单个核细胞EB病毒DNA载量在鼻咽癌患者中的变化初探

目的探讨外周血单个核细胞EB病毒DNA(Epstein-Barr virus DNA,EB-DNA)在鼻咽癌患者诊疗中的变化和临床意义。 方法选择2014年4月至2017年10月期间,在中国科技大学附属第一医院西区门诊和住院部初诊经病理学确诊为鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)患者220例,年龄12~80岁,按≤30岁~≥71岁的每10岁间隔分为6组,用实时荧光定量聚合酶链反应检测外周血单个核细胞中EB-DNA载量在NPC患者不同性别、年龄、病理类型、临床分期的阳性率和载量的差异;对接受放化疗治疗前后的82例NPC患者的EB-DNA载量变化连续定期随访2年以上,以分析评价其变化与NPC患者复发与转移的关系。 结果220例NPC患者外周血单个核细胞EB-DNA阳性率为41.4%(91/220例),EB-DNA载量为0.0(0.0~612.5)拷贝/ml,但EB-DNA阳性率和载量在不同性别[男42%,女40%;男0.0(0.0~568.0)拷贝/ml,女0.0(0.0~899.5)拷贝/ml]、病理类型患者间的差异均无统计学意义(χ²=0.079,Z=-0.106;χ²=0.024,Z=-1.182;P均>0.05),但EB-DNA阳性率随年龄增长(≤30岁~≥71岁的6个年龄组阳性率分别为23.1%、47.1%、38.6%、36.8%、52.9%、63.6%)和临床分期(TNM分期Ⅱ＋Ⅲ期27.4%、Ⅳ a期45.7%、Ⅳ b期75.0%)不断增高(χ²=3.683,P=0.031;χ²=16.996,P<0.001)。82例随访NPC患者治疗后有57例EB-DNA载量中位数明显低于治疗前[前1390.0(550.0~6535.0)拷贝/ml,后0.0(0.0~0.0)拷贝/ml;Z=-5.997,P<0.001],有25例患者治疗后EB-DNA载量[1490.0(348.5~3965.0)拷贝/ml]高于治疗前[0.0(0.0~205.0)拷贝/ml,Z=-4.529,P<0.001],且两组治疗后EB-DNA载量差异有统计学意义(Z=-6.911,P<0.001),治疗后EB-DNA载量升高的25例NPC患者中有18例发生局部复发或远处转移。 结论NPC患者外周血单个核细胞中EB-DNA载量阳性率随着年龄增长和临床分期的上升不断增高,治疗后定期监测患者EB-DNA载量变化对其预后有一定临床应用价值。     

刚地弓形虫China 1基因型成囊株在小鼠体内的动态分布

目的观察流行我国的刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)主要基因型China 1成囊株在感染小鼠体内的动态分布和包囊形成。方法采自武汉的猫源性刚地弓形虫株(TgCtwh1,基因型为China 1,即ToxoDB#9)包囊50个(约含1×104个缓殖子)经口感染SPF级CD1雌性小鼠50只,于感染后第2、4、7、10、14、21、35、50和72天,分别大体观察小鼠健康状况并测定体重;颈椎脱臼法处死小鼠,脑组织压片观察弓形虫包囊形成时间,计算成囊率,测量包囊直径;荧光定量PCR和组织接种方法检测弓形虫在血液、心、肝、脑和淋巴结组织中的动态分布。结果实验小鼠感染后第7天体重减轻(3.650±0.252)g;第10天[(1.730±0.017)g]与第14天体重差值[(-0.390±0.554)g]比较,有统计学意义(P<0.05)。感染后第21天,在脑组织中查获包囊,成囊率为80%,直径为20～40μm;至感染后第35天,小鼠成囊率增为100%,包囊直径为50～60μm。感染后第2天,TgCtwh1虫体即出现在血液、心、肝和淋巴结组织中,拷贝数分别为3.510±0.152、4.100±0.198、4.220±0.209和4.960±0.052,感染后第4天见于脑组织(3.800±0.154);血液中的虫体在第7天达峰值(5.240±0.115),随后逐渐下降,至第35天消失;心和脑组织中的虫体分别于第14天和第10天达峰值后(5.640±0.214和5.790±0.060)维持相对稳定的水平;肝和淋巴组织中的虫体分别于第7天和第10天达峰值(5.310±0.038和6.200±0.152),此后虫体逐渐减少,至第50天转阴。结论流行中国的弓形虫China 1基因型成囊株在感染小鼠体内虫血症可持续至少21 d,感染后第21天首次在小鼠脑组织内检测到包囊。     

