母血中胎儿有核红细胞用于无创产前诊断的研究

目的 用分离到的胎儿有核红细胞,评价应用荧光原位杂交技术筛查染色体非整倍性的临床应用价值.方法 43例(孕周17～21+4周)拟行产前诊断的孕妇外周血20ml,用双密度梯度离心和双抗体磁性活化细胞分选(magnetic activated cell sorting,MACS)方法富集孕妇外周血中胎儿有核红细胞,其中10例患者富集的细胞进行吉姆萨-瑞氏染色,10例进行抗人CD235a和CD71免疫荧光抗体染色,行细胞鉴定和计数.23例富集后的细胞用荧光染色体原位杂交(fluorescence chromosomal in situ hybridization,FISH)探针进行非整倍体分析,并与羊水培养后核型分析结果进行比较.结果 所有标本均分离出有核红细胞,并经组织学染色、免疫荧光特异抗体和FISH鉴定.23例FISH诊断中,未发现非整倍体异常;14例男性胎儿有13例发现Y荧光信号,1例未发现,女性胎儿中均发现2个X荧光信号.结论 荧光原位杂交技术可对经富集的孕妇外周血中胎儿细胞进行非整倍体诊断.     

胚胎发育与环境激素的影响

背景：自然环境中胚胎发育异常,性行为异常,生物两性化以及种族繁殖数量减少等现象的发生概率升高与环境激素有关。随着环境污染的日趋加重,环境激素对胚胎发育的影响已日茄受到重视。目的：分析环境激素对早期胚胎着床、着床前期早期胚胎发育及其对胚胎期胚胎的生殖系统发育的影响及其机制。方法：使用环境激素及己烯雌酚、米非司酮、甲氧滴滴涕、胚胎发育、胚胎早期发育等关键词,检索中国知识资源总库与PubMed数据库中的相关研究论文,分析环境激素对不同时期胚胎发育的影响。结果与结论：纳入45篇符合标准的文献。环境激素广泛存在于日常生活中,种类繁多,作用机制复杂多样,且不同环境激素之间可能还存仡协同作用,对分子水平的机制探索还处于初级阶段。控制环境激素生成源,尽量减少人为排放是降低环境激素对人类健康影响的厦要措施。     

胚胎发育与环境激素的影响***

背景：自然环境中胚胎发育异常,性行为异常,生物两性化以及种族繁殖数量减少等现象的发生概率升高与环境激素有关。随着环境污染的日趋加重,环境激素对胚胎发育的影响已日益受到重视。 目的：分析环境激素对早期胚胎着床、着床前期早期胚胎发育及其对胚胎期胚胎的生殖系统发育的影响及其机制。 方法：使用环境激素及己烯雌酚、米非司酮、甲氧滴滴涕、胚胎发育、胚胎早期发育等关键词,检索中国知识资源总库与PubMed数据库中的相关研究论文,分析环境激素对不同时期胚胎发育的影响。 结果与结论：纳入45篇符合标准的文献。环境激素广泛存在于日常生活中,种类繁多,作用机制复杂多样,且不同环境激素之间可能还存在协同作用,对分子水平的机制探索还处于初级阶段。控制环境激素生成源,尽量减少人为排放是降低环境激素对人类健康影响的重要措施。     

IL-24基因重组腺病毒载体转染的树突状细胞促进宫颈癌CaSki细胞凋亡

 目的：探讨白细胞介素24(interleukin-24,IL-24) 基因重组腺病毒载体转染的树突状细胞(dendri-tic cells,DCs)是否在体外诱导细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic T-lymphocytes,CTLs)对宫颈癌CaSki细胞的杀伤效应。方法：分离培养小鼠未成熟DCs,将已成功构建的带有IL-24基因的重组腺病毒感染体外培养的小鼠未成熟DCs,提取CaSki细胞裂解物负载DCs,制备DC疫苗,Western blotting检测IL-24蛋白的表达;PE-Annexin V和Western blotting检测细胞凋亡及cleaved caspase-3表达;克隆形成实验检测克隆形成能力;裸鼠荷瘤模型体内研究带有IL-24基因的重组腺病毒载体转染DCs在体外诱导的CTLs对宫颈癌CaSki细胞的杀伤效应。结果：Western blotting检测IL-24蛋白高表达;DCs疫苗诱导产生的CTLs后与CaSki细胞共培养,对CaSki细胞生长具有明显的抑制作用, DCs疫苗诱导产生的CTLs促进CaSki细胞凋亡,增加cleaved caspased-3蛋白表达,克隆形成实验检测该疫苗具有抑制CaSki细胞形成克隆的能力。裸鼠的成瘤实验表明,带有IL-24基因的重组腺病毒载体转染DCs可以抑制体内肿瘤的形成,促进肿瘤细胞凋亡。结论：IL-24基因重组腺病毒感染DCs制备的DCs疫苗可诱导CTLs,从而抑制宫颈癌CaSki细胞增殖,并促进其凋亡。     

