表达LTB乳酸杆菌提高艰难梭菌类毒素疫苗黏膜免疫效应的研究

目的 通过构建大肠埃希菌热敏性肠毒素B亚单位 (heat labile enterotoxin B subunit, LTB) 乳酸杆菌表达载体,研究其对艰难梭菌类毒素疫苗的黏膜免疫保护效应。方法 克隆LTB基因,制备pSIP411-LTB重组质粒,电转化到乳酸杆菌中,制备乳酸杆菌表达LTB载体;通过透析和层析等技术纯化艰难梭菌A毒素和B毒素,经甲醛处理获得的艰难梭菌A毒素和B毒素的类毒素作为疫苗候选抗原;在第0 d、第14 d和第28 d皮下接种小鼠艰难梭菌类毒素和口服乳酸杆菌表达LTB载体;在初次接种后第0 d、10 d、24 d和38 d检测抗A毒素和B毒素的血清IgG和粪便IgA;第34 d,小鼠经口感染艰难梭菌,观察疫苗保护效果。结果 成功构建了LTB乳酸杆菌佐剂表达载体和制备了艰难梭菌A毒素和B毒素的内毒素;各疫苗组和疫苗+LTB佐剂组小鼠在感染艰难梭菌后,均无腹泻、体重减轻和死亡现象,而对照组老鼠腹泻发病率为100%,死亡率42.86%,5 d体重下降0.83 g;在初次接种后的10 d、24 d和38 d,与空白组比较,各疫苗组抗A毒素或B毒素的血清IgG及粪便IgA显著升高(F=284.93,1 037.05,696.82,74,184.07,166.95,P<0.01);与疫苗组比较,接种疫苗+LTB佐剂组的血清IgG及粪便IgA显著升高(F=21.88,27.22,8.31,56.49,63.76,101.78,P<0.05)。结论 艰难梭菌A毒素和B毒素的类毒素作为疫苗的候选抗原对艰难梭菌的感染具有很好的保护效应,LTB乳酸杆菌载体表达佐剂能够提高免疫动物的抗体效价,增强黏膜免疫效应。     

lncRNA相关因子对食管癌细胞增殖和侵袭的影响

目的研究lncRNA相关因子在食管癌细胞中对其增殖和侵袭生物学行为的调控,为食管癌的诊断和治疗提供依据。方法收集食管癌组织和癌旁组织样品各46份,分别提取RNA,采用RT-PCR检测MEG 3和linc02471,分析两者在食管癌组织和癌旁组织中表达的差异性。分别建立空载组和过表达组并进行细胞增殖试验,设计siRNA对MEG 3和linc02471进行抑制试验。采用Transwell小室对食管癌细胞中过载组、抑制组和空白组进行增殖活性和侵袭活性检测。结果 MEG 3和linc02471食道癌组织的相对表达量为(0.41±0.02)和(0.49±0.03),MEG 3和linc02471癌旁组织的相对表达量为(1.31±0.12)和(1.27±0.14)。MEG 3和linc02471在食道癌组织的表达水平低于对应的癌旁组织。抑制组MEG 3和linc02471相对表达量为(0.61±0.04)和(0.57±0.03),空白组MEG 3和linc02471相对表达量为(1.02±0.09)和(0.96±0.09),抑制组MEG 3和linc02471表达水平低于空白组。对基于MEG 3和linc02471设计的siRNA能抑制MEG 3和linc02471表达。MEG 3和linc02471的低表达时,食道癌细胞增殖活性上升。增殖活性和侵袭活性试验显示,MEG 3和linc02471过表达组食管癌细胞侵袭活性降低至原有活性的0.6~0.8倍,抑制组食管癌细胞侵袭活性提升至原有活性的1.5~2倍。结论 MEG 3和linc02471的过表达能够抑制食管癌细胞,可为肿瘤的诊断和治疗提供依据。     

婴幼儿急性咽后壁脓肿的诊治体会

目的：总结急性咽后壁脓肿的诊治体会。方法：回顾分析26例婴幼儿急性咽后壁脓肿的诊断及治疗经过。结果：26例均痊愈出院。结论：婴幼儿急性咽后壁脓肿影像学诊断有助于提高诊断准确率,全麻气管插管下脓肿切开引流及术后脓肿扩张术是最直接有效的治疗手段。     

