高脂血症家兔肾小球病变及绞股蓝总苷的干预作用

目的观察高脂血症早期家兔肾小球病变及绞股蓝总苷干预作用。方法高脂饮食法复制家兔高脂血症模型,8周后检查肾脏病理改变,免疫组化法检测肾小球中Desmin,α-SMA含量。结果正常组Desmin,α-SMA蛋白无明显表达;模型组两种蛋白表达均增强,肾脏系膜细胞轻微增多;绞股蓝总苷组表达高于正常组,低于模型组。结论高脂血症早期肾小球足细胞和系膜细胞受损,最终导致肾小球硬化。绞股蓝总苷可降低这种损伤。起到保护肾脏的作用。     

飞燕草素对光化学损伤661W细胞的保护作用及其机制

目的　探讨飞燕草素对光化学损伤661W细胞的保护作用及其机制。方法　取661W细胞进行培养,根据预实验结果采用（2000±200）lux光照强度持续照射细胞48 h作为造模条件,采用5 μmol·L^-1飞燕草素、3 mmol·L^-1抗氧化剂N-乙酰-L-半胱氨酸（NAC）为最佳用药浓度。细胞分组如下:对照组,常规避光培养48 h;光照组,（2000±200）lux光照培养48 h;光照飞燕草素组,（2000±200）lux光照培养24 h,换含5 μmol·L^-1飞燕草素的培养基继续光照培养24 h;避光飞燕草素组,避光培养24 h,换含5 μmol·L^-1飞燕草素的培养基继续避光培养24 h;光照NAC组,（2000±200）lux 光照培养24 h,换含3 mmol·L^-1 NAC的培养基继续光照培养24 h。采用显微镜观察各组细胞状态、CCK-8检测细胞生存率、DCFH-DA荧光探针染色检测细胞活性氧（ROS）水平、JC-10染色检测线粒体膜电位、Annexin V-FITC/ PI染色检测细胞凋亡率、Western blot检测氧化应激线粒体凋亡通路相关蛋白表达水平。结果　显微镜下可见,对照组细胞生长状态良好;光照组细胞皱缩卷曲,脱落细胞增加。CCK-8检测结果显示:与对照组相比,光照组细胞生存率均明显降低,差异有统计学意义（P< 0.05）;避光飞燕草素组细胞生存率无明显变化（P>0.05）。与光照组相比,光照飞燕草素组、光照NAC组和避光飞燕草素组细胞生存率均明显回升,差异均有统计学意义（均为P<0.05）。与对照组相比,光照组ROS含量均明显上升,差异有统计学意义（P< 0.05）;避光飞燕草素组ROS含量减少不明显,差异无统计学意义（P>0.05）。与光照组相比,光照飞燕草素组、光照NAC组和避光飞燕草素组ROS含量均明显下降,差异均有统计学意义（均为P<0.05）。与对照组相比,光照组线粒体膜电位均明显下降,差异有统计学意义（P< 0.05）;避光飞燕草素组线粒体膜电位变化不明显,差异无统计学意义（P>0.05）。与光照组相比,光照飞燕草素组、光照NAC组和避光飞燕草素组线粒体膜电位明显上升,差异均有统计学意义（均为P<0.05）。与光照组相比,光照飞燕草素组、光照NAC组和避光飞燕草素组细胞凋亡率均明显降低,差异均有统计学意义（均为P<0.05）。与光照组相比,光照飞燕草素组、光照NAC组和避光飞燕草素组的iNOS、Bax、细胞色素C、Cleaved-Caspase-3蛋白表达均下调,Bcl-2蛋白表达均上调,Bcl-2/Bax值均明显上升,差异均有统计学意义（均为P< 0.05）。结论　飞燕草素可通过调节氧化应激线粒体凋亡通路相关蛋白表达,对光化学损伤661W细胞产生保护作用。     

飞燕草素对HER-2阳性乳腺癌的抑制效应及分子机制研究

目的 探讨飞燕草素（Dp）对HER-2阳性乳腺癌的抑制效应及分子机制。方法 以HER-2阳性乳腺癌细胞（MDA-MB-453和BT-474）为研究对象，经不同浓度Dp（10、20、40、80及160 μmol/L）处理48 h，同等浓度的DMSO为溶剂对照（Control），采用CCK-8法检测Dp对细胞活性的影响，计算半数抑制浓度（IC50），以确定后续实验浓度；以不同浓度Dp（20、40及80 μmol/L）处理细胞48 h，运用HE染色观察细胞形态学变化，流式细胞术检测细胞周期分布，原位细胞凋亡检测试剂盒（TUNEL）检测细胞凋亡率，采用Western blot检测NF-κB信号通路相关蛋白磷酸化水平。结果 在 10、20、40、80 及 160 μmol/L 浓度范围内，Dp 能抑制 MDA-MB-453 和 BT-474 的增殖，IC50分别为 41.02 和 60.97 μmol/L；20、40及80 μmol/L浓度范围内，与Control组相比，Dp处理组部分细胞脱落漂浮，裂解，细胞体积减小，G2/M期细胞比例增加，细胞凋亡率增加；与Control组相比，40及80 μmol/L Dp处理组胞内p-NF-κB/p65、p-IκBα、pIKKα/β、p-PKCα表达水平显著降低，IκBα、IKKα、IKKβ、PKCα表达水平增加（P＜0.05）。结论 Dp通过阻断NF-κB信号通路，诱导MDA-MB-453、BT-474细胞G2/M期周期阻滞和凋亡，从而抑制乳腺癌增殖。     