去血清饥饿法对卵巢颗粒细胞自噬因子LC3和Beclin-1表达的影响

目的观察去血清饥饿法对卵巢颗粒细胞自噬因子LC3和Beclin-1表达的影响。方法用去血清的培养液诱导处于对数生长期的颗粒细胞,0、4、12、24 h后用单丹磺酰戊二胺(MDC)荧光染色法检测自噬体的形成,反转录-聚合酶链反应(RT-PCT)和Western blot方法分别检测颗粒细胞微管相关蛋白1轻链3(MAPLC3)和Beclin-1 mRNA和蛋白的表达。结果随着去血清时间的延长,MDC阳性细胞数及自噬泡数量增多;4 h后LC3-Ⅱ及Beclin-1mRNA表达开始增加,且随着时间增加有增加趋势[LC3-Ⅱ:(0.21±0.02)、(0.45±0.12)、(0.60±0.05)、(0.74±0.03),P0.05;Beclin-1:(0.20±0.06)、(0.37±0.11)、(0.52±0.07)、(0.69±0.07),P0.05];4 h后蛋白LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值增加,Beclin-1蛋白表达亦增加,且随时间增加有增加的趋势[LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ:(0.12±0.05)、(0.32±0.09)、(0.63±0.07)、(0.92±0.04),P0.01;Beclin-1:0,(61±0.01)、(0.83±0.11)、(1.09±0.05)、(1.35±0.10),P0.05]。结论去血清饥饿可诱导颗粒细胞自噬的发生,这可能与卵泡发育和闭锁的发生、发展有关。     

褪黑素免疫功能的研究进展

褪黑素不但是体内的强自由基清除剂和抗氧化剂,同时还具有调节生物钟、促进睡眠、抗肿瘤、增强免疫和抗衰老等多种功效;褪黑素对机体具有一定的免疫调节作用,对机体病毒感染也能有一定的保护作用;褪黑素还能参与粘膜免疫作用。本文就褪黑素的相关免疫功能作一综述。     

哺乳动物卵母细胞退化机制

卵子的发育、成熟是一个非常复杂的动态过程,它主要由两方面的因素调控:①通过下丘脑—垂体—卵巢所释放的激素,即中枢神经内分泌进行调节。激素是促进卵母细胞成熟的重要物质,如促性腺激素、性激素及类固醇激素等;②通过卵巢内微环境中的细胞因子,即卵巢内微环境局部的卵泡膜细胞、颗粒细胞以及卵母细胞等产生的自分泌和旁分泌调节因子,直接调控卵子的发育和成熟。减数分裂紊乱以及细胞分裂基因的表达异常是人类以及其他高龄哺乳动物卵母细胞退化的主要机制之一。     

小鼠卵巢颗粒细胞适宜培养体系及激素干预的影响

背景：建立稳定、高效的颗粒细胞体外培养体系,可了解颗粒细胞体外生长的特点与基本生物学特性。目的：建立并优化小鼠卵巢颗粒细胞原代培养体系,探讨孕马血清促性腺激素、人绒毛膜促性腺激素对细胞增殖与细胞骨架的影响。方法：分离小鼠卵巢颗粒细胞,分别培养于RPMI1640、HTF与BIO-AMF2培养系统,将分离得到的第3代颗粒细胞培养体系中添加人绒毛膜促性腺激素与孕马血清促性腺激素进行干预。结果与结论：BIO-AMF2培养体系优于RPMI1640、HTF培养体系,原代培养第4天可见细胞汇合成片呈铺路石样生长,颗粒细胞C-kit免疫组化染色呈阳性,细胞周期测定表明体外培养的颗粒细胞大部分处于G1期。在颗粒细胞培养后第2天,激素对颗粒细胞的增殖即显现促进作用,在第4天最为显著,但未发现激素对颗粒细胞的细胞形态与细胞骨架有显著影响。     

临床检验中影响尿液检验结果的因素探讨

目的分析观察临床检验中影响尿液检验结果的因素探讨。方法选取2017年1月至2017年12月我院接受检验的540份尿液标本作为观察对象,对其尿液样本资料进行回顾性分析,探究影响尿液检验结果的因素。结果 540份尿液标本中,检验不合格11份,检验不合格率2.04%。经分析,其中健康体检者标本污染所致1例;5例门诊标本中:标本标记错误1例、标本污染2例、超时送检2例;5例住院标本中,2例标本污染、3例送检超时。结论尿液检验中影响因素较复杂、多样,为保证尿液检验结果的准确性,尿常规检验必须严格依照相关标准,保证检验流程的科学、规范,减少尿常规检验误差发生率。     

Daxx抑制K562细胞向巨核细胞分化

目的:观察过表达死亡结构域相关蛋白(Daxx)对K562细胞活力和向巨核细胞分化的影响。方法:建立稳定过表达Daxx的K562细胞,荧光显微镜观察、实时荧光定量PCR和Western blot检测Daxx的过表达效果,CCK-8法检测过表达后细胞活力的变化;佛波酯(PMA)诱导K562细胞向巨核细胞系分化,Western blot检测在K562细胞向巨核细胞分化过程中Daxx和p-ERK的表达变化,流式细胞术检测CD41和CD61的表达变化;PMA处理过表达Daxx的K562细胞,NBT还原实验检测细胞分化情况,流式细胞术检测过表达Daxx后CD41和CD61的表达变化,Western blot检测p-ERK的蛋白水平。结果:建立了稳定的过表达Daxx的K562细胞,过表达Daxx抑制K562细胞的活力。PMA诱导K562细胞向巨核细胞分化,CD41和CD61表达水平增高,同时p-ERK的蛋白水平升高,Daxx表达水平下降。过表达Daxx可以抑制K562细胞向巨核细胞分化,CD41和CD61表达降低,同时p-ERK的蛋白水平降低。结论:过表达Daxx可以抑制K562细胞生长及向巨核细胞分化,同时抑制ERK的磷酸化。