大鼠的两种干细胞向光感受器细胞和视网膜色素上皮细胞分化的实验研究

目的研究大鼠的骨髓间充质干细胞（ MSCs ）和脂肪干细胞（ ADSCs ）体外向光感受器细胞和RPE细胞分化的可能性,为临床治疗视网膜病变提供物质基础。方法经贴壁筛选法连续传代纯化细胞,流式细胞仪检测CD45、CD90、CD49d、CD106鉴定MSCs和ADSCs。用视网膜细胞提取液、EGF、牛磺酸和视黄酸分别诱导MSCs和ADSCs;流式细胞仪定量检测细胞的视紫红质、CK和S-100的表达,计算诱导效应。结果传代纯化MSCs和ADSCs,传1代至传5代,MSCs中CD45阳性率是1．8％～7．5％,CD90是83．8％～95．7％,CD49d是6．6％～24．8％,CD106是15．7％～32．2％;ADSCs中CD45阳性率是0．8％～9．3％,CD90是84．7％～94．8％,CD49d是16．8％～31．0％,CD106是8．3％～22．2％。 MSCs和ADSCs 均为CD45阴性和CD90阳性。各代MSCs和ADSCs比较,MSCs低表达CD49d,高表达CD106;而ADSCs高表达CD49d,低表达CD106。不同的诱导方法,MSCs的视紫红质的诱导效应是55．9％～70．0％,CK的诱导效应是49．5％～72．0％,S-100的诱导效应是25．4％～34．0％;ADSCs的视紫红质的诱导效应是19．6％～31．1％,CK的诱导效应是31．0％～79．3％,S-100的诱导效应是27．3％～50．7％。结论 MSCs和ADSCs均具有向光感受器细胞和RPE细胞分化的潜能,可能成为干细胞移植治疗的来源。     

急性脑出血患者血清甲状腺激素水平的变化及其意义

目的探讨急性脑出血患者血清甲状腺激素水平的变化及其意义。方法 65例急性脑出血患者于入院第1 d、第3 d、第7 d、第15 d,52名正常对照者于体检日进行血清三碘甲状腺原氨酸(T3)、甲状腺素(T4)、游离T3(FT3)、游离T4(FT4)和促甲状腺激素(TSH)水平检测和比较。并对不同病情及预后的急性脑出血患者入院第3 d的血清甲状腺激素水平进行比较。结果与正常对照组比较,急性脑出血组入院第1 d、第3 d、第7 d时血清T3、FT3水平明显降低,血清T4、FT4水平明显增高(均P<0.05)。与急性脑出血轻度亚组比较,中度亚组及重度亚组血清T3、FT3水平明显降低,血清T4、FT4及TSH水平明显增高(均P<0.05);与急性脑出血中度亚组比较,重度亚组血清T3、FT3水平明显降低,血清T4、FT4及TSH水平明显增高(均P<0.05)。与急性脑出血显著进步亚组比较,进步亚组及死亡亚组血清T3、FT3水平明显降低,血清T4、FT4及TSH水平明显增高(均P<0.05);与急性脑出血进步亚组比较,死亡亚组血清T3、FT3水平明显降低,血清T4、FT4及TSH水平明显增高(均P<0.05)。结论急性脑出血...     

内毒素耐受对内毒素诱导的葡萄膜炎炎症程度及虹膜睫状体中PI3K/AKT 信号通路的影响

目的探讨低剂量脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)预处理对内毒素诱导葡萄膜炎(endotoxin induced uveitis,EIU)动物模型炎症程度的影响,并分析虹膜睫状体组织中PI3K/AKT表达水平的改变。设计实验研究。研究对象8-10周龄健康雄性Wistar大鼠90只。方法随机分为正常对照(normal control,NC)组、内毒素耐受(endotoxin tolerance,ET)组和内毒素诱导的葡萄膜炎(EIU)组,每组30只。通过皮下注射1 mg/kg LPS建立内毒素诱导的葡萄膜炎动物模型。ET组:EIU模型诱导之前连续5日腹腔注射0.1 mg/kg LPS诱导内毒素耐受。EIU组及NC组连续5日注射等体积生理盐水。第6天相同时间ET组及EIU组接受200μg LPS皮下注射,NC组接受等体积生理盐水注射。注射后24小时,在裂隙灯显微镜下进行临床评分。眼球摘除行HE染色组织病理学观察。ELISA测量房水TNF-α浓度,蛋白印迹法检测虹膜睫状体PI3K和AKT蛋白的表达。主要指标眼前节炎症反应评分,虹膜切片HE染色观察,房水TNF-α浓度及虹膜睫状体PI3K/AKT蛋白表达。结果临床评分ET组、EIU组、NC组分别为(1.65±0.49)、(6.65±0.59)、(0.20±0.41)分(χ~2=53.261,P=0.001);组织病理评分ET组、EIU组、NC组分别为(0.6±0.5)、(3.8±0.4)、(0.2±0.4)分(χ~2=46.137,P=0.001)。房水TNF-α浓度ET组、EIU组、NC组分别为(10.58±0.67)、(30.96±1.55)、(10.32±0.61)pg/ml(F=260.08,P=0.03)。蛋白印迹法显示虹膜睫状体组织中PI3K和AKT的蛋白水平ET组、EIU组、NC组分别为(0.197±0.019)、(0.539±0.017)、(0.453±0.014)(F=210.66,P=0.002)和(0.234±0.019)、(0.553±0.013)、(0.428±0.002)(F=275.35,P=0.001)。结论内毒素耐受可以降低大鼠内毒素诱导的葡萄膜炎的炎症反应程度,下调虹膜睫状体组织中PI3K和AKT的表达,揭示内毒素耐受对EIU的保护机制可能与PI3K/AKT信号通路有关。