用BA-ELISA法测定载脂蛋白A-I

介绍一种高灵敏度的裁脂蛋白A-I(Apo A-I)的测定方法——生物素-亲和素酶联免疫吸附测定法(BA-ELISA)。本法的工作范围为0.25～4ng Apo A-I,灵敏度约0.1ngAp0 A-I,较已报道的放射免疫法(RIA)和ELISA高3～5倍以上。热处理或加入变性剂均不影响人血清Apo A-I的免疫测定结果。组内和组间变异系数分别为4.55和8.04。经本法测定77名正常成年人血清Apo A-I为1.34±0.23g/L((?)±SD),而且正常成年人血清ApoA-I浓度与高密度脂蛋白-胆固醇(HDL-C)的浓度呈高度相关(r=0.83,p<0.001)。     

单向火箭免疫电泳测定大鼠血清载脂蛋白AI浓度

单向火箭免疫电泳测定大鼠血清载脂蛋白AI(Apo AI)浓度,操作简单,定量准确。待测样品采用9M脲致变性使抗原决定簇暴露,减少了样品处理时间,得到较好的测定结果。用此法测得雄性和雌性SD大鼠血清Apo AI浓度分别为45.76±6.0mg/dl(n=10)、60.60±9.4mg/dl(n=10)。批内CV为4％,批间CV为7％。正常大鼠注射胰岛素,血清Apo AI浓度明显降低。     

载脂蛋白E多态性与心肌梗死的关系

研究载脂蛋白Ｅ多态性与心肌梗死（心梗）发病之间的关系。方法采用ＰＣＲ结合限制性片段长度多态性（ＰＣＲ－ＲＦＬＰ），检测４４例心梗幸存者及１９１例体检者的载脂蛋白Ｅ的基因型。结果心梗幸存者中携带ε４等位基因的百分数及Ｅ３／４基因型的百分数高于对照组（Ｐ＜０．０５）。女性患者的ε４等位基因频率及Ｅ３／４基因型高于同性别对照组（Ｐ＜０．０５），且高于男性患者；男性患者的基因型分布及等位基因频率与同性别对照组无统计学差异。结论载脂蛋白Ｅ基因多态性对心肌梗死的发病有影响，女性相关非常明显，男性可能因为有其他因素的作用，如高血压、吸烟、紧张等使相关性减弱。     

猪血小板中54KD钙结合蛋白的荧光研究

猪血小板中５４ＫＤ钙结合蛋白（Ｃａｌｃｉｕｍｂｉｎｄｉｎｇｐｒｏｔｅｉｎ，ＣａＢＰ）具有λ（ｍａｘ）为３３５ｎｍ的内源荧光发射光谱，钙离子和镁离子与之结合均不改变其λ（ｍａｘ）的波长，但能减弱其发时荧光的强度，在无镁离子存在的条件下，测定不同钙离子浓度下荧光强度的变化，计算出此蛋白质与钙离子的结合常数为３．２×１０－８ｍｏｌ／Ｌ，而在镁离子饱和条件下，与钙离子的结合常数为７．４×１０－６ｍｏｌ／Ｌ。乙醇亦不影响其荧光的λ（ｍａｘ），而对其荧光强度的影响依赖于蛋白质是否与钙离子结合。在未与钙离子结合的状态下，随着乙醇浓度的增加荧光强度也随之而增加：与钙离子结合后，在低浓度乙醇溶液中蛋白质荧光强度减小，乙醇浓度超过１６．６％后，荧光强度逐渐增加，在３５％的乙醇溶液中，５４ＫＤＣａＢＰ对钙离子不敏感。     

小肝素奈特罗的临床评价

小肝素奈特罗是一种低分子量(MW)肝素。平均MW为4500。与不降解的肝素(以下简称肝素)相比,其抗Xa/抗Ⅰa比值较大,半衰期较长,生物利用度较大。sc qd用于预防,sc bid用于治疗。在临床试验中,小肝素奈特罗在预防各种手术,包括矫形外科和腹腔手术的深静脉血栓形成,和保持成人或儿童血液透析时的体外循环畅通与肝素同     

利用生物素－亲合素酶联法研究大鼠肝细胞膜上HDL受体特性

用生物素－亲合素酶联法（ＢＡＥ）测定正常大鼠肝细胞表面ＨＤＬ受体的特性。实验结果表明，无载脂蛋白Ｅ高密度脂蛋白（ａｐｏＥＨＤＬ）与大鼠肝细胞具有高亲和力、高专一性结合，其平衡解离常数Ｋｄ＝５．５２ｍｇ／Ｌ，最大结合量Ｂ（ｍａｘ）＝１７３μｇ／ｇ细胞蛋白。本法灵敏度高、反应温和，不影响ＨＤＬ与其受体的结合能力。     

缺乏β-肾上腺素能受体的S_(49)淋巴细胞的分离与鉴定:受体数目与环化酶激活的关系

儿茶酚胺与许多动物细胞上的β-肾上腺素能受体作用能激活细胞膜上的腺苷环化酶。但是在某些实验中,最大激活环化酶所需的激素浓度明显地小于全部占领受体所需的浓度。因此就有人提出了“多余受体”的概念来解释这种现象。这就是说细胞具有大量的受体而只有一小部份是获得最大环化酶活力所必需的。为了证明这种概念是否正确,就必需有一种受体数量减少的细胞。如果这种细胞也存在受体占领和环化酶最大激活所需浓度差异的话,那么多余受体的概念就不能成立。     

人血清载脂蛋白A-I的分离、纯化及其测定

用超离心法制备人血清高密度脂蛋白(HDL);甲醇/氯仿脱脂;经Sephadex G-150层析及DEAE-纤维素(DE-52)离子交换得纯化载脂蛋白A-I(Apo A-I),免疫新西兰兔,获得效价为1:32的特异性抗人Apo A-I抗血清。用本室建立的单向火箭免疫电泳法测定了158名健康中年人与9名老人的血清Apo A—I含量,结果发现:β-脂蛋白<5g/L,总胆固醇<2mmol/L的人血清Apo A-I含量男女分别为2.06±0.16g/L和2.07±0.15g/L;而β脂蛋白≥5g/L,总胆固醇≥2mmol/L的人血清Apo A-I含量男女分别为1.75±0.15g/L和1.82±0.1g/L,由此可见,血脂正常的男性和女性的Apo A—I含量均显著高于血脂高的男性和女性。80岁以上老年人的血清Apo A-I含量为2.1±0.1g/L,也在正常范围。与文献报道比较,我国人的血清Apo A-I含量高于外国人,这与我国人HDL水平较外国人高一致。