多氯联苯高污染地区人群相关基因表达改变的研究

目的 研究多氯联苯暴露人群外周血相关基因表达改变.方法 采集32例电子垃圾拆解地居民和48例对照人群外周血样,分离提取总RNA,用实时荧光定量PCR检测CCDC92、CCL22、GZMK、MTDH、STK38L、TMEM175等6个基因的mRNA表达水平.结果 根据双标准曲线法,拆解地居民CCL22基因的表达水平为(4.51±2.37)％,低于对照组的(6.76±4.82) ％(t=2.451,P ＜0.05).根据2-△△Ct法,两者的表达水平分别为(0.54±0.28)倍和(0.81±0.58)倍(t=2.480,P＜0.05).根据双标准曲线法,GZMK和MTDH基因的表达水平高于对照组(t=-2.036、-2.228,P＜0.05).根据2-△△Ct法,两者的表达水平也高于对照组(t=-2.035、-2.223,P＜0.05).两种定量方法存在较好的相关性(r=1.000,P＜0.01).结论 CCL22、GZMK和MTDH三个基因在多氯联苯暴露人群中表达异常,可用作多氯联苯暴露人群的效应标志物.     

原代培养大鼠睾丸支持细胞PCB153暴露后超氧化物歧化酶活力和丙二醛含量的时间变化特征

目的 探讨PCB153染毒后原代培养大鼠睾丸支持细胞中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活力和丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量的时间变化特征.方法 原代培养18～20日龄清洁级雄性SD大鼠的睾丸支持细胞.分别加入O(溶剂对照,0.5%DMSO)、10、20、30、40...     

PCB153对人B淋巴母细胞基因表达谱的影响

目的 研究2,2',4,4',5,5'-六氯联苯(2,2',4,4',5,5'-hexachlorobiphenyl,PCB153)对人B淋巴母细胞基因表达谱的影响.方法 采用0(对照)和25、100、200 μmol/L的PCB153分别处理人B淋巴母细胞2、24、48 h,收集细胞后提取总RNA.PCB153处理24 h的RNA样本用Illumina人HT-12 v4全基因组表达谱芯片筛测差异表达基因,并对差异基因进行基因本体论(gene ontology,GO)分类分析.在PCB153处理2、24、48 h样本中用实时定量PCR对候选差异基因进行验证.结果 芯片结果显示,各剂量PCB153处理样本中分别发现161、191、1 006个差异基因,三个剂量组重叠差异基因数为15个,其中,上调基因4个、下调基因11个.选取6个差异基因用定量PCR进行验证,发现2个上调基因(CCDC92和TMEM175)及3个下调基因(CCL22、STK38L和GZMK)的表达改变与芯片结果一致.基因CCDC92、CCL22、GZMK和TMEM175等可影响多种淋巴细胞功能,基因STK38L可作用于细胞周期和细胞凋亡等,基因CCL22和MTDH的异常表达则与多种癌症密切相关.结论 体外急性染毒PCB153干扰了人B淋巴母细胞某些重要功能基因的表达,为多氯联苯毒性的分子作用机制提供了依据.     

PCB153对原代培养大鼠睾丸支持细胞SOD活性、DNA损伤及凋亡的影响

目的：探讨2,2′,4,4′,5-五氯联苯（2,2′,4,4′,5-hexachlorobiphenyl,PCB153）暴露对原代培养大鼠睾丸支持细胞（Sertoli cells,SC）超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）活性、DNA损伤、细胞凋亡的影响以及抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸（N-acetyl-L-cysteine,NAC）的干预作用。方法：原代培养出生18～20d雄性SD大鼠的睾丸支持细胞,设PCB153不同浓度的染毒组（加入10、20、30μmol/L PCB153）,NAC组（以300μmol/L NAC预处理1h后加入30μmol/L PCB153）,和对照组（加入与PCB153最大染毒量等体积的DMSO）,各组细胞经上述处理后继续培养24h,用SOD试剂盒测定各组细胞SOD活性,彗星实验测定DNA损伤程度,流式细胞术检测细胞凋亡,细胞荧光标记观察凋亡形态。结果：染毒24h后,大鼠睾丸支持细胞SOD活性随着PCB153染毒剂量的升高而降低,20、30μmol/L染毒组显著低于对照组（P〈0.05）,NAC预处理可提升SOD活性（P〈0.05）。各PCB153处理组及NAC预处理组与对照组相比,DNA损伤间的差异均无统计学意义（P〉0.05）,细胞凋亡率则均显著增加（P〈0.05）,NAC预处理可降低PCB153所致的凋亡率（P〈0.05）。结论：10～30μmol/L PCB153染毒24h可诱导的原代培养大鼠SCSOD活性降低,细胞凋亡增加,但并未引起DNA损伤,NAC预处理具有保护作用。     

饮水暴露六价铬对SD大鼠外周血DNA损伤和氧化应激的影响

[目的]研究饮水摄入六价铬对大鼠外周血DNA损伤和血浆氧化应激的影响. [方法]取雌、雄SD大鼠各40只随机分为4组,每组10只,每笼2只,4组分别自由摄入饮用水(对照)及30、100、300 mg/L重铬酸钾(K2Cr207)水溶液4周,每周3次记录每笼饮水量并更换现配的K2Cr207溶液.实验结束时测定体重及心、肝、肾、肺、胃、脾组织重量,计算脏器系数和大鼠平均每日饮水量,并测定外周血DNA损伤及血浆中8-羟基脱氧鸟苷(8-hydroxydeoxyguanosine,8-OHdG)和丙二醛(malondialdehyde,MDA)的含量. [结果]雌鼠300mg/L组的体重增加量低于对照组(P＜0.05);雌鼠300 mg/L组、雄鼠100 mg/L和300 mg/L组的平均每日饮水量均低于对照组(P＜0.05,P＜0.01).300 mg/L组雌、雄大鼠DNA损伤均加重(P＜0.05).雌鼠100mg/L和300mg/L组血浆中8-OHdG含量及雌鼠3个剂量组和雄鼠100、300mg/L组血浆中MDA含量均显著高于对照组(P＜0.05,P＜0.01). [结论]饮水暴露Cr(Ⅵ)可致大鼠外周血DNA损伤加重,并使血浆中8-OHdG和MDA的含量升高.