半胱氨酸和甘氨酸富集蛋白1的基因克隆真核表达及细胞定位

目的 构建带FLAG标签的半胱氨酸和甘氨酸富集蛋白1(CRP1)的真核表达载体,明确该融合蛋白在人胚肾293T细胞、肝癌HepG2细胞和乳腺癌ZR75-1细胞中的表达及定位情况.方法 采用PCR技术从乳腺cDNA文库中扩增出人CRP1基因,并将其插入到pCMV-Tag2B表达载体中;将重组质粒转染人胚肾293T细胞、肝癌HepG2细胞、乳腺癌ZR75-1细胞,Western blot法检测转染细胞的表达情况;荧光显微镜观察pCMV-FLAG-CRP1在人胚肾293T细胞、肝癌HepG2细胞、乳腺癌ZR75-1细胞中的定位.结果 双酶切和测序鉴定表明,pCMV-FLAG-CRP1真核表达质粒构建成功;Western blot法检测pCMV-FLAG-CRP1转染293T细胞、肝癌HepG2细胞、乳腺癌ZR75-1细胞后成功表达;荧光显微镜下观察,在293T、HepG2、ZR75-1细胞中,CRP1在细胞质和细胞核中均有分布,且胞质信号强于胞核.结论成功构建pCMV-FLAG-CRP1真核表达载体,CRP1可在不同细胞中的胞质和胞核表达.     

感染性角膜炎466例共焦显微镜检查结果临床分析

目的：探讨共焦显微镜在感染性角膜炎的病原学诊断上的意义。
　　方法：回顾性病例系列研究。对2010-01/2013-12共466例467眼感染性角膜炎共焦显微镜的检查结果进行回顾性分析,总结其共焦显微镜图像特点及各类型角膜炎的临床特征。
　　结果：患者466例平均54.4±13.0岁,男264例(56.7%),女202例(43.3%),诊断为真菌性角膜炎190例(40.8%),病毒性角膜炎148例(31.8%),细菌性角膜炎125例(26.8%),棘阿米巴角膜炎3例(0.6%),真菌性角膜炎可见大量真菌菌丝,棘阿米巴角膜炎可见典型阿米巴包囊。
　　结论：共焦显微镜是一种早期辅助诊断感染性角膜炎的有效方法,尤其对真菌及棘阿米巴角膜炎的早期诊断具有特异性,有利于感染性角膜炎的早期诊断及指导治疗。     

泪腺多形性腺瘤表皮生长因子受体表达的研究

应用免疫组化的方法观察３２例泪腺多形性腺瘤表皮生长因子受体的表达，结果１０例染色阳性，而正常泪腺组织染色阴性，阳性染色限于索条样、腺管排列及鳞状化生的肿瘤细胞，实验结果提示泪腺多形性腺瘤表皮生长因子受体的表达水平明显高于正常泪腺组织，表皮生长因子受体可能主要表达于导管起源的肿瘤细胞。     

PRK治疗RK后残余近视散光二年疗效分析

目的： 评价准分子激光屈光性角膜切削术治疗放射状角膜切开术后残余近视散光的预测性、稳定性和安全性。方法： 对５２ 眼 Ｒ Ｋ 术后残余近视散光患者行再次 Ｐ Ｒ Ｋ 治疗, 并连续随访两年以上。术前残余球镜屈光度－ ３７５±１３２ Ｄ,残余柱镜屈光度－ ２３６±１２５ Ｄ, 最佳矫正视力均≥０８。结果： 术后 ６ 个月球镜屈光度－ ０３２±０２４ Ｄ, 柱镜屈光度－ ０７８±０５２ Ｄ, 裸眼视力≥１０ 者４６ 眼 （８８４６％ ）, 术后 ２４ 个月球镜屈光度－ ０３７±０４２ Ｄ, 柱镜屈光度－ ０５６±０３７ Ｄ, 裸眼视力≥１０ 者 ４２ 眼 （８０７６％ ）。最佳矫正视力下降 １ 行以上者 ３ 眼 （５７６％ ）, 实际球镜矫正度与预期矫正度相差１０ Ｄ 以内 ５０ 眼 （９０１５％ ）, 柱镜相差 １０ Ｄ以内５１ 眼 （９８０７％ ）。结论： Ｐ Ｒ Ｋ 治疗 Ｒ Ｋ 术后残余近视散光的两年随访结果表明, 该方法预测性强、稳定性好和安全性高, 特别在矫正残余散光方面, 其结果令人满意。     

