钙通道在雌激素对大鼠血压调节中的作用及机制探讨

目的探索雌激素在大鼠血压调节中的作用，并探讨雌激素与钙通道的作用关系。方法27只大鼠分为A、B、C三组；分别做卵巢切除，卵巢切除合并雌激素注射，假手术处理；29d后，观察在Ca2＋通道阻断前后其血压变化。结果去卵巢大鼠血压永平低于雌激素替代疗法组及假手术组，给与L-钙通道阻断剂可引起血压下降并消除雌激素水平高低导致的血压显著性差异。结论雌激素水平下降诱发血压下降，而L-钙通道是雌激素体内血压调节作用可能的作用机制。     

胆碱能药物和人眼组织的M_3受体

目的　检测M3受体在人眼组织中的分布 ,探讨M3受体和胆碱能药物的关系。方法　人工合成M3受体特异性胞外肽链段 ,采用杂交瘤技术 ,制备M3受体单克隆抗体 ;用ELISA试验、放射配基受体结合实验和免疫组织化学实验 ,鉴定该抗体的特异性 ;通过免疫组织化学技术 ,检测M3受体在人眼组织中的分布。结果　虹膜、睫状肌、睫状体非色素上皮、视网膜和小梁网组织分布有M3受体 ,其中睫状肌的纵行纤维的M3受体的分布明显多于环行纤维。结论　人眼组织中广泛分布M3受体 ,是胆碱能药物主要作用的受体     

拟胆碱药M受体亚型降眼压作用研究

目的阐明拟胆碱药降眼压作用与M受体亚型的关系.方法用气动眼压计测量兔眼内压;用瞳孔尺测量瞳孔大小;用离体虹膜实验测量兔虹膜收缩.计算拟胆碱药的pD2值和M受体亚型拮抗剂的pA2值.结果拟胆碱药降眼压和缩瞳效应的强弱顺序为丁公藤碱＞乙酰奎宁＞毛果芸香碱,虹膜收缩能力的强弱为丁公藤碱＞毛果芸香碱＞乙酰奎宁.亚型拮抗剂拮抗拟胆碱药效应的强弱表现为4-DAMP(M3)＞Pirenzepine(M1)＞Gallamine(M2).结论拟胆碱药的降眼压和缩瞳效应主要是通过M3受体介导,其次为M1受体,而与M2受体关系甚小.眼科学报2000;16243～245.     

一种神经元体外缺氧诱导凋亡模型的建立

目的： 在不改变细胞生长环境条件下，建立一种体外培养大鼠皮层神经元缺氧诱导细胞凋亡模型。方法：取新生鼠培养第 8 d 的皮层神经元，采用不改变原培养基成分，将细胞置于缺氧环境(密闭容器内，抽取成真空并维持 30 min，然后充95%N2、5%CO2)中分别培养0.5、1.0、2.0、4.0、8.0、12.0和 24 h 后，于不同时间取出， Hochest33258神经元核染色观察凋亡小体及凋亡细胞核，抽提DNA琼脂糖电泳检测DNA梯形条带，以明确导致皮层神经元凋亡的缺氧时间。结果和结论：缺氧 0.5 h 后即可见DNA梯形条带形成，缺氧 1 h 后即可见神经元细胞核固缩、细胞核凋亡小体形成。在不改变细胞培养基及其它成分的条件下，平均缺氧 1 h 即可诱导体外培养的神经元细胞凋亡，成功地建立起一种体外培养大鼠皮层神经元缺氧诱导神经元凋亡模型，而且重复性好，可以作为体外缺氧/缺血诱导神经元凋亡的良好平台。     

