尿激酶型纤溶酶原激活因子cDNA的克隆与原核表达

目的构建尿激酶型纤溶酶原激活因子（uPA）原核表达质粒,并在大肠埃希菌BL21中表达,为进一步研究uPA奠定基础。方法应用逆转录RT—PCR,从人肝细胞cDNA中扩增人尿激酶型纤溶酶原激活因子基因序列,与原核表达质粒pET32a重组,获得表达质粒uPA—pET32a。用氨苄青霉素平板筛选转化子。双酶切与DNA测序进行鉴定,用IPTG诱导表达,并用Westernblotting进行鉴定。结果从肝细胞cDNA中扩增的uPA基因片段长1296bp,酶切及DNA测序证实uPA-pET32a重组质粒构建正确,表达融合蛋白分子量约为68900Mr,经Western blotting证实为目的蛋白。结论成功构建了重组原核表达质粒uPA—pET32a。并能在大肠埃希菌内表达,所表达的融合蛋白分子量大小与预期的相一致．为进一步的研究奠定了基础。     

经阴道修补术治疗直肠前突48例

目的探讨经阴道修补术治疗直肠前突的效果.方法：对48例Ⅱ、Ⅲ度直肠前突的患者采用经阴道修补术治疗,依据Longo ODS便秘问卷调查,观察术前、术后2周及6个月的症状改善情况.结果：术后2周总有效率为96%,术后2周及6个月主要症状均较治疗前明显改善（P〈 0.05）.结论：经阴道修补术治疗直肠前突,纠正了直肠阴道隔薄弱区,加强了直肠的支撑作用,针对性强,效果可靠.     

肌内神经对股直肌损伤修复的作用

背景:既往对损伤骨骼肌的处理主要是修复肌膜及肌外神经.目的:实验拟观察肌内神经对损伤股直肌的修复作用.设计、时间及地点:随机对照动物实验,组织学观察,于2006-0912007-08在重庆医科大学动物实验中心完成.材料:新西兰大白兔20只,体质量2.0～2.5 kg,右侧股直肌用于制备骨骼肌损伤模型,左侧股直肌作为对照.方法:20只大白兔随机数字表法分为2组.肌内神经完整组采用不全离断方式,在神经入肌点以远4.0～5.mm处横断股直肌而保留肌内神经完整,肌内神经断裂组采用完全离断方式在神经入肌点以远4.0～5.0mm处横断股直肌及肌内神经.主要观察指标:①术后28周测量股直肌的湿重、股直肌等长收缩力的变化.②苏木精一伊红染色观察股直肌形态变化,Masson三色染色观察纤维化程度,肌球蛋白=三磷酸腺苷酶染色及还原型辅酶I四唑氮还原酶染色区别肌纤维的类型,并计算肌纤维横断面面积.结果:①与对照侧相比,肌内神经断裂组实验侧股直肌湿重下降,等长收缩力下降(P<0.05).②与对照侧相比,肌内神经完整组Ⅰ型、Ⅱa型肌纤维横断面面积恢复较佳,Ⅱb型肌纤维较差(P<0.05),各型肌纤维构成比例基本恢复;肌内神经断裂组Ⅰ型、Ⅱ a型、Ⅱb型肌纤维横断面面积均恢复较差(P<0.05).结论:肌内神经能够促进损伤骨骼肌的肌纤维再生,减轻肌肉萎缩及纤维变性,恢复肌纤维的正常形态及组成方式,从而促进损伤骨骼肌的恢复.     

驻马店市2000-2002年HIV抗体初筛试验阳性调查分析

目的　了解驻马店市近几年HIV感染情况。方法　对不同职业和不同年龄的人群进行HIV抗体初筛试验调查。结果　在调查的 895 4人中 ,HIV抗体初筛试验阳性者 313例。阳性率从 2000年的 2.78%上升至 2002年的 4.22 %。结论　HIV感染者在驻马店市有明显上升趋势。相应部门应加强管理并采取有效措施。预防HIV/AIDS在驻马店市的传播和蔓延。     

近海浅海海水弗朗西斯菌的分离培养和鉴定

目的　对广东地区近海浅海海水弗朗西斯菌进行分离培养,以了解弗朗西斯菌在近海浅海海水中的分布情况。方法　在广东近海浅海地区水域内,选取茂名市电白区水东湾（2019年10月4日）以及惠州市两大湾（巽寮湾、双月湾,2019年8月12日）进行多点采集水样,分别19份和29份。利用前期探索出针对分离弗朗西斯菌的有效海水前处理手段（浓缩、酸处理）以及分离培养基（BHI-2216E-GVPC和BCYEα-2216E-GVPC）进行分离培养,依据弗朗西斯菌的菌落特征,初步将可疑菌株进行分纯培养,并对纯培养后的可疑菌株进行传统形态特征、生理生化特征、16S rRNA分子特征等鉴定。结果　19份水东湾水样中有14份（阳性率为73.7%）成功分离到共60株目标菌（含邻近兼性胞内寄生菌）;29份惠州地区水样中有17份（阳性率为58.6%）成功分离到共79株目标菌（含邻近兼性胞内寄生菌）。经菌落特征、细菌形态学检查、生化反应以及测序结果比对后,水东地区60株目标菌分离出弗朗西斯菌属（含潜在新种）12株（20.0%）,潜在新科2株（2.9%）,惠州地区79株目标菌分离出弗朗西斯菌属（含潜在新种）22株（27.8%）,潜在新科18株（22.8%）。结论　广东地区近海浅海海水中弗朗西斯菌菌种资源丰富,且存在不同的该菌属内新种以及可能存在邻近新属。     

