基于文献计量分析川芎有效成分药理作用研究

目的:从文献计量学的角度分析近10年川芎有效成分(川芎嗪、藁本内酯、阿魏酸)药理作用的研究状况。方法:采用文献计量学方法对2005—2015年CNKI和Pub Med数据库中收录的川芎嗪、藁本内酯、阿魏酸药理方面的文献进行分析,并分别应用书目共现分析系统软件(Bicomb 2.0)及社会网络分析软件(UCIENT 6.0)对文献资料进行多维分析和可视化处理。结果:共检出有效文献432篇,以川芎嗪的研究较多。川芎嗪文献频次超过4次的关键词20个,阿魏酸文献频次超过2次的关键词17个,对这些高频关键词进行共词分析,得到川芎嗪和阿魏酸的研究热点。结论:川芎嗪的研究主要集中在缺血再灌注损伤、细胞凋亡等领域,阿魏酸的药理作用研究以阿尔茨海默病、细胞凋亡、氧化应激等为主。     

山楂叶原花青素多聚体对人脐静脉内皮细胞钙活化的影响

目的:探讨山楂叶原花青素多聚体(PPC)对血管内皮细胞钙浓度的影响及其机理,以期阐明其血管活性的机制。方法:体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVECs)。以Fura-2标记细胞内钙离子,活细胞工作站连续测定细胞内钙离子浓度30 min。结果:12.5~50 mg/L PPC可以浓度依赖地升高HUVECs内钙离子浓度,其作用方式与经典血管内皮细胞钙激动剂ATP明显不同。其中25和50 mg/L的PPC效果与正常组比较,差异有统计学显著性(P0.01)。抑制胞内钙释放,对这一作用没有影响;而去除胞外钙离子、使用钠钙交换体抑制剂以及去除胞外钠离子,均可显著抑制,甚至取消PPC的作用。结论:PPC具有显著的血管内皮细胞钙活化作用,这可能是其调节血管内皮细胞功能的机制之一。这一作用可能是通过促进胞内钠内流,激活钠钙交换体的逆向转运,从而引起胞外钙内流而达到的。     

注射用米铂制剂配方与冻干工艺研究

目的 研究注射用米铂的配方及冻干生产工艺。方法 通过冻干溶剂的选择、原料溶解度试验、处方筛选、预冻工艺研究等确定注射用米铂配方和冻干工艺参数的控制范围。结果 确定冻干溶剂采用叔丁醇和环己烷的混合溶剂,环己烷最佳比例范围为10%~30%,药物浓度最佳范围为5~25 mg·mL^-1,确定冻干工艺采用阶段性预冻方式。结论 选定的配方和工艺可行,自研制剂与参比制剂质量等同,节约了工艺生产成本。     

基于网络药理学和分子对接技术探讨异功散治疗小儿厌食症的作用机制

目的 通过网络药理学和分子对接技术探讨异功散治疗小儿厌食症的主要成分及作用机制。方法 通过TCMSP数据库查找异功散中口服利用度和类药性符合要求的化合物,并通过PubChem、UniProt数据库获得其已知靶点。通过GeneCards、OMIM、NCBI Gene、DisGeNET、TTD数据库获得小儿厌食症相关靶点。将异功散和小儿厌食症靶点取交集,并构建蛋白质相互作用（PPI）网络。通过中心度值、紧密中心度值、节点连接度值进一步筛选出关键靶点。将关键靶点蛋白进行基因本体论（GO）功能和京都基因与基因组百科全书（KEGG）通路富集分析。采用PyMOL和AutoDock Vina软件将关键靶点和化合物进行分子对接。结果 异功散中共获得139个符合条件的化合物,相对应781个靶点,小儿厌食症共获得靶点2278个,二者交集为369个靶点。通过PPI网络构建得到66个关键靶点,关键靶点的GO功能注释和KEGG通路富集分析得出生长因子应答、转录调节、癌症通路和蛋白磷酸化通路等生化过程和信号通路与异功散治疗小儿厌食症具有相关性。分子对接结果表明山柰酚、槲皮素、柚皮素、戈米辛B、12-异戊烯酰基-2E,8E,10E-白术三醇与甘油醛-3-磷酸脱氢酶（GAPDH）、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶1（AKT1）、白蛋白（ALB）、P53核内磷酸化蛋白（TP53）、肿瘤坏死因子（TNF）、白细胞介素-6（IL-6）等靶点具有较好结合能力。结论 异功散通过调节丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）、核因子-κB（NF-κB）、生长因子、癌症、蛋白磷酸化等相关的信号通路来实现对胃肠道消化功能和肠道菌群的调节从而治疗小儿厌食症。     