抗青光眼药物与小梁细胞的凋亡

抗青光眼药物有胆碱能药物、肾上腺素能药物、β 受体阻滞剂、碳酸酐酶抑制剂、前列腺素类药物等 ,它们均通过不同的受体、不同的信号转导系统发挥其降眼压的作用 ,作用的部位主要在眼前段组织、睫状肌和小梁网等 ,具有平滑肌样功能的小梁网日益受到重视 ,并将是抗青光眼药物作用的主要的靶器官。有研究表明 ｐｉｌｏｃａｒｐｉｎｅ在高浓度时会导致小梁网细胞的变性坏死[1] ;肾上腺素会抑制小梁细胞的生长 ,降低其吞噬功能[2 ] 。小梁网在眼压调节过程中起着重要的作用 ,如果抗青光眼药物使用不当 ,则会在治疗青光眼的同时 ,加速青光眼的病…     

机能学实验室生物安全管理措施探讨

由动物实验导致的生物安全问题已经成为高等院校安全问题的重要研究内容。通过分析机能学实验室存在的问题,对机能学实验室的生物安全应对措施进行探索与实践,从而有效的促进了教学、科研工作的顺利发展。     

实时录播系统与虚拟现实技术在机能学实验教学中的应用探讨

机能学实验对学生掌握疾病的发生机制和诊疗原则有重要意义。机能学实验教学中既要求学生掌握机能学手术技能,也要求其掌握复杂多变的机能学变化规律,因而机能学实验需要成为开放性课程。而虚拟现实技术和实时录播系统的应用为机能学实验开放提供了新的可能性。通过实时录播系统可以即时播放高清画质的实验操作视频,从而方便指导学生机能学手术操作。而根据目前虚拟现实技术的发展现状,其更适合在课前预习和复习考试等学生自主学习环节中应用;若能将开发重点放在实验拓展部分,则更能发挥其优势,将更多复杂的机能学变化展示出来,拓展教学深度。这些新技术的运用对机能学实验教学效果有一定提升作用。     

Bcl-2蛋白对环匹阿尼酸诱导CHO细胞凋亡的保护作用

Hoechst 33258染色和DNA电泳分析揭示了内质网钙泵抑制剂环匹阿尼酸(CPA)呈浓度依赖性地诱导CHO细胞凋亡, 表现出染色体固缩和DNA片断形成的典型特征. Bcl-2的过度表达对CPA诱导的CHO细胞凋亡具有保护作用. 采用Fura-2技术测定细胞内游离钙浓度(［Ca²⁺］_i)变化，观察到Bcl-2对CPA触发的细胞Ca²⁺库Ca²⁺释放无任何影响. 结果表明Bcl-2蛋白对CPA诱导的CHO细胞凋亡的保护作用不是通过抑制CPA诱导的Ca²⁺释放，而是作用于［Ca²⁺］_i升高的下游途径.     

诱导型HSP70过表达对低钾诱导的小脑颗粒神经元凋亡的保护作用

目的观察腺病毒介导的人诱导型HSP70过表达对低钾诱导的原代培养的大鼠小脑颗粒神经元(cerebellargranuleneurons,CGN)凋亡的影响。方法原代培养5d的CGN共感染含人诱导型HSP70和绿色荧光蛋白(GFP)的腺病毒(AdTR5/HSP70-GFP)和四环素调控的启动子(AdCMV/tTA),或共感染含GFP的腺病毒(AdTR5/GFP)和AdCMV/tTA(对照组)。48h后,采用细胞荧光免疫组织化学法、Westernblot法检测HSP70的表达,或者换成无血清含5mmol·L-1KCl的培养基以诱导神经元凋亡。24h后,采用相差显微镜观察细胞形态学变化,MTT法检测神经元存活率,Hoechst33258核染色和DNA琼脂糖凝胶电泳分析神经元凋亡,以观察HSP70过表达对低钾诱导的CGN凋亡的影响。结果共感染了AdCMV/tTA和AdTR5/HSP70-GFP的CGN过表达了HSP70,抑制了低钾诱导的CGN的凋亡:使神经元存活率由45·5%±5·2%提高至82·3%±5·2%(P<0·01),核固缩减少,DNA的片段化减轻。结论腺病毒介导的人诱导型HSP70的过表达抑制了低钾诱导的CGN凋亡。