HO-1基因转染对骨髓间充质干细胞增殖、 表型及多向分化能力的影响

目的 探讨在体外培养条件下,慢病毒载体介导的血红素加氧酶-1(HO-1)基因转染对骨髓间充质干细胞(MSC)增殖、表型及多向分化能力的影响。方法 分离培养大鼠源性骨髓MSC,利用过表达HO-1重组慢病毒载体(lenti-HO-1)将HO-1基因转染到MSC中,用荧光倒置显微镜及Western blot法分析评估转染效率。利用1.5μg/ml的嘌呤霉素筛选稳定过表达HO-1的MSC(MSC-HO-1)。用Western blot法检测MSC与MSC-HO-1内HO-1蛋白表达情况,用细胞计数法绘制MSC与MSC-HO-1的生长曲线,流式细胞仪检测MSC与MSC-HO-1表型,成骨、成脂及成软骨细胞诱导分化检测多向分化潜能变化。结果 MOI=50的 Lenti-HO-1可高效转染MSC。与MSC比较,MSC-HO-1在经过多次传代后仍能高效过表达HO-1,差异有统计学意义(P<0.05)。MSC-HO-1的增殖生长趋势、表面标志表达及多向分化潜能均与未转染的MSC相似。结论 重组慢病毒载体Lenti-HO-1可成功转染MSC并高效表达转入的基因;HO-1基因修饰对MSC增殖活性、免疫表型及多向分化潜能无显著影响。     

微生物检验标本不合格原因分析及质量控制对策研究

目的：总结微生物检验中标本没有合格的原因及其质量控制的对策。方法：本次研究资料选取2013年6月－2014年6月期间在市第一人民医院检验科进行微生物检验的200例标本作为研究对象,对标本不达标的因素及质量控制措施进行分析。结果：研究结果发现,对200例标本进行检验后,标本不合格率是10.50％;导致其不合格的因素有标本受到污染、标本采集的时间错误、送检不够及时。结论：不断加强临床科室和检验科之间的沟通,对标本进行规范的采集、送检,使管理部门的具体职能得到充分的发挥,能够促进微生物检验标本的合格率,使检验结果更加可靠、真实。     

1480例血培养标本中病原菌分布及耐药谱型分析

目的:了解医院血培养中分离到的病原菌菌种分布及对常用抗菌药物的耐药性。方法:对我市一院近3年送检的1 480例血液标本采用全自动血培养仪进行检测,阳性血培养进行常规细菌鉴定,药敏试验采用KB法。结果:血培养阳性率为14.0%。其中革兰阳性球菌54.7%,革兰阴性杆菌35.7%,真菌6.7%。最常见的菌种为凝固酶阴性葡萄球菌、大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、肠球菌、肺炎克雷伯菌。革兰阳性球菌对万古霉素、米诺环素、利福平较为敏感,而革兰阴性杆菌对美洛培南、亚胺培南、阿米卡星的敏感性较高。真菌对5-氟胞嘧啶、两性霉素B、制霉菌素敏感性高。结论:血培养分离菌菌种分布广泛,且耐药菌株检出率相当高,因此加强血培养检测和合理应用抗菌药物显得尤为重要。     

49例结核病患者起始耐药状况分析

目的了解结核病患者起始耐药特征,为耐药结核病防治提供参考数据。方法对本院2006-2007年初治结核病患者痰标本采用改良罗氏培养基进行分枝杆菌分离培养,阳性菌株进行四种一线抗结核药（H、S、R、E）药物敏感试验。结果49例结核病患者初始耐药总耐药率为32.7%,耐1药者占62.5%,耐2药者占18.8%,耐3药者占6.3%,耐4药者占12.5%,耐利福平（R）和异烟肼（H）2药及以上患者的耐药率为10.2%。结论本区肺结核患者初绐耐药水平较高,应采取有效措施,减少耐药菌的产生和传播。     

大鼠 paralemmin-3基因重组慢病毒载体构建及其在肺泡巨噬细胞中的表达

目的 构建大鼠 paralemmin-3（PALM3）基因重组慢病毒载体,探讨转染大鼠肺泡巨噬细胞系 NR8383细胞的最佳感染复数（MOI）值及目的基因 PALM3的表达情况。方法 采用聚合酶链反应技术（PCR）扩增鼠 PALM3基因片段,并将其克隆到 pCV186-Cherry载体上;经 PCR及 DNA测序鉴定后,将重组质粒 pCV186-Cherry-PALM3、辅助包装质粒 pHelper 1.0与 pHelper 2.0共转染至 293T细胞进行重组慢病毒 lenti-CV186-Cherry-PALM3的包装,并用荧光标记法行滴度的测定。将不同 MOI值（0、1、10、20、50）的 lenti-CV186-Cherry-PALM3转染 NR8383细胞,依据转染效率得到最佳 MOI 值,以此 MOI 值感染 NR8383细胞,采用 Western blot 法检测目的基因的表达情况。结果 通过 PCR扩增获得了大小约 2 246 bp的目的基因片段,并成功连接到 pCV186-Cherry重组质粒上。PCR及 DNA测序结果证实重组质粒 pCV186-cherry-PALM3 携带正确的鼠 PALM3 基因并成功包装重组慢病毒颗粒。重组慢病毒 lentiCV186-Cherry-PALM3 的滴度测定为 3×108 TU/mL,感染 NR8383 的最佳 MOI 为 20,慢病毒 lenti-CV186-CherryPALM3 感染后 NR8383 细胞中 PALM3 的蛋白表达水平显著上调（P＜0.05）。结论 本实验成功构建了含大鼠PALM3基因的重组慢病毒载体 lenti-CV186-Cherry-PALM3,并能在 NR8383细胞中高效表达,为进一步研究 PALM3对肺泡巨噬细胞极化的影响奠定了基础。     

巨噬细胞极化及极化调控的研究进展

巨噬细胞是固有系统的单核吞噬细胞的亚群,具有高度可塑性和异质性,并且可以响应微环境信号进行表型/功能动态转换,包括具有不同功能的2个主要巨噬细胞亚群,即经典活化性巨噬细胞和选择活化性巨噬细胞。作者对巨噬细胞分型及其信号调控通路作一综述,探讨巨噬细胞转变为经典活化性巨噬细胞和选择活化性巨噬细胞的机制,以期为巨噬细胞相关性疾病的诊断和治疗提供新的策略。     

586例健康妇女HPV16、18型感染情况分析

目的了解健康妇女人乳头瘤病毒（HPV）16、18型感染情况。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）对586例健康女性体检中的宫颈分泌物HPV16、18DNA进行检测。结果586例妇女宫颈分泌物共检出阳性61例,总阳性率为10.41%。按不同年龄段进行分组比较,各年龄组阳性检出率经χ2检验差异有统计学意义（χ2=130,P＜0.01）。用χ2分割法进行两两比较,26～35岁与小于25岁两组间阳性检出率差异有统计学意义（χ2=7.11,P＜0.05）;26～35与36～45岁两组间差异有统计学意义（χ2=4.48,P＜0.05）;26～35与46～55岁两组间差异有统计学意义（χ2=11.32,P＜0.05）;其余各组两两比较差异均无统计学意义（P＞0.05）。26～35岁与其他3个年龄组相比差异有统计学意义（χ2=12.54,P＜0.05）,其阳性检出率为16.28%,高于其他各年龄段。结论性活跃期女性感染HPV风险增加,应加强HPV监测与筛查。