磁感应加热和HSV—tk自杀基因及核素内照射联合治疗乳腺癌的实验研究

目的 观察纳米磁粒磁感应加热、单纯疱疹病毒-胸苷激酶（HSV-tk）基因及核素内照射联合治疗MCF-7乳腺癌的作用,探讨联合治疗的有效性与可行性.方法 制备转染试剂脂质体（Lipofectamine）/含热休克蛋白启动子的HSV-tk基因表达质粒（pHSP-HSV-tk）、四氧化三铁纳米磁流液、188Re-丙氧鸟苷白蛋白纳米微球（GCV-BSA-NP）;进行四氧化三铁纳米磁流液的体内加热实验;建立MCF-7乳腺癌模型,并用单纯随机抽样法将60只荷瘤鼠分成6组,每组10只.A组为空白对照组,B组为单纯基因转染治疗组,C组为单纯热疗组,D组为基因转染联合核素内照射治疗组,E组为基因转染联合热疗组,F组为基因、热疗、核素内照射联合治疗组.各组经不同方法处理后,观察肿瘤生长情况,测肿瘤质量,观察肿瘤组织病理变化;RT-PCR法检测B、D、E、F组HSV-tk基因表达（与内参β-actin mRNA吸光度比值）情况.各组与对照组比较采用泊松分布及单因素方差分析,所用统计软件为SPSS 10.0.结果 在动物体内加热实验中,交变磁场（AMF）作用下,不同注射剂量磁粒都引起肿瘤组织温度快速升高,2,4和6 mg磁粒分别使肿瘤温度升至39.6 ℃,43.2 ℃和48.1 ℃,且持续40 min.当AMF作用停止后,肿瘤组织温度10 min内分别降至36.8 ℃,37.5 ℃和37.8 ℃.成功建立MCF-7乳腺癌模型,治疗结果显示：C、D、E、F组肿瘤质量[（452.50±30.29）、（240.98±35.32）、（231.87±27.41）、（141.55±23.78）mg]较A组[（719.12±22.65）mg]差异有统计学意义（F=800.007,P＜0.01）,且以F组疗效最好;C组与E组肿瘤质量大于F组,差异有统计学意义（t=25.533,7.872,P均＜0.05）;D组较B组肿瘤质量明显减小,且差异有统计学意义（t=32.805,P＜0.05）.RT-PCR半定量分析显示：B、D组的表达量（0.33±1.30,0.46±0.12）与E、F组（0.66±0.13,0.74±0.11）相比差异有统计学意义（F=21.573,P＜0.05）.结论 热疗、基因治疗联合核素治疗能有效抑制MCF-7乳腺癌的生长,对乳腺癌治疗有潜在的应用前景.     

HSV-TK/GCV自杀基因系统治疗小鼠乳腺癌的研究

目的:探讨HSV-TK/GCV自杀基因系统对小鼠乳腺癌细胞系MA782/5S-8102形成肿瘤的体内杀伤作用及其产生的旁观者效应。方法:体内实验分动物致瘤组、抑瘤实验组和治疗实验组。分别按实验组别要求接种5.0×106细胞/只于BALB/C小鼠的右腋窝皮下,观察各组肿瘤形成及肿瘤治疗情况并统计各组生存期。治疗结束后将标本制成石蜡切片进行病理学分析,RT-PCR检测HSV-TK基因在肿瘤组织中的表达情况。统计学处理采用SPSS软件进行完全随机的方差分析(ANOVA)。结果:实验结果显示小鼠成瘤率为100％。丙氧鸟苷(ganciclovir,GCV)可明显抑制MA782/5S-8102/TK细胞在BALB/C小鼠体内的肿瘤形成。经GCV治疗后,MA782/5S-8102/TK组和混合细胞组的肿瘤体积分别较对照组肿瘤体积缩小约36.7％和28.6％(均P<0.001);生存期也明显延长(P<0.001);RT-PCR检测HSV-TK基因在肿瘤组织中有表达。实验组肿瘤组织与对照组相比存在明显的病理学改变。结论:逆转录病毒可介导HSV-TK基因转入小鼠乳腺癌细胞MA782/5S-8102并获稳定表达,HSV-TK/GCV自杀基因系统在体内对乳腺癌细胞有杀伤作用,且存在明显的旁观者效应。     

