗联合化疗治疗食管癌患者的临床疗效及护理措施。方法:选择2012年11月—2013年12月实施DC-CIK细胞免疫治疗联合化疗的食管癌住院患者22例,并在CIK细胞回输前、回输中和回输后给予了精心的护理。结果:22例食管癌患者接受自体CIK细胞输注后,临床症状明显改善,不良反应小,T细胞亚群明显增加。结论:食管癌患者实施DC-CIK细胞过继免疫治疗联合化疗安全有效,DC-CIK细胞治疗食管癌患者后,能明显增加其T细胞亚群,有利细胞水平的表达,在一定程度上提高了患者的免疫力。