张家口地区乙肝感染者基因型分布特征及与免疫应答关系研究

目的 探讨张家口地区乙肝感染者基因型分布特征及与免疫应答关系。方法 选取2019年8月至2022年1月于河北北方学院第一附属医院进行乙型肝炎病毒（HBV）基因型及免疫应答检测的乙肝患者作为病例组,另外招募健康体检者作为健康对照组。分析乙肝感染患者HBV基因型分布特点,比较乙肝感染患者HBV B、C基因型间血清HBeAg、HBV-DNA水平差异,乙肝患者与健康体检者血清IFN-γ、IL-4、IFN-γ/IL-4、IL-17、IL-23水平差异,乙肝感染患者HBV B、C基因型间血清IFN-γ、IL-4、IFN-γ/IL-4、IL-17、IL-23水平差异。结果 2 968例张家口地区乙肝感染患者HBV基因型以B基因型（39.05%）和C基因型（57.01%）为主,男女性平均年龄、HBV基因型分布无显著差异（P>0.05）;C基因型血清HBsAg浓度和HBV-DNA拷贝数均高于B基因型（P<0.01）;乙肝患者血清IFN-γ、IL-4、IL-17、IL-23水平显著高于健康体检者,IFN-γ/IL-4低于健康体检者（P<0.01）;C基因型血清IFN-γ/IL-4低于B基因型,IL-17、IL-23高于B基因型（P<0.01）。结论 张家口地区乙肝感染者主要以感染C、B型HBV为主,C、B型可能与血清病毒学指标及HBV相关免疫应答有关。     

骨髓间充质干细胞及其向肝样细胞分化的潜能

背景：研究表明,在一定条件下骨髓间充质干细胞可诱导分化为肝样细胞,为治疗急性肝衰竭等终末期肝病提供了新的思路。目的：对骨髓间充质干细胞的发现、分离培养、诱导分化及应用前景等方面做一综述。方法：计算机检索中国期刊网全文数据库以及PubMed数据库1999至2014年期间有关骨髓间充质干细胞及其向肝样细胞分化的文章。检索词分别为“肝样细胞,骨髓间充质干细胞,细胞分化”和“hepatocyte-like cel s, bone marrow mesenchymal stem cel s,differentiation”。最后选择52篇文章纳入结果分析。结果与结论：目前,肝组织工程的首要问题是寻找性状稳定具有肝特异性功能的种子细胞,成熟肝细胞获取难度较大,并具有产生免疫排斥反应、体外培养困难等缺陷,严重限制了肝移植的开展。骨髓间充质干细胞具有多向分化、自我更新快、易于扩增及培养等优点,被认为是最有前途的细胞来源。已有研究表明骨髓间充质干细胞在体内外均可分化为肝细胞,并具有肝细胞的合成和分泌功能。但如何大量扩增此类细胞的同时又能保持其良好的分化潜能、体外培养的最佳条件、诱导分化机制和临床应用的安全性等尚需进一步研究和探讨。     

骨髓间充质干细胞向肝样细胞的诱导及分化

背景：研究表明,在体外提供肝细胞及成纤维细胞生长因子等多种因子可诱导骨髓间充质干细胞向肝样细胞分化,但对其诱导的最佳环境还处于摸索阶段。目的：观察体外应用肝细胞生长因子和成纤维生长因子 4 等多种因子联合诱导骨髓间充质干细胞向肝样细胞的分化能力。方法：采用全骨髓贴壁培养法分离、扩增大鼠骨髓间充质干细胞,培养第 3 代时用肝细胞生长因子、成纤维生长因子 4、胰岛素铁硒传递蛋白及地塞米松等联合诱导其向肝样细胞的分化。于诱导 7,14,21 d 后观察细胞形态变化,RT-PCR 检测细胞白蛋白、甲胎蛋白、细胞角蛋白的 mRNA 表达;于诱导 14,21 d 行 PAS 糖原染色检测,并采用免疫细胞荧光法检测细胞白蛋白表达。结果与结论：随着诱导时间的延长,骨髓间充质干细胞表现为肝细胞样,并呈集落生长,肝细胞特异性标志物逐渐出现和成熟。细胞诱导至 7 d 出现甲胎蛋白 mRNA 表达,14 d 表达增高,21 d 时表达下降;14 d 时细胞角蛋白 18、白蛋白 mRNA和糖原出现表达,并随时间延长表达逐渐增加。细胞诱导 14 d 时,胞浆白蛋白出现表达,至 21 d 时表达增强。证实骨髓间充质干细胞在肝细胞生长因子、成纤维生长因子 4 等多种因子诱导作用下,具有强大的向肝细胞分化能力。     

