曲伏前列腺素对体外培养人眼睫状肌细胞基质金属蛋白酶2的作用

背景:曲伏前列腺素可通过增加眼睫状肌细胞间间隙,使葡萄膜巩膜房水流出通道流出阻力下降,进而降低眼压,这一作用途径是否通过增强睫状肌基质金属蛋白酶的表达而完成?目的:观察曲伏前列腺素干预人眼睫状肌细胞基质金属蛋白酶2表达活性的作用。设计:观察对比分析。单位:中山大学附属第二医院眼科。材料:实验于2005-08/2006-04在中山大学附属眼科中心完成。供体摘自1例死亡1h内无眼疾青年尸体单侧眼球(均经其家属同意),取自中山眼科医院,供体排除眼部疾患。兔抗人基质金属蛋白酶2多克隆抗体(武汉博士德生物工程有限公司),曲伏前列腺素(美国ALCON公司,批号:86610F,0.004%溶液)。方法:实验干预:在人睫状肌细胞无牛血清培养基中加入1μmol/L曲伏前列腺素为实验组,同时以无药物干预的细胞为对照组,实验组于加药后6,12,24h收集细胞进行观察。实验评估:采用RT-PCR和ELISA法分别检测各组人睫状肌细胞基质金属蛋白酶2在基因和蛋白水平的表达;采用Zymography技术分别检测各组细胞基质金属蛋白酶2的活性。主要观察指标:人眼睫状体细胞内基质金属蛋白酶2 mRNA的表达,细胞外液基质金属蛋白酶2蛋白表达以及基质金属蛋白酶2活性。结果:①基质金属蛋白酶2 mRNA的表达:实验组加药后6,12,24h基质金属蛋白酶2 mRNA相对表达量呈逐渐升高趋势(F=236.959,P<0.01)。②基质金属蛋白酶2蛋白表达:实验组加药后6,12,24h基质金属蛋白酶2表达随曲伏前列腺素作用时间延长逐渐升高(F=38.110,P<0.01)。③基质金属蛋白酶2活性:Zymography技术检测实验组加药后6,12,24h基质金属蛋白酶2活性随曲伏前列腺素作用时间延长而逐渐增强(F=74.348,P<0.01)。结论:体外培养的人睫状肌细胞接受曲伏前列腺素作用后,基质金属蛋白酶2表达随药物作用时间延长逐渐增加,活性逐渐增强。     

牛磺酸在原发性开角型青光眼治疗中的应用

目的探讨牛磺酸对原发性开角型青光眼(POAG)的作用机制及青光眼的发病机制。方法以双盲、分组、安慰剂对照的实验设计,对治疗前后进行图形视觉诱发电位(PVEP)和图形视网膜电流图(PERG)的联合检测及彩色多普勒显像(CDI)各指标的检测,分析比较用药前后的变化。结果牛磺酸治疗POAG后PVEP及PERG有特异性改善;CDI各血管指标有明显的改善,作用等同于维拉帕米组;维拉帕米组对PVEP和PERG没有明显作用;安慰剂组对PVEP、PERG及CDI各指标均无改善作用。结论牛磺酸作用于POAG,可以防止视感光细胞受损,从而保护视功能;牛磺酸可以改善眼底微循环,提高视乳头血流灌注压,从而避免POAG患者因缺血而致的视神经损伤。     

曲伏前列腺素对培养人眼睫状肌细胞基质金属蛋白酶-2表达的影响

【目的】研究曲伏前列腺素作用下,基质金属蛋白酶-2（MMP-2）在人睫状肌细胞的表达。【方法】在人睫状肌细胞无牛血清培养基中加入1μmol/L曲伏前列腺素（travoprost）,根据曲伏前列腺素孵育时间的不同,分为4个时间组,即0 h组（对照组）、6 h、12 h、24 h组。Real-time PCR和ELISA法分别检测上述各时间组人睫状肌细胞MMP-2在基因和蛋白水平的表达,每种方法分别重复做3次。Zymography技术分别检测4组细胞MMP-2的活性,重复4次。【结果】设定对照组mRNA相对表达量为1做作标准,6 h、12 h、24 h组MMP-2 mRNA相对表达量为0.58±0.04、1.20±0.05、1.95±0.11,MMP-2 mRNA表达呈逐渐升高趋势（P=0.000）;ELISA检测MMP-2的A值分别为0.0503±0.0021、0.0627±0.0017、0.0673±0.0025、0.0783±0.0039,MMP-2的表达随travoprost作用时间延长逐渐升高（P=0.000）。Zymography技术检测MMP-2校正光密度值分别为10±5,52±7,104±21,237±40;MMP-2活性随travoprost作用时间延长而逐渐增强（P=0.000）。【结论】曲伏前列腺素作用于人睫状肌细胞后,MMP-2表达随药物作用时间延长逐渐增加,活性逐渐增强。     

