PFKFB3参与脂多糖诱导肺成纤维细胞及肺组织有氧糖酵解的观察性研究

目的:观察脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导肺成纤维细胞及肺组织有氧糖酵解关键酶6-磷酸果糖-2-激酶/果糖-2,6-二磷酸酶3(6-phosphofructo-2-kinase/fructose-2,6-biphosphatase 3,PFKFB3)表达及其与有氧糖酵解的关系,探讨在LPS诱导肺纤维化过程中肺成纤维细胞和肺组织有氧糖酵解的潜在机制。方法:将人胚肺成纤维细胞MRC-5细胞系采用随机数字表法分为PBS对照组(PBS组)和LPS组(每组3孔),Western blot检测LPS刺激细胞6h后PFKFB3表达情况,同时免疫荧光显示PFKFB3在细胞内的定位情况;于LPS刺激后48 h采用海马细胞能量代谢仪检测细胞耗氧率(oxygen consumption rate,OCR)和产酸率(extracellular acidification rate,ECAR),并采用比色法检测有氧糖酵解产物乳酸产生情况,同时Western blot检测LPS刺激48 h后Ⅰ型胶原蛋白合成情况。将24只C57BL/6小鼠按随机数字表法分为生理盐水对照组(C组)、LPS组(L组),每组12只,L组、C组连续5d分别腹腔注射5 mg/kg LPS、等容量生理盐水;每组各6只于造模后第7天无痛处死小鼠,取血浆和肺组织,Western blot和免疫荧光检测各组肺组织中PFKFB3表达情况,比色法检测各组小鼠血浆中乳酸的含量;剩余小鼠于造模后第28天取肺组织,一侧肺通过Western blot检测肺组织Ⅰ型胶原蛋白合成情况,另一侧肺做石蜡切片进行病理学检测。结果:与PBS组比较,LPS刺激细胞6h后PFKFB3表达明显升高(P<0.05);LPS刺激细胞48 h后,与PBS组比较,LPS组细胞耗氧率降低、产酸率增加,代谢产物乳酸含量明显升高(P<0.05),同时细胞Ⅰ型胶原蛋白合成显著增加(P<0.05)。与C组比较,L组小鼠腹腔注射LPS 7 d后肺组织中PFKFB3表达明显升高(P<0.05),血浆乳酸含量明显升高(P<0.05);LPS注射28 d后,L组小鼠Ⅰ型胶原蛋白表达明显升高(P<0.05),肺组织出现明显纤维化。结论:在LPS诱导的肺纤维化过程中,LPS可诱导肺成纤维细胞和肺组织中PFKFB3蛋白表达,该过程与其有氧糖酵解过程相关,PFKFB3的表达上调可能是LPS诱导肺成纤维细胞和肺组织有氧糖酵解和肺纤维化的关键环节。     

外科手术后早期低氧血症的临床分析

目的 探讨术后早期的低氧血症发生的高危因素,预防术后早期低氧血症的发生.方法 将2005年7月至2007年6月进入上海交通大学医学院附属仁济医院外科监护室于手术后24 h内发生低氧血症的患者作为病例组,按1:2比例随机抽取同时期进入外科监护室未发生低氧血症的手术患者作为对照组.分析病例组患者的手术类型以及引起术后早期低氧血症的直接原因.筛选出高危因素后在两组间进行单因素分析和Logistic多元回归分析.结果 病例组患者以接受胸部手术(33.78%)和上腹部手术(24.32%)为主.术后早期引起低氧血症的直接原因包括:肺部原发病加重(17.57%)、胸部手术并发症(24.32%)、围手术期处理不当(21.62%)、其他基础疾病(18.92%)等.单因素分析发现:大量吸烟史、术前合并肺部原发病、危重患者、合并胸部手术并发症、大量输液以及呼吸支持不足等因素与术后低氧血症密切相关.多因素分析结果表明,术前合并肺部原发病、危重患者、合并胸部手术并发症以及呼吸支持不足的患者术后低氧血症发生的风险显著增加(P<0.05).结论 术后早期低氧血症与大量吸烟、肺部及其他系统危重疾病、胸部手术并发症、输液过多以及呼吸支持不足等因素密切相关,必须采取相应措施防止术后早期低氧血症的发生.     