纳米锰锌铁氧体的生物相容性研究

目的：研究用于肿瘤磁流体热疗的自制纳米级Mn-Zn铁氧体(Mn0.5Zn0.5Fe2O4)的生物相容性。方法：溴化—3(4，5—二甲基噻唑基—2)—2，5—二苯基四唑(MTT)实验评价其体外细胞毒性；溶血试验评价其有无溶血作用：小鼠腹腔注射其无菌生理盐水混悬液以测定其LD50及最大耐受量(MTD)；微核试验评价其有无致畸、致突变作用等。结果：MTT显示该材料对L-929细胞毒性为0～1级；无溶血作用；昆明小鼠腹腔注射该材料混悬液1ml．在极限浓度时的LD50测不出，MTD值达到6g／ks；微核实验结果表明无致畸致突变作用。结论：该材料是一种具有良好生物相容性的材料，应用于肿瘤热疗具有广阔前景。     

大学英语写作教学探讨

1写作教学的重要性在四种语言技能中,说和写都是属于产出技能。而写作则是大学英语各门课中层次较高,地位比较重要的一门课。然而,受当前一些潮流的影响,许多学生想当然地认为只要会说英语,就能写英语。因而对写作的兴趣远远不如对阅读、听、说的兴趣。60%的学生觉得“学习英语最感困难”是英语听和说。教师在教学实践中,对写作的重视程度也比不上精读课文和听说训练。其实,英语写作从一个侧面体现了英语教学的本质。俄罗斯认知心理学家Vyostsky着重提到书写的语言是一种独立的语言功能,在结构和功能作用方式上不同于口头语言。社会语言学家Dell Hymes也指出说话和写作不是简单的可以互换的。二者发展的途径存在着明显的不同。比如,写是一种经过学习的行为,是一种人造的方式。说则不是。说是自然的。一般情况下,说之于写,说注重说话时的环境;写则必须提供自己的环境,也就是上下文。对于写来说,读者不在场;而对于说,则有听众在场。通常情况下,写产生一种可视的文字产品;说则不然。也许正因为这点,写比说更严格,更具有责任感。写要求作者在选词造句和联句成篇的过程中投入认真的思考,这无疑是一种积极的助学方式。写的过程是将思想变成文字的过程。写作使我们...     

核素标记叶酸偶联白蛋白纳米微球对人卵巢癌细胞生长的影响

目的观察核素标记叶酸靶向白蛋白纳米微球对人卵巢癌细胞生长的影响。方法将体外培养的SKOV3人卵巢癌细胞分为八组:阴性对照组(只加RPMI-1640培养液),单纯化疗组(叶酸偶联载药白蛋白磁性纳米微球,不加磁场),单纯放疗组[188铼(188 Re)标记的叶酸偶联白蛋白磁性纳米微球,不加磁场],单纯热疗组(叶酸偶联白蛋白磁性纳米微球,加磁场),化疗联合放疗组(188 Re标记的叶酸偶联载药白蛋白磁性纳米微球,不加磁场),化疗联合热疗组(叶酸偶联载药白蛋白磁性纳米微球,加磁场),放疗联合热疗组(188 Re标记的叶酸偶联白蛋白磁性纳米微球,加磁场)和热疗、化疗、放疗联合治疗组(联合治疗组,188 Re标记的叶酸偶联载药白蛋白磁性纳米微球,加磁场)。48h后MTT方法测定各组细胞增殖率,流式细胞术测定细胞凋亡率。结果阴性对照组对卵巢癌细胞增殖的抑制作用弱于其他各组,联合治疗组强于其他各组(P<0.05)。单纯热疗组、化疗联合放疗组、化疗联合热疗组、放疗联合热疗组和联合治疗组中细胞周期G1期前出现明显的亚二倍体凋亡峰;阴性对照组、单纯热疗组、化疗联合放疗组、化疗联合热疗组、放疗联合热疗组和联合治疗组的细胞凋亡率分别为0.08%、7.56%、17.14%、21.64%、33.94%和57.16%。结论磁感应热疗、化疗、核素靶向放疗的联合作用能有效抑制人卵巢癌细胞的生长。     

互补式亲和层析纯化制备兔源性抗人精子多克隆抗体标准品

目的:纯化制备兔源性抗人精子多克隆抗体标准品.方法:利用人精子抗原及其他组织蛋白等分别制备亲和层析柱,经正反相互补式亲和层析从兔抗血清中纯化IgG和IgA型抗人精子多克隆抗体,用SDS-PAGE、Western blot和ELISA等法检测其纯度、特异性和与精子抗原的线性反应.结果:所得抗体与牛血清白蛋白、正常人全血清、正常人组织细胞裂解液等在诊断试剂中常有的物质无可见交叉反应,在7.8120～0.488 2ng·ml-1或31.250～1.953ng·ml-1浓度范围内与精子抗原的酶联吸附试验呈直线反应.结论:该纯化方案可用于抗精子抗体定量检测中抗体标准品的制备.     