重症监护病房产ESBLs和AmpC酶的大肠埃希菌耐药性分析

目的了解我院重症监护病房患者中大肠埃希菌产AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）的耐药性特征：方法采用纸片扩散确证法检测ESBLs,酶提取物三维试验方法检测AmpC酶。结果226株大肠埃希菌中检出单产ESBLs131株,AmpC酶24株,同时产AmpC酶和ESBLs共9株,检出率分别为58．0％、10．6％和4．0％。产酶大肠埃希菌对抗生素的耐药率大部分均高于不产酶菌株;结论重症监护病房产AmpC酶和ESBLs的大肠埃希菌日益增多且呈多重耐药,临床经验用药应首选碳青霉烯类抗生素.     

速效伤风口服液的薄层色谱—紫外分光光度测定法

速效伤风口服液为糖浆剂,内含扑热息痛、咖啡因、扑尔敏三种主药。其含量测定,扑热息痛多采用重氮化法;咖啡因用碘量法(江西省药品标准,1986年版),操作繁杂,误差大。我所曾用 HPLC 法测定胶囊。本文为     

原发性肾病综合征患者血栓前状态的研究

目的探讨原发性肾病综合征患者血栓前状态指标：血浆血管性血友病因子（vWF）、D二聚体、纤维蛋白原、抗凝血酶水平的变化及其临床意义。方法用法国产STA-R全自动血凝检测仪检测原发性肾病综合征组和正常对照组血浆vWF、D二聚体、纤维蛋白原、抗凝血酶水平。结果原发性肾病综合征患者血浆vwF、D-二聚体、纤维蛋白原水平显著高于对照组（P〈0．01），而抗凝血酶Ⅲ水平低于对照组（P〈0．05）。结论血浆vWF、D二聚体、纤维蛋白原水平升高与原发性肾病综合征患者血液高凝状态及血栓形成有一定关系。     

灯盏花素与反义凝血酶受体寡核苷酸对凝血酶诱导的大鼠主动脉平滑肌细胞增殖的影响

目的:研究灯盏花素与反义凝血酶受体寡核苷酸(thrombin receptor oligo-deoxy-nucleotides,TR ODNs)对凝血酶(thrombin,IIα)诱导的SD大鼠主动脉平滑肌细胞增殖的影响及其作用机制。方法:选用贴块法培养的第4~6代SD大鼠主动脉中层平滑肌细胞,分别给予反义TR ODNs和不同浓度的灯盏花素(0.5、5.0和50.0μg/ml)处理后,采用3H-TdR掺入法观察灯盏花素和反义TR ODNs对凝血酶(10 U/ml)诱导的大鼠主动脉平滑肌细胞增殖的影响效应;通过RT-PCR检测凝血酶受体基因表达强度来观察灯盏花素和反义TR ODNs从凝血酶受体基因水平对大鼠主动脉平滑肌细胞凝血酶受体DNA转录的影响。结果:与对照组相比,灯盏花素和反义TR ODNs抑制了凝血酶诱导的大鼠主动脉平滑肌细胞的增殖,且两者对平滑肌细胞增殖的抑制效应没有明显差异。灯盏花素和反义TR ODNs显著抑制了大鼠主动脉平滑肌细胞凝血酶受体mRNA的表达,且两者对大鼠主动脉平滑肌细胞凝血酶受体基因阻断作用无明显差别。结论:灯盏花素和反义TR ODNs显著抑制了凝血酶诱导的大鼠主动脉平滑肌细胞增殖。其作用机制可能为阻断了大鼠主动脉平滑肌细胞凝血酶受体基因的表达。     

自身抗体检测对系统性红斑狼疮的诊断价值分析

系统性红斑狼疮（SLE）的发病是多种免疫系统功能异常的结果,患者体内会出现T细胞功能异常、B细胞高度活化、NK细胞活性降低等病理改变,进而可引起多种自身抗体的产生和免疫复合物的沉积,最终引发SLE相关组织损伤的出现,因此,有关细胞免疫和体液免疫失衡的课题始终是SLE相关研究领域的焦点问题。本研究针对自身抗体检测对SLE的诊断价值进行了观察和分析,现将研究的具体情况报告如下。