外科手术后早期低氧血症的临床分析

目的 探讨术后早期的低氧血症发生的高危因素,预防术后早期低氧血症的发生.方法 将2005年7月至2007年6月进入上海交通大学医学院附属仁济医院外科监护室于手术后24 h内发生低氧血症的患者作为病例组,按1:2比例随机抽取同时期进入外科监护室未发生低氧血症的手术患者作为对照组.分析病例组患者的手术类型以及引起术后早期低氧血症的直接原因.筛选出高危因素后在两组间进行单因素分析和Logistic多元回归分析.结果 病例组患者以接受胸部手术(33.78%)和上腹部手术(24.32%)为主.术后早期引起低氧血症的直接原因包括:肺部原发病加重(17.57%)、胸部手术并发症(24.32%)、围手术期处理不当(21.62%)、其他基础疾病(18.92%)等.单因素分析发现:大量吸烟史、术前合并肺部原发病、危重患者、合并胸部手术并发症、大量输液以及呼吸支持不足等因素与术后低氧血症密切相关.多因素分析结果表明,术前合并肺部原发病、危重患者、合并胸部手术并发症以及呼吸支持不足的患者术后低氧血症发生的风险显著增加(P<0.05).结论 术后早期低氧血症与大量吸烟、肺部及其他系统危重疾病、胸部手术并发症、输液过多以及呼吸支持不足等因素密切相关,必须采取相应措施防止术后早期低氧血症的发生.     

临床药师参与1例IPAF患者抗感染治疗及分析

摘要：临床药师参与1例具有自身免疫特征间质性肺炎患者的抗感染治疗,根据病原学检测结果,参考国内外抗微生物指南与循证医学证据,协助医师制定抗感染药物治疗方案,分别针对耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌（CRAB）与耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌（CRKP）调整治疗方案,最终患者肺部感染得到有效控制。     

乳酸-转化生长因子-β1途径促进肺成纤维细胞活化介导机械通气相关性肺纤维化的机制研究

目的探讨机械通气促进肺成纤维细胞活化及肺纤维化的机制,明确乳酸-转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)途径在该过程中的作用。方法①将C57BL/6小鼠采用随机数字表法分为假手术组(Sham组)和机械通气组(MV组),每组12只,其中Sham组仅行麻醉插管处理并保持自主呼吸,MV组采用20 ml/kg潮气量和70次/min通气频率行单次2 h机械通气,观察7 d后取材。采用H-E染色、Masson染色观察肺组织的损伤程度和纤维化程度,采用Western blot法检测肺组织Ⅰ型胶原蛋白α1链(collagen typeⅠalpha 1 chain,COL1A1)、α平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)和TGF-β1的蛋白表达情况,采用比色法检测小鼠肺泡灌洗液(bronchial alveolar lavage fluid,BALF)和血清的乳酸浓度。②将人胚肺成纤维细胞MRC-5采用随机数字表法分为4组(每组3个孔):PBS对照组(Con组)、1 mmol/L乳酸组(Lac1组)、10 mmol/L乳酸组(Lac_(10)组)和20 mmol/L乳酸组(Lac_(20)组),于乳酸刺激MRC-5细胞24 h后采用ELISA法检测细胞培养上清液中TGF-β1含量,同时采用细胞免疫荧光观察α-SMA的表达情况;于乳酸刺激MRC-5细胞72 h后采用Western blot法检测不同分组细胞COL1A1和α-SMA的表达情况,并通过ELISA法检测细胞培养上清液Ⅰ型前胶原羧基肽(procollagen type I carboxyl peptide,PICP)的含量变化。③另取MRC-5细胞采用随机数字表法分为3组(每组3个孔):PBS对照组(Con组)、20 mmol/L乳酸组(Lac_(20)组)和20 mmol/L乳酸+TGF-β1受体抑制剂(SB431542)组(Lac_(20)+SB组),处理24 h后采用Western blot法检测不同分组细胞COL1A1和α-SMA的表达情况。结果①与Sham组比较,MV组小鼠肺泡间隔增厚、胶原蛋白沉积、肺纤维化程度加重,伴有COL1A1、α-SMA和TGF-β1表达水平升高(P<0.05),血清和BALF乳酸浓度升高(P<0.05)。②与Con组比较,Lac_(10)组和Lac_(20)组细胞培养上清液中TGF-β1、PICP含量升高(P<0.05),细胞中COL1A1和α-SMA表达水平升高(P<0.05),免疫荧光观察到α-SMA在细胞内表达增多(P>0.05)。③与Lac_(20)组比较,Lac_(20)+SB组细胞COL1A1和α-SMA表达水平降低(P<0.05)。结论机械通气可以通过乳酸-TGF-β1途径活化肺成纤维细胞,引起胶原蛋白分泌,促进机械通气相关性肺纤维化进程。     

