三七片DNA条形码分子鉴定及方法学考察

目的为研究DNA条形码技术在中成药鉴定中的应用,以三七片为研究对象,对方法的适用性、专属性与精密度进行考察。方法收集15批次市售三七片样品,考察三七片DNA提取条件,并对"中药材DNA条形码分子鉴定法指导原则"中PCR扩增、序列获得、结果判定等方法适用性进行确认;收集三七、人参、西洋参,制作三七片及其掺伪品,考察方法的专属性和重现性。结果三七片取样量100 mg,56℃水浴8 h所获得DNA的质量浓度平均值为60.7 ng/μL,PCR扩增、序列获得和结果判定均可获成功;三七、人参和西洋参的ITS2序列长度均为230bp,三七与人参、三七与西洋参的序列间均存在7个稳定的SNP位点,自制三七片和掺伪三七片均可成功获得ITS2序列,不同比例三七与人参、三七与西洋参的测序峰图在SNP位点处呈现相应峰高比的SNP套峰具备专属性;重复性、中间精密度和重现性考察符合《中国药典》2015年版(通则9101)相关要求。结论 ITS2序列作为DNA条形码能够稳定、准确鉴定三七片的原料药材,具备良好的专属性和精密度,三七片DNA条形码分子鉴定法将为保障三七片临床用药安全提供新的技术手段,并对《中国药典》其他收载单方制剂的鉴定提供参考。     

长白山地区艾叶的质量评价研究

目的对长白山脉四个产区的艾叶进行质量评价,科学开发利用艾叶资源。方法依据2015版《中国药典》艾叶项下方法分别进行了研究,主要包括粉末显微鉴别、薄层色谱法定性鉴别、气相色谱法含量测定等。结果长白山脉四个产区艾叶均符合药典规定要求。结论长白山脉四个产区艾叶均可药用,为扩大艾叶资源提供了实验依据。     

基于UPLC/Q-TOF MS/MS的稳心颗粒主要成分分析及鉴定

[目的]采用超高效液相色谱-四级杆-飞行时间质谱(UPLC/Q-TOF MS/MS)技术,对稳心颗粒中的化学成分进行初步分析。[方法]采用ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm),以乙腈-水(含体积比0.1%甲酸)为流动相梯度洗脱,流速为0.3 mL/min,电喷雾电离源,正/负离子双模式检测,通过UPLC/Q-TOF MS/MS所得到的化合物分子量以及MS/MS碰撞解离碎片,结合文献报道,对稳心颗粒的主要化学成分进行分析鉴定。[结果]结合文献报道和一级MS、二级MS/MS高分辨质谱数据,对其中68个化合物进行了初步鉴定,结果显示,稳心颗粒成分以糖类、皂苷类、黄酮类为主,其中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1丰度较高。[结论] UPLC/Q-TOF MS/MS技术是鉴定中药复方成分的有效手段,本研究首次利用该技术对稳心颗粒的主要成分进行定性分析,为阐明该复方药效物质基础、探讨其作用机制及其质量控制提供了有效的科学依据。     

子痫前期与子代先天性心脏病相关性的研究进展

子痫前期(preeclampsia,PE)是妊娠期特有的疾病,发生在妊娠20周后,主要临床表现为高血压、蛋白尿及全身器官功能损害,是孕产妇和围产儿病死率升高的主要原因之一[1],与PE相关的胎儿发育异常一直是医学研究的重要方向,例如心血管发育异常[2]。先天性心脏病(congenital heart disease,CHD)的发生率处于新生儿出生缺陷第一位[3],其在活产儿中发病率为6‰~12‰,其病因非常复杂。近年来,随着PE孕妇子代CHD发病率的升高.     

儿童血清维生素A、D、E水平与肺炎支原体肺炎相关性的临床研究

目的 研究儿童血清维生素A、D、E水平与肺炎支原体肺炎的相关性,为临床防治提供指导。方法 选取肺炎支原体肺炎住院治疗患儿415例为支原体肺炎组,儿保科非呼吸道感染儿童431例为对照组。分别检测两组儿童血清维生素A、D、E水平。结果 支原体肺炎组血清维生素A、D、E平均值均明显低于对照组(P<0.01);维生素A缺乏例数明显高于对照组(P<0.01),亚临床维生素A缺乏例数与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05);维生素D缺乏及不足例数均明显高于对照组(P<0.01);维生素E缺乏例数明显高于对照组(P<0.01)。结论 维生素A、D、E缺乏与肺炎支原体肺炎的发病相关,特别是缺乏维生素A,补充维生素A、D、E有可能对预防肺炎支原体肺炎反复发作有益,其具体机制有待于进一步探讨。     