组织工程脱细胞角膜基质联合干细胞诱导分化制备异体角膜移植材料研究

目的研究脱细胞角膜基质联合干细胞制备异体角膜移植材料的安全性和有效性。方法应用酶-深低温法对猪角膜基质进行处理,制备猪脱细胞角膜基质。采用微注射法注入骨髓间充质干细胞进行共培养,制备异体角膜移植材料,并将其植于角膜病变的新西兰大白兔,评价术后组织工程角膜的系统性功能。结果脱细胞角膜基质的显微结构显示板层结构完整,未见细胞残留。共培养后光镜观察角膜基质细胞可于脱细胞角膜基质内生长,细胞形态具有纤维细胞特征,但分布不够均匀。移植术后,组织工程角膜愈合良好,未见明显的炎症及排斥反应。结论脱细胞角膜基质联合干细胞诱导分化制备异体角膜移植材料具有免疫排斥率低,组织相容性佳的特性。     

高透氧性硬性角膜接触镜并发症的处理及预防

目的:通过观察配戴高透氧性硬性角膜接触镜(rigid gas permeable contact lens,RGP)的并发症,探讨RGP并发症的处理及预防。方法:配戴RGP患者54例101眼,分别记录配戴前后视力、屈光度、裂隙灯及角膜地形图结果,随访观察12mo,研究分析并发症发生情况及相应处理的有效性。结果:本组患者在配戴过程中发生的并发症主要有干涩不适16眼(15.8%);异物感8眼(7.9%);角膜上皮点状脱落7眼(6.9%);结膜过敏性炎症3眼(3.0%);角膜外伤1眼(1.0%);眼镜护理不当15眼(14.9%),包括镜片污浊划痕10眼,镜片丢失3眼,镜片碎裂2眼。除有2例因眼部不适停戴外其他患者经对症处理均能满意接受配戴。结论:详细的试戴前检查、正规验配过程及严格随诊可以有效预防并减少RGP并发症的发生。     

脆骨-蓝巩膜-耳聋综合征合并高度近视一例

患者,男,39岁,双耳听力下降2个月,于2012年8月26同就诊于我院耳鼻喉科,因双眼发蓝请眼科会诊。患者既往有多发轻微外伤后骨折病史,分别于5、7、15、16、19岁发生有锁骨骨折、右上臂骨折、有肘关节骨折、右前臂桡骨骨折、左下腿股骨骨折,均经对症治疗后痊愈,未留有肢体功能障碍,无其他病史及耳毒件药物使用史。查体：一般状态良好,步态正常,身材矮小（身高155 cm）,毛发稀疏．、眼科检查：右眼视力0.2,左眼0.25．有眼矫正视力0.4,左眼0.4;外眼正常+双眼结膜无充血,巩膜区成淡蓝色,角膜透剧J,无角膜后色素,双眼前房等深,无前房闪辉,瞳孔网,直径3 mm,直接、问接对光反射(+),品状休透叫,眼底弛双眼视盘色淡红界清,C/D约为0.3,A/V约为2/3,视网膜呈豹纹状,未见视网膜裂孔及脱离区,黄斑区未见出血及渗出,无黄斑中心凹反射。验光：右眼-15.00-0.50x91,左眼-9.00-0.50x91。B超：双眼玻璃体混浊、A超测眼轴艮：右眼29.3 mm,左眼28.5 mm。耳科检查：双耳鼓膜完整：纯音听阈测试示双耳骨气导听力曲线均呈下坡型,骨导阈值左耳5-40 dB/HL．右耳阈佰10-40 dB/HL.气导阈值35-75 cIB/HL,右耳阈值30-80 dB/HL;C;elle试验双耳均为阴性：声导抗测试示双耳鼓窒压图均为A型;鼓窒压左耳0 dapa,右耳30 dapa;声顺值左耳0.29 ml,右耳0.25 ml;橙骨肌声反射舣耳均未引出;,耳科检查示耳聋为混合性听力减退,以传导性为主（镫骨固定）。辅助检查：腕关节及膝关节X线片示骨质密度降低,骨皮质变薄。诊断为脆骨一蓝巩膜一耳聋综合征合并双眼高度近视。予以配镜治疗,以提高视力。     

深板层角膜移植术治疗角膜疾病的临床分析

目的评价深板层角膜移植术治疗某些角膜疾病的临床疗效。方法回顾性分析我院16例（16眼）罹患角膜疾病但内皮细胞功能正常而行深板层角膜移植者,对所有病例随访6月-2年,观察术后视力、角膜移植片的透明性、角膜上皮完整性及术中术后并发症的情况。结果术后有7眼最佳矫正视力达0．4或0．4以上,5眼达0．1～0．3,4眼达0．05～0．1。角膜移植片透明者9眼,半透明者7眼。主要并发症为术中后弹力层微穿孔6眼,其中3眼术后形成植片轻度水肿,角膜层间少量积液;持续性上皮缺损2眼;真菌性角膜溃疡复发1眼,移植排斥反应1眼,经积极治疗,并发症得到控制,取得良好疗效。结论深板层角膜移植术治疗内皮功能正常的角膜疾病疗效确切,严格掌握手术适应证、提高手术技巧是提高手术成功率的关键。