抗菌药物不良反应的回顾性研究以及其影响因素的Logistic分析

【】目的：分析抗菌药物不良反应(adverse drug reaction, ADR)发生的因素,促进用药安全。方法：采用SPSS软件, 利用多分类logistic回归对589份抗菌药物不良反应可能存在的因素进行深度分析。结果：头孢类抗菌药物的不良反应最多；抗菌药物不良反应与患者的年龄、性别、用药天数、剂量、过敏史、合并用药等因素存在一定的相关性。结论：临床应重视抗菌药物的合理使用, 加强用药监测, 以预防和减少ADR 的发生。     

人PTP1B基因cDNA全长的克隆和原核系统表达

目的构建人蛋白酪氨酸磷酸酶1B(PTP1B)基因cD-NA全长的原核表达质粒(pET-28a(+)-hPTP1B)并在大肠杆菌中高效表达。方法取2型糖尿病人(BMI>28kg.m-2)的淋巴细胞提取总RNA,RT-PCR后的扩增产物回收构建克隆载体pMD-hPTP1B,测序后设计带酶切位点BamHⅠ和EcoRⅠ的引物,PCR后酶切连入pET-28a(+)中,转化DE3,IPTG诱导表达,SDS-PAGE后用Westernblot检测其特异表达,并进一步对rhPTP1B诱导表达时IPTG的浓度、时间和温度等条件进行了优化。结果测序证实所得的hPTP1BcDNA序列与其在GenBank中的序列一致,重组质粒pET-28a(+)-hPTP1B的双酶切结果与预期大小完全一致,IPTG诱导后高效表达的蛋白质是其不溶性的包涵体形式。IPTG诱导的最佳浓度是0.05mmol.L-1,时间为5h,温度为37℃。结论成功克隆了人PTP1B基因,构建了相应的原核表达载体并对原核体系诱导表达的条件进行了优化,使其能在DE3中高效表达,为筛选高特异的小分子抑制剂和制备相应的单克隆抗体打下坚实的基础。     

咪康唑莫米松成膜凝胶的制备及其质量控制

目的制备咪康唑莫米松皮肤成膜凝胶并建立其质量控制方法。方法选用泊洛沙姆407和泊洛沙姆188为混合基质,冷溶法制备咪康唑莫米松皮肤成膜凝胶,用高效液相色谱法测定咪康唑莫米松含量。结果所制凝胶室温下为液体,涂布皮肤即变为成膜凝胶。咪康唑、莫米松的进样质量浓度分别为10.0～800μg/mL和1.0～80.0μg/mL时与各自峰面积积分值呈良好线性关系,r值分别为0.998 9(n=6)和0.998 1(n=6),咪康唑与莫米松的平均回收率和RSD分别为98.58%,1.46%和97.99%,2.8%(n=6),符合含量测定要求。结论该制剂处方合理,制备工艺简便、质量可控,是一种较为理想的皮肤成膜凝胶。     

咪康唑莫米松皮肤成膜凝胶皮肤用药安全性试验

目的对咪康唑莫米松皮肤成膜凝胶进行皮肤刺激性试验和过敏性试验,为,临床用药安全提供依据。方法采用家兔进行皮肤刺激试验,分为完整皮肤组和破损皮肤组,连续给药7d后观察;采用豚鼠皮肤进行主动过敏性试验（ACA）,观察咪康唑莫米松皮肤成膜凝胶是否引起豚鼠皮肤或全身过敏反应。结果家兔皮肤刺激性试验,完整皮肤组和破损皮肤组均未出现红斑、水肿等现象;豚鼠皮肤主动过敏性试验,未引起皮肤过敏反应或全身过敏反应。结论咪康唑莫米松皮肤成膜凝胶未引起家兔皮肤刺激性反应和豚鼠皮肤过敏性反应,其临床用药剂量安全可靠。     

重组人 PTP1B 的原核高效表达及TFLC的体外抑制剂实验

 目的 高效诱导表达并纯化具有活性的重组 PTP1B 融合蛋白（rhPTP1B）,进行酶活性及抑制剂的实验。方法 重组体 pGEX-hPTP1B 转化 E.coliDH5α,诱导表达 rhPTP1B 并优化条件后,超声取细胞裂解上清液经 GST 亲和层析柱纯化后,利用 rhPTP1B 水解特异性底物 4-硝基苯基磷酸二钠盐（pNPP-Na2）的磷酸基团而产生颜色反应来测定 rhPTP1B 活性,并分析其与 rhPTP1B 浓度、底物浓度及反应温度的关系,钒酸钠（Na3VO4）抑制类型的研究,老鹰茶总黄酮（TFLC）对 rhPTP1B 的抑制性作用和浓度依赖关系。 结果 rhPTP1B 表达的最适条件是在 34 ℃ 和 2.0 mmol/L IPTG 下诱导表达 10 h,可被 GST 亲和层析法分离纯化;其活性随酶浓度及底物浓度的增加而增加,35 ℃ 时 rhPTP1B 的活性最大;钒酸钠的作用机制可能为非竞争性抑制作用;TFLC 对 rhPTP1B 有明显的抑制作用。结论 诱导表达纯化的 rhPTP1B 融合蛋白可用于抑制剂的研究,TFLC 对 rhPTP1B 的强抑制作用可能是其降低糖尿病大鼠血糖浓度的机制之一。     