羊膜移植与丝裂霉素C术中术后应用治疗翼状胬肉的疗效对比

目的比较羊膜移植与丝裂霉素C术中术后应用治疗翼状胬肉的疗效。方法对48例50眼胬肉分别行显微切除联合羊膜移植(28例30眼)、联合术中与术后使用丝裂霉素C(20例20眼),术后观察两组的临床症状、眼表情况和复发情况,随访6~12个月,平均8.5个月。结果羊膜移植组术后临床症状较丝裂霉素组轻,眼表修复速度较丝裂霉素组快。随访1年,羊膜移植组有1眼复发(3%),丝裂霉素组1眼复发(5%)。结论显微切除翼状胬肉联合丝裂霉素C术中术后应用和显微切除翼状胬肉联合羊膜移植均能明显降低胬肉复发率。但综合比较,前者相对较安全,术后角膜修复较快,患者痛苦较少。     

眼眶特发性炎性假瘤放射治疗13例临床观察

目的探讨眼眶放射治疗在眼眶特发性炎性假瘤治疗中的应用、疗效及并发症。方法回顾性分析13例眼眶特发性炎性假瘤在我院接受眼眶放射治疗的患者,均为全身激素治疗效果不佳及不能耐受激素治疗患者。采用直线加速器眼眶外放射治疗。结果全部患者随访2-4年。13例患者放射治疗后有10例不同程度眼睑肿胀结膜水肿减轻,疼痛减轻,眼球运动改善,眼球突出度降低;其中5例患者完全治愈,5例部分治愈。2例无效,1例患眼复发,1例对侧眼又发病。未出现明显并发症。结论低剂量直线加速器眼眶局部放射治疗对活动性难治性眼眶炎性假瘤能有效缓解症状,且安全可靠。     

跳水运动员视网膜损伤的临床研究

目的:探讨跳水运动员发生眼底损伤的危险因素,临床特点及其发生机制,为跳水运动员视网膜脱离提供预警。方法:对广东省跳水运动员85例(170眼)进行系统眼部检查,散瞳裂隙灯三面镜下观察视网膜损伤的特点,寻找与跳水年龄和跳水年限的关系。结果:47例(55%)发生视网膜病变,包括视网膜变白,格子样变性、视网膜变薄、干性裂孔以及视网膜脱离等,其中以视网膜变白和视网膜变性多见;视网膜病变发生的方位在11~1点占50%、在5~7点占33%,在8~10点占10%,2~4点占7%。跳水训练2a既有可能发生视网膜损伤,且随着跳水时间的延长发生视网膜损伤的比例逐渐增高;视网膜损伤从4岁至13岁各个年龄段开始跳水均有可能发生。结论:视网膜损伤与跳水运动的特点密切相关,水面长期反复对眼部的拍击,是该病发生的直接原因,跳水时间越长发生眼底损害的可能性越大,对本病的监测和预防非常重要。     

载5-氟尿嘧啶聚乳酸纳米微粒对人眼球筋膜囊成纤维细胞抑制作用的研究

目的 探讨载5-氟尿嘧啶(5-FU)聚乳酸纳米微粒(5-FU-PLA-NPs)对体外培养的人眼球筋膜囊成纤维细胞的抑制作用.方法 为实验研究.噻唑蓝(MTT)比色法检测不同剂量(0.1、1.0、10.0、100.0和1000.0 mg/L)的空载聚乳酸纳米微粒(PLA-NPs)在不同时间点(48和72 h)对人眼球筋膜囊成纤维细胞增殖的影响,MTT比色法检测不同剂最(0.1、1.0、10.0、100.0和1000.0 mg/L)5-FU纳米药物和5-FU原药在1～7 d内共7个时间点对成纤维细胞生长的抑制作用,计算并比较两者在7个时间点对成纤维细胞的抑制率.RT-PCR分别检测剂量为100.0 mg/L的5-FU纳米药物和5-FU原药作用成纤维细胞1、5、7 d后Ⅲ型前胶原蛋白mRNA的表达情况.对同一天各浓度A值的比较用单因素方差分析,同一天相同浓度5-FU原药组A值与5-Fu-PLA-NPs组A值的比较用两独立样本t检验分析,采用单因素方差分析分别比较不同时间点各组COI3的相对A值.结果 空载聚乳酸纳米微粒对成纤维细胞的增殖没有影响.载5-FU纳米微粒和5-FU原药均抑制成纤维细胞的增殖,并使Ⅲ型前胶原蛋白mRNA的表达水平降低,该抑制作用具有时间和剂量依赖性.作用初期各剂量组5-FU纳米微粒的抑制作用低于原药,随时间延长抑制作用超过原药,差异有统计学意义(P<0.05).结论 聚乳酸(PEA)具有良好的生物相容性与安全性,可作为眼部用药的载体.载5-FU聚乳酸纳米微粒具有一定的缓释功能,可长期释放药物,随着作用时间的延长,5-FU纳米药物对成纤维细胞的抑制作用超过原药,其可作为靶向缓释药物载体.(中华眼科杂志,2009,45:26-31)     