经典名方“竹茹汤”的物质基准量值传递分析

为阐明竹茹汤物质基准的关键质量属性,制备18批物质基准对应实物,建立竹茹汤物质基准指纹图谱及其含量测定的检测方法,明确其指纹图谱共有峰的色谱峰归属,相似度范围,浸出物范围,指标性成分葛根素、甘草苷和甘草酸的含量以及转移率范围。结果表明,18批竹茹汤物质基准对应实物共标定25个共有峰,指纹图谱相似度均大于0.95。汇总特征峰信息可知,葛根、甘草、生姜分别贡献21、3、1个色谱峰;18批物质基准对应实物的浸出物18.45%~25.29%;不同批次物质基准对应实物的指标性成分含量和转移率:葛根素质量分数2.20%~3.07%,转移率38.5%~45.9%;甘草苷质量分数0.24%~0.85%,转移率15.9%~37.5%;甘草酸质量分数0.39%~1.87%,转移率16.2%~32.8%。该实验采用浸出物、指纹图谱及指标性成分含量测定相结合的模式,对经典名方竹茹汤物质基准的量值传递过程进行分析,初步建立了科学稳定的物质基准质量评价方法,为经典名方竹茹汤的后续开发及相关制剂的质量控制提供依据。     

犬冠状动脉平滑肌细胞培养及鉴定

目的:建立犬冠状动脉平滑肌细胞培养及鉴定的方法。方法:用胶原酶消化法体外培养犬冠状动脉平滑肌细胞。结果:分离犬冠状动脉后,用胶原酶消化法培养原代冠状动脉平滑肌细胞,8天后细胞细胞呈"峰-谷"状态,平滑肌细胞α-肌动蛋白免疫组织化学鉴定为平滑肌细胞,纯度为100%。结论:此方法操作简单、快速,得到细胞数量大、纯度高,是一种稳定的冠状动脉平滑肌细胞培养法。     

人脑断层透明标本的制作

神经组织是人体解剖学和断层解剖学教学的重点,近年随着脑血管病的发病率的上升,人们对大脑的结构越来越重视,传统的大脑断层标本因其灰质和白质的分辨     

急性间断缺氧对大鼠肺血管重建的影响

目的观察缺氧对大鼠肺血管结构重建的影响。方法建立急性缺氧动物模型并用图像分析仪分析缺氧大鼠肺动脉中不同类型肺动脉的形态学改变。结果急性缺氧大鼠肺动脉随缺氧时间的延长MA的数量逐渐减少、PMA和NMA的数量逐渐增多,MT(%)和MA(%)以及中膜细胞数随缺氧时间的延长逐渐增加。H3和H4组与常氧组比较P<0.01,有显著差异。结论急性缺氧使肺动脉发生了重建,重建的高峰发生在缺氧的第5天和第7天。     

不同脑微血管内皮细胞条件培养液抗缺血及再灌神经元损伤的比较

目的:通过乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)的检测,观察解毒通络药物干预后的脑微血管内皮细胞条件培养液(conditioned medium of cerebral microvascular endothelial cells,CMECs-CM)特征及其抗缺血及再灌皮质神经元损伤的效应,探讨脑微血管内皮细胞(cerebral microvascular endothelial cells,CMECs)调控神经元功能的机制。方法:通络救脑注射液(Tongluo Jiunao Injection,TLJNI)作用于正常、缺血和缺血再灌三种培养状态的大鼠CMECs,分别收集有药物干预及无干预的三对无血清内皮细胞条件培养液,并测定其LDH值。同步原代培养大鼠脑皮质神经元,亦分为正常、缺血、缺血再灌三组,用低(10%)、中(50%)、高(100%)三种浓度的各类CMECs-CM分别作用上述三种培养状态的神经元,测定其LDH漏出率。结果:比较TLJNI干预后的CMECs-CM与无干预的CMECs-CM中LDH漏出值,CMECs缺血组与缺血再灌组经药物干预后均明显降低(P<0.01)。对于缺血神经元,缺血内皮细胞条件培养液(conditioned medium of ischemic CMECs,Is-CM)高浓度(100%)和TLJNI干预后的缺血内皮细胞条件培养液(conditioned medium of ischemic CMECs with drug treatment,IsT-CM)高浓度(100%)作用后表现为增加LDH漏出率(P<0.01),而低浓度10%的IsT-CM则降低LDH漏出率(P<0.05);对于缺血再灌神经元,与对照组比较,各类CMECs-CM作用后均能降低神经元LDH漏出率(P<0.05或P<0.01)。比较每种条件液相邻浓度间的效应差异,均以10%或50%的CM降低损伤为佳,正常内皮细胞条件培养液(conditioned medium of normal CMECs,N-CM)及缺血再灌内皮细胞条件培养液(conditioned medium of ischemic/reperfusional CMECs,Rp-CM)组间差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);对于正常神经元,各类CMECs-CM作用后均增加了神经元LDH漏出率(P<0.05或P<0.01)。比较每种条件液相邻浓度间的效应差异,N-CM组间差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论:TLJNI能够防御CMECs缺血及缺血再灌的损伤,可以通过内皮细胞介导发挥抗缺血及缺血再灌神经元损伤的效应。提示CMECs-CM及TLJNI干预后的CMECs-CM均存在着抗缺血再灌神经元损伤的活性物质。