右旋美托嘧啶在术后谵妄防治中的应用

谵妄(delirium)是一种急性器质性脑综合征,是重症监护病房(ICU)中最常见的一种意识障碍征候群.通常发生在手术后最初3～5 d内,多在原发病的基础上出现术后认知功能障碍,表现为麻醉手术后记忆力、抽象思维、定向力障碍,同时伴有社会活动能力减退,并伴有觉醒-睡眠周期紊乱和精神运动行为障碍.综合性医院的老年患者中约15%～53%在术后发生谵妄.而ICU中老年患者谵妄发生率高达70%～87%.谵妄的发生经常诱发一系列级联事件:患者会在意识不清状态下不经意拔除各类导管或引流管导致意外事件发生、引起呼吸支持时间、住院和/或入住ICU时间延长,医疗费用增加.因此及时识别和治疗术后谵妄对于降低术后并发症发生率,改善患者(尤其是危重或老年患者)预后,降低医疗费用具有重要意义.     

整合素和转化生长因子β受体在瘢痕组织中表达相关性的定量研究

目的了解整合素与TGF-β受体在增生性瘢痕形成过程中的相互关系.方法采用荧光定量PCR法,分别测定经原代细胞培养后,瘢痕成纤维细胞中整合素α1、β1与TGF-βR mRNA的表达量,并对两者间的表达强度进行相关分析.结果整合素α1和β1与TGF-βRⅠ间在表达的强度上,均成正相关的关系(r=0.74、0.68,P＜0.05).结论整合素和TGF-β受体在瘢痕形成的过程中,可能存在着相互协同和促进的作用.     

瘢痕成纤维细胞中TGF-β受体与整合素相互作用的实验研究

目的:了解TGF-β受体和整合素在瘢痕增生和挛缩过程中的作用.方法:通过荧光定量PCR法(FQ-PCR)测定经TGF-β受体、整合素和粘着斑激酶(FAK)抗体阻断后培养的瘢痕成纤维细胞TGF-β受体以及整合素表达量的变化.结果:经不同抗体阻断后培养的瘢痕成纤维细胞其TGF-β RI和整合素β 1的基因拷贝数均较阴性对照组有不同程度的下降(P＜0.05).结论:TGF-β受体和整合素介导的信号传导途径间可能存在着正反馈的效应,共同促进瘢痕的增生和挛缩.FAK是两条信号传导途径的交汇点和作用的中心环节.     

重症肌无力胸腺切除术后呼吸道管理与并发症的防治

目的 探讨重症肌无力胸腺切除术后呼吸道管理与并发症的防治.方法 32例ICU收治的重症肌无力胸腺切除术后的患者,根据危象预测积分,分为普通组(积分＜12分,n=21)和高危组 (积分＞12分,n=11),对两组患者术后呼吸机支持时间、拔管前后肌力恢复情况、自主呼吸情况、动脉血气分析情况以及两组患者术后体温、胸片和痰培养结果进行统计分析.结果 高危组患者术后呼吸支持时间(18 ～ 30 h,平均26 h)大于普通组患者(4 ～ 28 h,平均14 h),两组有显著性差异(P＜0.01),同时术后发热、胸片渗出影以及阳性痰培养结果的发生率也高于普通组.结论 术后给予高危患者严密的监测和充分的呼吸支持,有助于降低重症肌无力危象的发生率和死亡率,同时应充分重视气道护理和感染的防治.     

重症肌无力胸腺切除术后呼吸道管理与并发症的防治

目的探讨重症肌无力胸腺切除术后呼吸道管理与并发症的防治。方法32例ICU收治的重症肌无力胸腺切除术后的患者,根据危象预测积分,分为普通组(积分<12分,n=21)和高危组(积分>12分,n=11),对两组患者术后呼吸机支持时间、拔管前后肌力恢复情况、自主呼吸情况、动脉血气分析情况以及两组患者术后体温、胸片和痰培养结果进行统计分析。结果高危组患者术后呼吸支持时间(18~30h,平均26h)大于普通组患者(4~28h,平均14h),两组有显著性差异(P<0.01),同时术后发热、胸片渗出影以及阳性痰培养结果的发生率也高于普通组。结论术后给予高危患者严密的监测和充分的呼吸支持,有助于降低重症肌无力危象的发生率和死亡率,同时应充分重视气道护理和感染的防治。