某肿瘤医院儿童血液病患者 TORCH 感染状况研究

目的 研究中国科学技术大学附属第一医院西区(安徽省肿瘤医院)儿童血液病患者 TORCH 感染的状况。方法 选取 2015 年 11 月—2019 年 7 月在该院儿血科住院的 354 例患儿为研究对象,采用化学发光免疫测定仪检测患儿血 TORCH 的 IgG、IgM 抗体,分析 354 例患儿 TORCH 感染模式、年龄和疾病分布状况。 结果 弓形虫(TOX)、风疹病毒(RV)、巨细胞病毒(CMV)IgM 阳性率分别为 0. 6%、4. 2%和 7. 3%;TOX、RV、CMV、单纯疱疹病毒(HSV-Ⅰ、HSV-Ⅱ)的 IgG 阳性率分别为 21. 2%、88. 1%、91. 2%、49. 2%、15. 8%。 合并感染 1 例,为 CMV 和 RV 合并感染。 不同年龄段儿童 RV-IgM、CMV-IgM、RV-IgG、HSV-Ⅰ-IgG 和 HSV-Ⅱ-IgG 阳性率差异有统计学意义。 卡方趋势检验结果显示,RV-IgM、CMV-IgM 和 HSV-Ⅱ-IgG 阳性率随着患儿年龄增加而下降,RV-IgG 和 HSV-Ⅰ-IgG 阳性率随患儿年龄增加而上升。 不同疾病类型的患儿,其 TOX-IgG、HSV-Ⅰ-IgG、HSV-Ⅱ-IgG 阳性率差异有统计学意义。 结论 对血液病患儿开展 TORCH 血清学检测,可明确其感染类型和既往感染情况,为血液病的诊断和治疗提供帮助。     

自制甲状腺激素血清质控品的临床应用

目的探讨自制血清质控品在临床实验室甲状腺激素检测室内质量控制工作中应用的可行性。方法把甲状腺激素检测结果高值患者血清,按一定比例与健康人群血清混合,配成血清质控品,分装后-20℃保存,每次和原装配套质控品同时检测游离甲状腺素(FT4)、游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)、促甲状腺激素(TSH)、甲状腺球蛋白(TG)、甲状腺微球蛋白抗体(TMA)、甲状腺球蛋白抗体(TGA)等6项甲状腺激素项目,检测前观察质控品外观,连续检测6个月,观察其稳定性;利用EXCELL做J-L图,统计6个月内各项目均值、CV和失控次数,评价其在室内质量控制应用中的价值。结果 6个月内自制血清质控品冻溶后外观澄清透明、无沉淀及浑浊;第1、3、6、10、15、30、45、60、90、120天各项甲状腺激素量值未见明显变化;与原装质控品相比,CV值较低。在应用室内质量控制的6个月中,各项目第1、3、6个月及6个月累计结果无明显差异;项目均值及6个月累积均值间比较,未出现漂移或趋势变化;项目CV和累积CV均在控制允许范围内(CV1/3倍总误差);6个月室内质控工作中出现4次失控:13s2次,22s1次,R4s1次。结论自制甲状腺激素血清质控品冷冻保存有较好的稳定性,可替代其进口质控品;在日常室内质控活动,通过EXCELL作J-L图能检测结果的精密度,发现不稳定因素,及时纠正处理以确保甲状腺功能检测结果可靠,有一定的临床应用价值。     