磁感应加热和HSV-tk自杀基因及核素内照射联合治疗乳腺癌的实验研究

Objective To investigate the antitumor therapeutic effect of combined therapy of magnetic induction heating by nano-magnetic particles, herpes simplex virus thymidine kinase gene(HSV-tk suicide gene) and internal radiation in mice bearing MCF-7 breast carcinoma. Methods The transfection reagents, plasmids heat shock protein-HSV-tk (pHSP-HSV-tk), ferroso-ferric oxide nano-magnetic fluid flow and 188Re-ganciclovir-bovine serum albumin-nanopaticles (GCV-BSA-NP) were prepared. The heating experiments in vivo were carried out using ferroso-ferric oxide nano-magnetic fluid flow. Sixty mice tumor models bearing MCF-7 breast carcinoma were established and randomly divided into six groups. Group A was the control group, B was gene transfection therapy group, C was hyperthermia group, D was gene transfection therapy combined with radionuclide brachytherapy group, E was gene therapy combined with hyperthermia group, and F was gene therapy, hyperthermia combined with radionuclide brachytherapy group. The tumor growth, tumor mass and histopathological changes were evaluated. The expression of HSV-tk in the groups of B, D, E and F was detected by RT-PCR. Poisson distribution and one-way analysis of variance (ANOVA) were used for statistical analysis by SPSS 10.0 software. Results In the animal heating experiments, the temperature of tumor increased up to 39.6 ℃, 43.2 ℃, and 48.1 ℃ quickly with different injected doses (2, 4 and 6 mg respectively) of nano-magnetic particles and maintained for 40 min. The temperature of tumor tissue reduced to 36.8 ℃, 37.5 ℃ and 37.8 ℃ in 10 min when alternating magnetic field (AMF) stopped. The tumor mass in Groups C ((452.50 ±30.29) mg), D ((240.98 ±35.32)mg), E((231.87 ±27.41) mg) and F ((141.55 ±23.78) mg) were much lower than that in Group A ((719.12±22.65) mg) (F=800.07, P＜0. 01), with the most significant treatment effect in Group F.The tumor mass in Group B((684.05 ±24.02) mg) was higher than that in Group D (t =32. 805, P ＜0. 05). Semi-quantitative RT-PCR analysis showed that the expression of HSV-tk in Groups B and D (0.33 ±0. 13 and 0. 46 ±0.12) was significantly different from that in Groups E and F (0.66 ±0.13 and 0.74 ±0. 11)(F = 21. 573, P ＜ 0.05). Conclusion Combined use of hyperthermia, gene therapy and radionuclide brachytherapy could effectively depress the growth of MCF-7 breast carcinoma, thus possessing treatment potential for this tumor.     

关于高等学校医学专业开设综合性、设计性实验课程的思考

探讨了高等学校医学专业开设综合性、设计性实验课程的关键要素,指出了实验课程对人才培养的重要性,主要对综合性、设计性实验课程的内涵与定位、实施步骤与关键环节、课程精髓进行了多方面的探讨。医学专业开设综合性、设计性实验课程,是进一步提高学生创新能力和综合素质的基本要求,同时也是医学教育改革面临的艰巨任务。     

HSV-TK/GCV自杀基因系统联合γ射线放射治疗宫颈癌的实验研究

目的 探讨HSV-TK／GCV自杀基因系统协同^60Coγ射线放射治疗对人宫颈癌细胞系的体内外联合杀伤作用，以及HSV-TK／GCV对放射治疗的增敏作用。方法 分别以HSV-TK／GCV、^60Coγ射线放射治疗及两者联合治疗人宫颈癌HeLa细胞系和裸鼠宫颈癌移植瘤模型，比较治疗效果；利用增敏效应比值（E／O）、克隆形成实验评价体内外HSV-TK／GCV对放射敏感性的影响。结果 在体外实验中，自杀基因对宫颈癌HeLa细胞生长的抑制率为45．8％，单纯放疗的抑制率为42．4％，而基因治疗与放疗联用的抑制率为87．5％，与前两者比较，差异有统计学意义（P〈0．01）；且联合治疗组对射线敏感性较单独治疗组明显增加，克隆形成率明显下降（P〈0．05）；在体内实验中，单纯基因治疗与放疗对HeLa细胞裸鼠皮下移植瘤生长的抑瘤率分别为39．5％和35．8％，而基因治疗放疗联用的抑瘤率达到87．9％，与前两者比较，差异均有统计学意义（P〈0．01）；增敏效应比值（E／O）为3．2（〉1．4），提示HSV-TK／GCV对放疗具有增敏作用。结论 HSV-TK／GCV自杀基因系统具有放射增敏作用，二者联合治疗可作为宫颈癌综合治疗的有效补充方法。