房角手术治疗小儿无晶状体眼青光眼

目的:探讨小梁切开术和房角切开术治疗小儿无晶状体眼青光眼的效果。方法:选择1997/2010年接受先天性白内障手术后进而因无晶状体眼青光眼接受小梁切开术和房角切开术的患儿。手术治疗成功的标准是术后眼压≤24mmHg,无论是否需要局部药物的辅助使用,且避免了小梁切除术或引流阀植入,在随访期间没有明显并发症。排除标准:眼前段发育不全、小角膜、白内障手术时即发生的青光眼、随访<1a。结果:符合纳入标准10例12眼。其中,2眼仅行房角切开术,2眼房角切开术后进而接受了小梁切开术,8眼仅行小梁切开术。房角手术前平均眼压为35±10mmHg,末次随访的平均眼压为22±4mmHg(P=0.0005)。12眼中有7眼获得了成功(58%):5眼(42%)是在单一的小梁切开术后获取成功的,2眼(17%)在接受房角切开术后进而于术后7mo和15mo时接受了引流阀植入。结论:小梁切开术和房角切开术治疗小儿无晶状体眼青光眼的效果满意。     

大鼠雪旺细胞对两种来源的成骨细胞增殖分化影响的研究

目的 研究应用雪旺细胞(SCs)对两种来源的成骨细胞(OB)的增殖与分化的影响,为构建神经化组织工程骨提供体外实验理论依据.方法 通过采用股骨、胫骨髓腔冲洗法获得SD大鼠骨髓基质干细胞(BMSCs),采用胰蛋白酶消化新生鼠颅骨获得OB及采用消化后组织块法获得SCs.将BMSCs在成骨诱导液作用3周,鉴定BMSCs向OB分化.采用96孔共培养板将第2代SCs种植于上室,颅骨来源OB种植下室,共培养为实验组,无SCs干预共培养为对照组.将诱导分化的OB种植于下室,第2代SCs种植于上室,共培养为实验组,无SCs干预共培养为对照组,分别于共培养后1、3、5、7、9d采用甲基噻唑基四唑(MTT)进行增殖比较.采用6孔共培养板,实验组上室种植SCs,下室分别种植颅骨来源及BMSCs来源的OB,不加SCs的两种来源的OB作为对照组,分别共培养后于3、7 d检测两种来源OB的碱性磷酸酶、骨钙素、骨桥蛋白、骨形态发生蛋白-2 mRNA表达.结果 SCs对颅骨来源的OB在共培养3、5、7、9 d 4个时间点均有明显促增殖作用,在碱性磷酸酶、骨桥蛋白、骨形态发生蛋白-2mRNA在各个时间段均起到抑制作用.SCs对大鼠BMSCs来源的OB在共培养1、3 d无明显促增殖作用,在5、7、9 d有明显促增殖作用,在成骨培养基的环境里,SCs可促进BMSCs诱导的OB分化.结论 选择BMSCs来源的OB 与 SCs共培养更适合用于构建神经化组织工程骨.     

角膜上皮损伤引起复发性角膜上皮糜烂12例分析

目的 分析角膜上皮损伤引起复发性角膜上皮糜烂的临床特点.方法 回顾分析2010年9月13日-2012年4月23日我院眼科门诊就诊12例角膜上皮损伤引起复发性角膜上皮糜烂病例的临床资料.结果 12例患者中,男5例,女7例,年龄25～59岁,角膜损伤距离首次角膜上皮糜烂发作时间4～18个月.患者主要症状表现为无原因突然发病,无特定时间,患眼出现刺痛、异物感、畏光流泪等,裂隙灯检查可见角膜上皮缺损,角膜上皮糜烂复发1～5次.本组病例均通过保守治疗治愈,愈合时间3～7天,角膜未遗留瘢痕.结论 外伤性角膜上皮损伤可引起复发性角膜上皮糜烂,虽然病情反复发作,但可通过药物治疗治愈,预后良好.