氟西汀对抑郁大鼠治疗的作用机制

目的:观察氟西汀对抑郁大鼠治疗的作用机制。方法:选取30只成年雄性SD大鼠,按照随机数字表随机分为正常组、模型组、氟西汀组,每组10只。采用慢性温和不可预见性应激刺激(Chronic unpredictable mild stress,CUMS)合并孤养法建立大鼠抑郁模型,在CUMS刺激4W后氟西汀组灌胃给予氟西汀(10mg·kg-1)2W;正常组及模型组同时灌胃等体积的生理盐水。通过体重变化、蔗糖水消耗和旷场实验对大鼠进行行为学检测,HE染色观察海马神经元形态及数目改变;蛋白印迹和RT-PCR测定海马组织突触素(Synaptophysin,SYP)和突触后密致蛋白-95(Postsynaptic density-95protein,PSD-95)白及mRNA的表达水平。结果:与正常组相比,模型组4个时间点(7d,14d,21d,28d)行为学评分升高(P0.05)。与模型组比较,氟西汀组4个时间点行为学评分明显降低(P0.05)。HE结果显示,模型组海马神经元排列紊乱,细胞层变薄;Western blot结果显示,与正常组相比,模型组的SYP蛋白表达显著下降,PSD-95的蛋白水平显著升高;RT-PCR结果显示,模型组大鼠海马PSD-95mRNA表达显著升高,SYP mRNA表达较正常组显著降低(P0.05)。结论:氟西汀可明显促进CUMS大鼠神经元突触重塑,其机制可能与上调CUMS大鼠海马组织中SYP的表达,抑制PSD-95表达相关。     

去血清饥饿法对卵巢颗粒细胞自噬因子LC3和Beclin-1表达的影响

目的观察去血清饥饿法对卵巢颗粒细胞自噬因子LC3和Beclin-1表达的影响。方法用去血清的培养液诱导处于对数生长期的颗粒细胞,0、4、12、24 h后用单丹磺酰戊二胺(MDC)荧光染色法检测自噬体的形成,反转录-聚合酶链反应(RT-PCT)和Western blot方法分别检测颗粒细胞微管相关蛋白1轻链3(MAPLC3)和Beclin-1 mRNA和蛋白的表达。结果随着去血清时间的延长,MDC阳性细胞数及自噬泡数量增多;4 h后LC3-Ⅱ及Beclin-1mRNA表达开始增加,且随着时间增加有增加趋势[LC3-Ⅱ:(0.21±0.02)、(0.45±0.12)、(0.60±0.05)、(0.74±0.03),P0.05;Beclin-1:(0.20±0.06)、(0.37±0.11)、(0.52±0.07)、(0.69±0.07),P0.05];4 h后蛋白LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值增加,Beclin-1蛋白表达亦增加,且随时间增加有增加的趋势[LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ:(0.12±0.05)、(0.32±0.09)、(0.63±0.07)、(0.92±0.04),P0.01;Beclin-1:0,(61±0.01)、(0.83±0.11)、(1.09±0.05)、(1.35±0.10),P0.05]。结论去血清饥饿可诱导颗粒细胞自噬的发生,这可能与卵泡发育和闭锁的发生、发展有关。     

PUMA在卵巢衰老中的作用研究进展

卵子储存在原始卵泡中,每个卵泡都包含一个未成熟的卵母细胞,该卵母细胞被单层颗粒细胞包裹。PUMA(p53-up-regulated modulator of apoptosis)作为调节生殖细胞死亡的关键因子,在卵子迁移阶段和性腺中卵母细胞数量的维持方面发挥重要作用。PUMA是卵巢发育过程中生殖细胞数量的关键决定因素,PUMA敲除可以保护诱导DNA损伤的原始卵泡,维持卵泡正常生育能力。本文综述PUMA在卵母细胞数量维持、DNA损伤的原始卵泡以及颗粒细胞凋亡中的作用机制,为预防卵巢早衰提供新的思路。     

Daxx抑制K562细胞向巨核细胞分化

目的:观察过表达死亡结构域相关蛋白(Daxx)对K562细胞活力和向巨核细胞分化的影响。方法:建立稳定过表达Daxx的K562细胞,荧光显微镜观察、实时荧光定量PCR和Western blot检测Daxx的过表达效果,CCK-8法检测过表达后细胞活力的变化;佛波酯(PMA)诱导K562细胞向巨核细胞系分化,Western blot检测在K562细胞向巨核细胞分化过程中Daxx和p-ERK的表达变化,流式细胞术检测CD41和CD61的表达变化;PMA处理过表达Daxx的K562细胞,NBT还原实验检测细胞分化情况,流式细胞术检测过表达Daxx后CD41和CD61的表达变化,Western blot检测p-ERK的蛋白水平。结果:建立了稳定的过表达Daxx的K562细胞,过表达Daxx抑制K562细胞的活力。PMA诱导K562细胞向巨核细胞分化,CD41和CD61表达水平增高,同时p-ERK的蛋白水平升高,Daxx表达水平下降。过表达Daxx可以抑制K562细胞向巨核细胞分化,CD41和CD61表达降低,同时p-ERK的蛋白水平降低。结论:过表达Daxx可以抑制K562细胞生长及向巨核细胞分化,同时抑制ERK的磷酸化。     

临床医学五年制《系统解剖学》试卷库建设的实践与探索

<正>优质的教学质量是学校赖以生存与发展的根本保证,也是教育工作的最终目标。考试仍然是目前主要[1]采用的教学质量检验方法。近年来,嘉兴学院医学院为迎接临床医学专业论证做准备,加大了临床医学专业课程试卷库建设和教考分离工作,并将其列为各课程建设的重点。笔者就新形势下教考分离的意义、作用等方面进行分析,并结合我国新建本科院校临床     