重组果糖二磷酸醛缩酶SjLAP和亮氨酸氨基肽酶SjFBPA用于日本血吸虫病的诊断和疗效考核的评价(英文)

目的评价重组亮氨酸氨基肽酶(rSjLAP)和重组果糖二磷酸醛缩酶(rSjFBPA)抗原用于诊断人血吸虫感染以及疗效考核的价值。方法异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导pET-28a-rSjLAP/BL21和pET-28a-rSjFBPA/BL21表达目的蛋白,组氨酸标签亲和纯化柱纯化rSjLAP和rSjFBPA蛋白。88只BALB/c雌性小鼠随机分为4组,A、B和C组(各21只小鼠),D组(25只小鼠)。A、B和C组分别感染5、15和25条日本血吸虫尾蚴。D组为不感染对照组,在实验的第1天全部处死。A、B和C组在感染后第3、7、10、14、20、30和60天,分别处死小鼠3只,采眼球血制备血清,检测其抗体水平。采用单独或联合rSjLAP和rSjFBPA为抗原,ELISA法检测小鼠血清、急性血吸虫病(38份)和慢性血吸虫病患者(96份)血清中的抗体,以健康人(90份)血清为对照,同时检测华支睾吸虫病(33份)、卫氏并殖吸虫病(40份)和钩虫病患者(37份)血清,并检测急性血吸虫病患者吡喹酮治疗(60 mg/kg,2次/d×2 d)后1年的血清(36份)、慢性血吸虫病患者吡喹酮治疗(剂量,疗程同前)后1年...     

肺癌患者合并肺部感染的病原学和耐药性分析

目的了解该院肺癌患者合并肺部感染的病原学特征和耐药情况,为临床抗菌药物合理应用提供依据。方法回顾分析该院64例肺癌患者合并肺部感染的痰液细菌培养及药敏试验结果。结果共检出致病菌73株,其中革兰阴性杆菌占84.93%(62/73),以肺炎克雷伯菌、鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌为主;革兰阳性球菌占9.59%(7/73),以金黄色葡萄球菌为主;真菌占5.48%(4/73),以白色假丝酵母菌为主。从药敏结果来看,肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌的体外敏感试验均显示较高的敏感性。27.27%(3/11)的鲍曼不动杆菌为多重耐药菌,但对左氧氟沙星、替加环素、头孢哌酮/舒巴坦的耐药率较低。结论肺癌患者肺部感染的主要致病菌是革兰阴性杆菌,应将其作为感染预防和早期经验治疗的重要目标。     

体外胆红素对L-02细胞生长与凋亡的影响

目的探讨胆红素对正常人肝细胞系L-02生长及凋亡的影响。方法将不同浓度的胆红素(终浓度分别为0、100、150、200、250、300 mg/L)作用于体外培养的正常人肝细胞L-02,分别通过光镜、Hoechst 33258荧光染色、四甲基偶氮唑蓝(MTT)法、DNA琼脂糖凝胶电泳、流式细胞仪Annexin-V和PI双标等技术观察不同浓度胆红素对L-02细胞的相对存活率的影响、细胞的凋亡梯度和凋亡率。结果经不同浓度胆红素溶液作用后,L-02细胞的增殖能力明显下降,其作用呈剂量依赖性;光镜观察显示凋亡细胞变圆,体积缩小;Hoechst 33258荧光强染;MTT法发现细胞生长受到抑制;经琼脂糖凝胶电泳发现200、250、300 mg/L胆红素溶液组可见到DNA梯形条带;流式细胞仪检测示各实验组细胞凋亡率为(1.24±0.72)%、(5.88±1.66)%、(19.69±3.52)%、(31.11±6.94)%、(57.3±8.71)%;均明显高于对照组细胞凋亡率(1.16±0.58)%(P<0.01)。结论胆红素可抑制L-02细胞生长并诱导其凋亡。     