咪康唑莫米松皮肤成膜凝胶的稳定性研究

目的制备咪康唑莫米松皮肤成膜凝胶并进行稳定性研究。方法选择泊洛沙姆407和泊洛沙姆188为混合基质,以冷溶法制备咪康唑莫米松皮肤成膜凝胶,采用高效液相色谱-二极管阵列检测器(HPLC-DAD)法测定咪康唑及莫米松的含量,并作光照、高温、室温留样的稳定性考察。结果所制凝胶室温下为液体,涂布皮肤即为成膜凝胶。含量测定时,咪康唑与莫米松色谱峰可有效分离,检测质量浓度的线性范围分别为10.0～800.0μg/mL(r=0.998 9,n=6)和1.00～80.0μg/mL(r=0.998 1,n=6),平均回收率分别为98.71%和97.51%,RSD分别为1.41%和2.02%(n=6),2种有效成分对光不稳定。结论该制剂工艺简单、质量可控,宜避光包装、保存。     

抗菌药物不良反应的回顾性分析

对本院2008~2014年的589份抗菌药物不良反应病例的患者年龄、性别、用药天数、剂量、过敏史、合并用药等因素进行回顾性分析,以加强用药监测。     

心血管内科患者药物不良反应因素筛选及Logistic分析

目的：系统分析研究心血管内科住院患者药品不良反应（ADR）发生的相关因素。方法：将2014~2016年收集的276例ADR病例按照累及的系统和涉及的药物种类进行分类分析，同时将2014~2016年入科的2 538例病例按照单因素分析，有意义的因素再纳入多因素Logistic回归分析。结果：ADR累及系统分类中以涉及心血管系统的损害居多，而涉及的药物主要以降压类药物以及抗血小板抗凝类药物为主。经多因素Logistic回归分析，年龄>65岁，住院时间>14d，使用药物>8种，诊断>4个，使用抗血小板及抗凝类药物具有明显的临床意义。结论：对于普遍使用的降压类药物以及抗血小板及抗凝类药物的患者，如果又伴发其他高危因素应采取预防措施降低ADR的发生率。     

人PTP1B真核载体在COS-7细胞中的表达及其体外抑制剂实验

目的构建人蛋白酪氨酸磷酸酶1B（PTP1B）真核表达载体pcDNA3.1-hPTP1B并在猴肾成纤维细胞COS-7中稳定表达,分离纯化表达的重组融合蛋白,进行酶活性测定及抑制剂的初步实验。方法应用RT-PCR从2型糖尿病患者的外周血总RNA中扩增出PTP1BcDNA全长序列,并在基因上下游分别引入BamHⅠ、EcoRⅠ两个酶切位点,酶切后定向导入pcDNA3.1/Hismyc-B多克隆位点,构建真核表达载体pcDNA3.1-hPTP1B,转染COS-7细胞,G-418筛选2周后取细胞裂解上清液经Ni2＋亲和层析柱纯化后,测定了其酶活性及小分子抑制剂钒酸钠的IC50。结果从2型糖尿病患者外周血中扩增得到1301bpPTP1BcDNA全长序列,经双酶切鉴定及测序分析,表明hPTP1B已克隆到pcD-NA3.1/Hismyc-B中。RT-PCR和免疫印迹表明转染成功。酶活性实验初步显示rhPTP1B的活性随酶浓度增加而增加,随PTP1B的特异性抑制剂钒酸钠的浓度增加而减少。结论获得具有酶活性的融合蛋白rhPTP1B,为进一步筛选其特异性抑制剂奠定基础。     

豹皮樟总黄酮降低2型糖尿病大鼠血糖的可能机制研究

目的探讨豹皮樟总黄酮降低2型糖尿病(T2DM)大鼠血糖的可能机制。方法 T2DM大鼠给予豹皮樟总黄酮(total flavonoids of litsea coreana,TFLC,400mg/kg)或阳性对照药二甲双胍(MET,400mg/kg)灌胃治疗6周。各组大鼠空腹血清作常规生化指标测定,肝脏作HE染色和透射电镜观察;肝匀浆作丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)分析;RT-PCR检测大鼠肝脏中蛋白酪氨酸磷酸酶1B(protein tyrosine phosphatase 1B,PTP1B)的表达。结果糖尿病大鼠经TFLC或MET治疗后葡萄糖耐量明显改善,空腹血糖(FBG)、糖化血红蛋白(HbA1c)、胰岛素(FINS)、游离脂肪酸(FFA)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)显著下降,高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)明显增加,肝匀浆MDA含量下降,SOD活性升高,2个治疗组的各指标之间差异无统计学意义。光镜下T2DM组肝脏有明显的脂肪变性,电镜下肝脏线粒体肿胀,内质网断裂,TFLC组和MET组均有不同程度的改善。T2DM组肝脏中PTP1B的表达明显升高,TFLC组PTP1B表达显著降低,MET组PTP1B的表达无明显改变。结论 TFLC可明显降低血糖和血脂,减轻肝脏组织的氧化应激,其改善胰岛素抵抗,可能与其降低T2DM大鼠肝脏中PTP1B的表达,增强胰岛素信号通路有关。