5-羟色胺系统在肠易激综合征内脏感觉过敏机制中的作用研究

目的:研究检测5-羟色胺(5-HT)系统在脑-肠轴上的表达,探索肠易激综合征内脏感觉过敏的神经机制。方法:将新生期SD雄性大鼠随机分为两组,母婴分离组(实验组),在出生后第2～21天,每天将新生大鼠与哺乳期母鼠分离3 h;对照组在出生后第2～21天,不给予任何处理。成年后(出生后60 d)进行结直肠球囊扩张(Colorectal distcnsion,CRD),用免疫组化方法检测脊髓背角、脑干中缝背核5-HT神经元的表达和分布。结果:母婴分离组CRD后中缝背核5-HT免疫反应阳性细胞的数量为(40.67±4.73)个,脊髓背角5-HT免疫反应阳性细胞的数量为(20.67±2.08)个,均较对照组显著增加,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:新生期母婴分离引起大鼠5-HT系统在中枢改变,提示早期生活事件所致5-HT系统的异常可能在肠易激综合征内脏感觉过敏发生机制中起重要作用。     

基于轮转调度模型的循环模式实验运行改革

为了提高实验设备利用率,降低实验设备损耗率,节约教学资源,提高实验教学的运行管理效率,降低实验教学、管理人员的劳动强度和管理难度,提高学生的实验资源的分配率,提高实验教学质量。我院集中人体解剖学实验室教学资源;在培养方案的基础上,优化实验项目;模块化分配组合各实验项目与实验资源,进行轮转调度、循环进行各实验项目。对于临床医学和护理学两个专业有差别的实验项目在实验运行过程中进行微调。通过改革,解决了人体解剖学实验室资源在传统的"一过性"、"爆发性"利用难题,提高了实验设备的利用率,提高了学生的各实验项目人均资源占有率,极大降低了实验设备的损耗率,节约了实验教学资源购置,降低了实验教学、管理人员的劳动强度和管理难度,提高了教学质量。     

3-甲基腺嘌呤对Aβ(25-35)引起的海马神经元凋亡的影响

目的: 探讨阿尔茨海默病(AD)大鼠海马神经元自噬对凋亡的影响。方法: SD大鼠随机分成模型组、自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)预处理组和对照组。模型组大鼠用立体定位技术对海马CA1区微量注射Aβ(25-35)造成AD模型;3-MA预处理组大鼠在注射Aβ(25-35)之前对海马CA1区微量注射3-MA。Morris水迷宫检测大鼠记忆水平;行为学测试后,观察海马神经元超微结构变化、自噬泡的形成、beclin-1的表达以及细胞凋亡情况。结果: 3-MA预处理组与模型组比较,大鼠学习记忆能力显著下降(P<0.05),海马神经元凋亡率显著增加(P<0.05),而beclin-1的表达量减少;模型组海马神经元可见双层膜包裹形成的自噬泡,神经元破坏程度明显轻于3-MA预处理组。结论: 抑制神经元自噬水平增加神经元凋亡;诱导神经元自噬可能是防治阿尔茨海默病的一个潜在方法。     

神经细胞自噬在阿尔茨海默病中的作用机制

细胞自噬的过程,称为细胞的废物管理或内务管理系统,消除了一些回收到细胞质的"废弃"物质和其本身的废组织.自噬途径是负责细胞碎片如损坏的细胞器和细胞内溶酶体降解的大分子的降解过程.根据底物进入溶酶体途径的不同可分为微自噬、巨自噬和分子伴侣介导的自噬[1].自噬形式研究最多的是它可以在各种应激条件下诱导,越来越多的证据表明,自噬除了可以为细胞提供能源外,还可以表现在正常的生理和病理状态过程中,如发育,细胞死亡,衰老,抗原提呈,细菌降解,肿瘤抑制等[2].这种现象不可能在所有的真核细胞得到证实,但至少在哺乳动物细胞中保持基础水平的吞噬蛋白质和细胞器是维持细胞内正常周期的必要程序.基础水平的自噬活动在分裂后的细胞中至关重要的.如神经元,可能是因为他们无法通过细胞自身的功能降解蛋白质和细胞器[3,4].     

流式细胞仪分析不同方法分离母血中胎儿有核红细胞的效果

目的探讨不同的方法从母体外周血中分离胎儿有核红细胞的最佳方案。方法分别用密度为10771、11191、10771/11191的细胞分离液密度梯度离心和CD235a、CD71、CD71/CD235a抗体免疫磁珠分离的不同组合,分离后用HbF-FITC荧光抗体标记,流式细胞仪检测,分析各种分离方案从母体外周血中分离胎儿有核红细胞的效果。结果密度为10771细胞分离液与CD71、CD235a、CD71/CD235a免疫磁珠组合,流式细胞仪检测分离的结果为0.27、0.48、1.15,密度为11191细胞分离液与CD71、CD235a、CD71/CD235a免疫磁珠组合,流式细胞仪检测的分离结果为0.18、1.64、5.73,密度为10771/11191的细胞分离液与CD71、CD235a、CD71/CD235a免疫磁珠组合,流式细胞仪检测的分离结果为0.94、2.06、6.21。不同组合之间比较P<0.05,有明显差异。结论用密度为10771/11191的细胞分离液和抗体为CD71/CD235a的免疫磁珠组合分离到的NRBC比例最高。