胆红素对L-02细胞凋亡以及Bcl-2及Bax体外表达影响的研究

目的探讨胆红素对健康人肝细胞系L-02凋亡的影响及Bcl-2、Bax基因对凋亡过程的调节。方法将不同浓度的胆红素(终浓度分别为0、100、150、200、250、300mg/L)作用于体外培养的健康人肝细胞L-02,采用流式细胞仪和碘化丙啶(PI)双标等技术观察细胞的凋亡率和免疫组织化学方法检测细胞凋亡状态及凋亡相关基因Bcl-2、Bax蛋白的表达。结果 Bcl-2蛋白的表达,对照组为阴性表达,低浓度组弱阳性表达,高浓度组强阳性表达。Bax蛋白的表达,对照组可见表达,低浓度组表达增多,高浓度组明显增多,强阳性表达。表明Bcl-2蛋白表达越强,凋亡指数越少;Bax蛋白表达越强,凋亡指数越强。结论 Bcl-2、Bax蛋白均参与了胆红素所诱导的L-02细胞凋亡的调节,并在细胞凋亡的发生、发展中起重要作用。     

安徽地区宫颈癌患者HPV感染状况及其在放疗疗效监测中的应用

目的分析安徽地区宫颈癌患者HPV感染情况及其亚型分布,探讨宫颈癌患者HPV感染与临床病理特征的相关性及放疗前后HPV DNA拷贝数的变化与放疗疗效的关系。方法选取宫颈癌患者230例,采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测15种常见高危型HPV DNA,分析宫颈癌患者HPV感染的阳性率、亚型分布特征及其与患者年龄、临床分期之间的关系,以及放疗前后HPV DNA拷贝数的变化与放疗疗效的关系。结果 230例宫颈癌患者HPV感染阳性率为83.0%,单一亚型感染阳性率为73.2%,多重亚型感染阳性率为26.8%。宫颈癌患者HPV感染的亚型以16、18和58型为主;HPV感染与患者年龄无关,与患者临床分期有关(P0.05),分期越晚感染率越低。放疗对单一亚型感染的有效率高于多重亚型感染,且放疗有效的患者HPV DNA拷贝数较放疗前减少,放疗无效患者HPV DNA拷贝数有增多趋势。结论安徽地区宫颈癌患者HPV感染以16、18和58型为主,HPV感染的亚型和DNA拷贝数的变化可以作为放疗疗效监测的指标。     

血清人附睾蛋白4在男性肺腺癌中的诊断价值

目的探讨血清人附睾蛋白4(HE4)在男性肺腺癌中的诊断价值。方法采用电化学发光法检测78例确诊的肺癌的男性患者、同时期住院的73例男性肺良性疾病患者和40例男性体检健康者血清中HE4的水平;分析HE4在不同病理类型及TNM分期患者中表达的差异;ROC曲线分析HE4单独检测及与癌胚抗原(CEA)、细胞角蛋白19片段(Cyfra21-1)联合检测对肺腺癌的诊断价值。结果肺腺癌组患者HE4水平显著高于其他病理类型及肺良性疾病和体检健康者(P均0.05);早期肺癌(Ⅰ~Ⅱ期)、Ⅲ期、Ⅳ期肺癌患者HE4水平间差异有统计学意义(P均0.05),早期肺癌(Ⅰ~Ⅱ期)与Ⅳ期肺癌患者HE4水平差异有统计学意义(P0.05)。HE4单独检测诊断男性肺腺癌的敏感性(70.6%)虽不及CEA(76.5%)和Cyfra21-1(91.2%),但特异性(75.2%)显著高于CEA(72.6%)和Cyfra21-1(61.9%)。HE4与CEA、Cyfra21-1联合检测可提高诊断敏感性和特异性至97.1%和91.2%。结论血清HE4对于男性肺腺癌的诊断、肺癌的临床分期具有一定指导意义。HE4与CEA、Cyfra21-1联合检测可提高灵敏度和特异性,具有良好的临床应用价值。