腹腔积液中查见恶性黑色素瘤细胞1例

患者男,65岁。住院号：219906。因反复腹胀、乏力伴消瘦于2006年2月17日就诊。查体发现：腹水、胸水及右腋窝肿大淋巴结3枚,最大3cm×3cm,质韧,边界清,可活动,无压痛,胸廓无畸形。胸壁可见5cm×4cm大小黑色素斑块,上有突起小肿块,颜色较深。诊断为黑色素瘤恶变伴广泛转移。[第一段]     

中医药在抗肿瘤治疗中的研究近况

恶性肿瘤是继心脑血管疾病之后发病率和病死率均很高的疾病 ,严重威胁人类的健康。尽管采取了各种积极的治疗措施 ,但是由于临床上确诊的肿瘤 5 0 %以上已发生早期转移[1 ] ,因此各种治疗措施的最终结果大多失败。尤其是应用多种化疗药物进行化疗时 ,尽管可以起到一定的治疗作用 ,但是化疗药物的免疫抑制、骨髓抑制等严重毒、副作用是很难避免的。因此 ,手术、放疗、化疗等传统治疗方法未必能确实提高患者生存质量、延长患者的寿命。近几年 ,中医药学在抗肿瘤治疗方面研究的比较多 ,并且随着分子生物学的研究深入 ,已经开始在分子水平上对中…     

基于Wnt/β-catenin信号通路探讨"理气化湿方"对接种胃癌MGC-803细胞裸鼠肿瘤组织关键因子β-catenin、Wnt3a、Lgr5+表达的影响

目的:观察理气化湿方对皮下接种胃癌MGC-803细胞裸鼠肿瘤组织的干预作用及其对瘤体β-catenin、Wnt3a、Lgr5+基因和蛋白表达的影响.方法:将胃癌MGC-803细胞接种于健康雄性裸鼠腋下,成瘤后将裸鼠随机分为模型组、胃复春组(0.56?g/kg)和理气化湿方低、中、高剂量(3.9、7.8、15.6?g/kg)组,每组7只.各组分别灌胃给予相应药物或生理盐水,每日1次,共灌胃4周.灌胃结束后处死所有裸鼠,取肿瘤组织,切片、染色,显微镜下观察病理组织学改变.另一部分肿瘤组织应用RT-PCR法、Western?Blot法检测β-catenin、Wnt3a、Lgr5+基因和蛋白的表达情况.结果:模型组肿瘤组织细胞大小形态不一,核浆比例增大,核分裂明显,个别腺体呈共壁现象或囊状扩张;理气化湿方中、高剂量组肿瘤组织细胞形态较均匀,固有腺体排列整齐紧密,偶有淋巴细胞浸润,腺上皮和腺管分界清楚.与模型组比较,各给药组肿瘤组织β-catenin、Wnt3a、Lgr5+基因与蛋白表达水平均明显降低(P<0.05),其中理气化湿方中、高剂量组上述基因与蛋白表达水平明显低于胃复春组(P<0.05),而中、高剂量组组间比较差异无统计学意义(P>0.05).结论:理气化湿方可通过抑制β-catenin、Wnt3a、Lgr5+增殖,调控Wnt/β-catenin信号通路的异常活化,从而改善瘤体的病理状态、分化程度.     

泌尿生殖道分离大肠埃希菌的耐药性分析

泌尿系感染是最常见的感染性疾病之一,大肠埃希菌是引起泌尿系感染最常见的病原菌,我们就我院分离的80株大肠埃希菌进行了分析。一、材料和方法1.菌株来源收集2002年12月～2004年3月住院及门诊患者尿、非尿(痰、脓等)标本中分离出的大肠埃希菌。质控菌株大肠埃希菌(ATCC25922),购自杭州天和微生物试剂有限公司。2.细菌鉴定及药敏试验用阳光微生物鉴定分析系统(购自广东惠州阳光生物有限公司)。3.统计学方法用SPSS10.0软件包进行χ2检验。二、结果1.共分离出大肠埃希菌80株,来自男性患者11株,占13.75%;女性患者69株,占82.65%。住院患者27…