下颈椎前路椎弓根螺钉置入相关的解剖学观察

目的：观察成人下颈椎前路椎弓根螺钉（Anterior pedicle screw,ＡＰＳ）置入相关的径线和角度,为该术的临床应用提供相关解剖学参数。方法：成人干燥尸体下颈椎（C3～C7）标本22具,分别用手工和CT测量椎弓根最窄处的高度、宽度及内外侧皮质厚度,椎弓根中轴线全长,轴线夹角,并进行统计学分析。随机在CT室资料库中抽取100例成人活体颈椎CT图像,用Mimics软件行三维重建,除以上参数外,还测量进钉点位置的相关数据,计算置钉参数的95%CI。结果：22具标本的相关径线及角度,其手工测量值与CT测量值间无统计学差异。成人活体下颈椎CT图像测量结果通过95%CI的计算,可以得出：C3、C4进钉点位于椎体正中矢状面受术椎弓根对侧 2~3 mm,距椎体上终板平面 6~7 mm,进钉角度为外倾角 46°~ 48°,头倾角 C3：-11°~-12°,C4 -6°~-7°。C5 进钉点位于椎体正中矢状面受术椎弓根同侧旁 1~2 mm,距椎体上终板平面 7~8 mm,进钉角度为外倾角 47°~49°,头倾角 1°~2°。C6、C7 进钉点位于受术椎弓根同侧,正中矢状面旁 4~5 mm,距椎体上终板平面 7.5~8.5 mm,进钉角度为外倾角 C6：40°~42°,C7：36°~38°,头倾角 C6：6°~7°,C7：11°~13°。置钉长度选择 30、32、34 mm 较为适宜,螺钉直径可选择 3.5 mm 或 4.0 mm。结论：本实验证实了CT测量下颈椎APS置入技术相关参数的准确性,同时在国内首次利用大样本研究对该技术置钉参数进行了探索。     

经皮中央纵向穿刺技术在治疗6例骶骨转移性肿瘤中的应用

目的探讨经皮中央纵向穿刺技术在治疗骶骨转移性肿瘤中应用的疗效。方法回顾性分析2009年9月至2011年10月,在C型臂X线引导下应用经皮中央纵向穿刺技术治疗骶骨转移性肿瘤6例的临床资料。结果 6例11个椎体均顺利完成,每椎平均手术时间21.3min。S1、S2、S3椎体平均注入骨水泥分别为4.2、2.8、2.0mL,骨水泥外漏1椎(S3),无神经损害并发症发生。术后3dVAS评分[(3.25±0.90)分]较术前[(6.25±1.09)分]明显下降(P<0.05)。结论通过中央纵向穿刺途径行经皮骶椎成形术具有安全有效、操作简单等特点。适于对骶骨转移性肿瘤的穿刺活检及强化治疗。     

对96例胸腹部多发伤患者进行临床救治的分析

目的:探讨胸腹部多发性损伤患者临床救治路径和效果.方法:选取本院2010年1月～2012年12月期间本院外科收治的胸腹部多发伤患者96例临床资料进行回顾性分析.术前严密观察病情变化、积极抗休克治疗,迅速进行剖胸、剖腹探查等手术,术后严密观察病情动态,并进行综合治疗.结果:96例患者治愈94例,治愈率97.91％,死亡2例,死亡率2.09％.结论:严重胸腹伤应做到早期诊断,及早手术,并加强监护,预防并发症,可有效提高治愈率,提高患者生存率和生存质量.     

小儿传染性单核细胞增多症误诊20例分析

笔者 1988- 0 2～ 2 0 0 0 - 0 4共诊断传染性单核细胞增多症(Infections mouonucleosis IM) 38例 ,其中误诊 2 0例 ,误诊率为5 2 .6 % ,现将该 2 0例误诊原因分析探讨如下。1　临床资料本组误诊 2 0例均为我院儿科门诊和儿科住院患儿 ,男 12例 ,女 8例 ,年龄 2岁～ 14岁。平均 8岁 ,误诊为上呼吸道感染 6例 ,急性肾炎 3例 ,急性扁桃体炎 3例 ,急性咽炎 3例 ,急性淋巴细胞白血病 2例 ,急性传染性淋巴细胞增多症 1例 ,急性荨麻疹1例 ,病脑 1例 ,误诊时间 7～ 15 d,平均为 11d。典型病例例 1　女 ,4岁。以不规则发热 7d(T38.2℃～ 39.2℃ ) …     

骨保护素的克隆及对骨髓间充质干细胞分化的影响

目的:克隆人骨保护素(Osteoprotegerin,OPG)基因并构建其重组腺病毒,观察其对BMSCs分化的影响.方法:RT-PCR方法从人肝克隆OPG基因全长cDNA,利用穿梭质粒将OPG基因重组获得复制缺陷型重组腺病毒AdOPG;分离培养兔骨髓间充质干细胞,使用AdOPG感染兔BMSCs,以RT-PCR及Western Blot的方法鉴定BMSCs对OPG的表达.比色测定和细胞碱性磷酸酶染色法观察AdOPG感染BMSCs后5 d时碱性磷酸酶(ALP)的表达.结果:克隆获得人OPG基因,测序与Gene bank一致,构建的重组腺病毒AdOPG滴度达109 efu/ml,AdOPG感染BMSCs 5 d后ALP活性值为(21 024±507)IU,AdGFP对照组为(3 079±89)IU,空白对照组为(2 156±78)IU.结论:骨保护素有利于骨髓间充质干细胞向成骨细胞方向分化.