飞燕草素对光诱导小鼠视网膜感光细胞661W铁过载的调控作用

目的　探究飞燕草素（Delphinidin）对光诱导661W细胞铁过载的调控作用及机制。方法　将小鼠视网膜感光细胞661W分为Control组、Light组、Light+铁螯合剂（DFP）组、Light + Delphinidin组、Control + Delphinidin组。以（2000±200）lx白色荧光持续照射661W细胞48 h建立光损伤模型,采用CCK-8法筛选Delphinidin和DFP的最佳作用浓度。利用CCK-8法测定各组细胞活力,Hoechst-PI荧光观察各组细胞的细胞膜受损程度,流式细胞仪检测各组细胞铁含量及脂质过氧化物水平,Western blot检测各组细胞铁代谢相关蛋白表达水平。结果　CCK-8法检测结果显示,5 μmol·L^-1 Delphinidin和20 μmol·L^-1 DFP为最佳作用浓度。与Control组相比,Light组661W细胞损伤严重,细胞活力下降为（56.69±1.48）%,铁含量增加,脂质过氧化物水平升高,差异均有统计学意义（均为P<0.05）;与Light组相比,Light + DFP组和Light + Delphinidin组661W细胞损伤减轻,细胞活力分别升高为（62.85±0.46）%和（63.41±0.68）%,铁含量减少,脂质过氧化物水平降低,差异均有统计学意义（均为P<0.05）。Western blot检测结果显示,与Control组相比,Light组细胞二价金属离子转运体1（DMT1）、转铁蛋白受体1（TfR1）、铁蛋白轻链（FTL）、铁蛋白重链1（FTH1）表达水平均升高,膜铁转运蛋白（Fpn）表达水平降低,差异均有统计学意义（均为P<0.05）;与Light组相比,Light + DFP组和Light + Delphinidin组细胞TfR1、Fpn蛋白表达水平均升高,DMT1、FTL和FTH1蛋白表达水平均降低,差异均有统计学意义（均为P<0.05）。结论　Delphinidin可通过调节铁代谢相关蛋白表达,缓解光诱导的661W细胞铁过载,进而抑制脂质过氧化反应,减少视网膜氧化损伤。     

自噬在视网膜光损伤中的作用研究进展

细胞自噬是一种由基因调控的细胞内溶酶体降解途径。自噬几乎存在于所有哺乳动物细胞中,对细胞的生存具有双刃剑作用。一方面,自噬有助于维持细胞内环境稳定;另一方面,过度自噬也可能导致细胞自噬性死亡。本文就视网膜光损伤中细胞自噬作用的相关进展作一综述。     

视网膜损伤中细胞焦亡研究进展

细胞焦亡（pyroptosis）是特异性依赖于Caspase-1和/或Caspase-4/5/11活化的致炎性、程序性细胞死亡的一种方式，主要有经典炎性小体（inflammasome）途径和非经典炎性小体途径介导，常发生于感染性疾病、神经系统疾病和自身免疫性疾病。视网膜损伤病变中主要是经典炎性小体途径参与，而抑制炎性小体和下游分子能够减轻视网膜损伤，因此焦亡成为视网膜损伤相关疾病干预的潜在靶点。（国际眼科纵览， 2018,  42:  115-118）     

飞燕草素对光诱导的视网膜氧化损伤的保护作用

目的：探讨飞燕草素(Dp)防护光诱导的视网膜氧化应激损伤的机制。

方法：将661W感光细胞经2 000Lx光照(48h)和/或不同浓度Dp(5、10、20μmol/L,24h)处理,分别测定细胞活性和乳酸脱氢酶(LDH)活力、硫代巴比妥酸活性物质(TBARS)含量及抗氧化酶系[超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、谷胱甘肽巯基转移酶(GST)]活性。将健康SD大鼠经3 000Lx光照(24h)和/或Dp\〖100mg/(kg·d),灌胃4wk\〗处理后,观察视网膜的组织结构和氧化应激指标(SOD、GSH-Px、GST)变化。

结果：细胞实验结果表明,光照后细胞活性显著降低,细胞LDH活力和TBARS含量升高,抗氧化酶系活性下降,而Dp处理能提高光照后细胞的活力,降低细胞LDH活力和TBARS含量,提高抗氧化酶系活性。动物实验结果表明,Dp可保护大鼠视网膜结构的完整性,降低视网膜组织中TBARS含量,升高SOD、GSH-Px、GST活性。

结论：Dp可能通过调控氧化-抗氧化系统有效防护光化学因素导致的视网膜损伤。     

脂质异常家兔抗氧化能力与血管细胞黏附因子-1的变化以及血脂康对其影响

目的：观察脂质异常家兔抗氧化能力及血管细胞黏附因子-1（VCAM-1）的变化以及血脂康的干预。方法：采用高脂饲料喂养法复制血脂异常家兔模型,检测各组家兔血清胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL—C）、丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）水平,并用酶联免疫吸附（ELISA）法测定家兔血清VCAM-1的含量。结果：高脂血症组家兔血清TC、TG、LDL—C、MDA、VCAM-1水平升高,SOD水平降低,与之相比,血脂康组家兔血清TC、TG、LDL—C、MDA水平降低（P〈0．05）,家兔血清中VCAM-1的含量降低（P〈0．01）,SOD水平明显升高（P〈0．05）。结论：脂质异常可致家兔抗氧化能力降低,引起脂质过氧化,损伤内皮细胞,导致VCAM-1含量升高。血脂康可改善脂质异常家兔血清抗氧化能力、清除自由基、抗脂质过氧化损伤并下调VCAM-1的表达,提示其具有保护内皮细胞功能的作用。