张家口地区白细胞介素-28B基因单核苷酸多态性与肝细胞癌的相关性研究

目的 探讨白细胞介素-28B（IL-28B）基因rs12979860位点单核苷酸多态性与张家口居民肝细胞癌遗传易感性的关联及与环境因素间的交互作用。方法 采用以医院为基础1[DK]∶1配比病例对照研究方法,选取肝细胞癌患者218例作为观察组,同期健康体检者218例作为对照组,应用改良多重高温连接酶检测反应技术检测两组IL-28B基因rs12979860位点单核苷酸多态性。采用二分类logistic回归模型分析IL-28B基因rs12979860位点单核苷酸多态性与肝细胞癌遗传易感性的关系,并探究rs12979860位点单核苷酸多态性与环境因素的交互作用对肝细胞癌发病影响。结果 对照组与观察组间IL-28B基因rs12979860位点基因型分布差异无统计学意义（P>0.05）。IL-28B基因rs12979860位点T等位基因可增加肝细胞癌发病风险（P<0.05）。分层分析发现,在饮酒、乙型肝炎病毒（HBV）及丙型肝炎病毒（HCV）感染人群中rs12979860位点TT基因型相比TC+CC基因型,肝细胞癌发病风险升高,差异具有统计学意义（P<0.05）。交互作用分析示,IL-28B基因rs12979860位点单核苷酸多态性与饮酒、HBV及HCV感染均存在正交互作用。结论 在张家口地区,IL-28B基因rs12979860位点单核苷酸多态性与肝细胞癌遗传易感性明显相关,并与饮酒、HBV及HCV感染存在正交互作用,可增加肝细胞癌发病风险。     

ABT737对ZM447439促进乳腺癌细胞凋亡的影响

目的探讨ABT737对ZM447439诱导乳腺癌细胞凋亡的影响。方法采用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)测定ZM447439对乳腺癌细胞增殖的影响;克隆形成实验检测ZM447439对乳腺癌细胞增殖的影响;流式细胞术检测ZM447439对乳腺癌细胞周期各时相的影响。Western印迹检测ZM447439及联合组(ABT737+ZM447439)对Aurora A、p-Aurora A、组蛋白(Histone)H3、p-Histone H3、细胞周期蛋白(Cyclin)B1、p-cdc25c、cdc25c、p-cdc2、cdc2、p21、p53、Bax、Bcl-2、Bcl-xl、PARP、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase)3的影响。荧光染料法检测单药组(ABT737、ZM447439)和联合组(ABT737+ZM447439)凋亡细胞,FITC Annexin-Ⅴ流式细胞术显示单药组和联合组细胞凋亡率。结果不同浓度的ZM447439处理乳腺癌细胞24、48、72 h明显抑制细胞增殖;克隆形成实验显示ZM447439对克隆形成的影响呈现剂量依赖性;Western印迹显示Aurora A、Histone H3无明显趋势变化,p-Aurora A、p-Histone H3、Cyclin B1、Bcl-2、Bcl-xl随着浓度的增加而减少,p-cdc25c、p-cdc2、p21、p53、Bax、PARP、Caspase3随浓度增加而增加,均呈现一定的剂量依赖性,且联合组的表达更明显;流式细胞术G2/M期的阻滞呈现剂量依赖性,免疫荧光和FITC Annexin-Ⅴ流式细胞术显示联合组的凋亡明显。结论 ABT737可促进ZM447439乳腺癌细胞凋亡,使两种靶向治疗药物的联合应用成为可能。     

骨髓间充质干细胞向肝样细胞的诱导及分化

背景:研究表明,在体外提供肝细胞及成纤维细胞生长因子等多种因子可诱导骨髓间充质干细胞向肝样细胞分化,但对其诱导的最佳环境还处于摸索阶段.目的:观察体外应用肝细胞生长因子和成纤维生长因子4等多种因子联合诱导骨髓间充质干细胞向肝样细胞的分化能力.方法:采用全骨髓贴壁培养法分离、扩增大鼠骨髓间充质干细胞,培养第3代时用肝细胞生长因子、成纤维生长因子4、胰岛素铁硒传递蛋白及地塞米松等联合诱导其向肝样细胞的分化.于诱导7,14,21 d后观察细胞形态变化,RT-PCR检测细胞白蛋白、甲胎蛋白、细胞角蛋白的mRNA表达;于诱导14,21 d行PAS糖原染色检测,并采用免疫细胞荧光法检测细胞白蛋白表达.结果与结论:随着诱导时间的延长,骨髓间充质干细胞表现为肝细胞样,并呈集落生长,肝细胞特异性标志物逐渐出现和成熟.细胞诱导至7 d出现甲胎蛋白mRNA表达,14 d表达增高,21 d时表达下降;14 d时细胞角蛋白18、白蛋白 mRNA和糖原出现表达,并随时间延长表达逐渐增加.细胞诱导14 d时,胞浆白蛋白出现表达,至21 d时表达增强.证实骨髓间充质干细胞在肝细胞生长因子、成纤维生长因子4等多种因子诱导作用下,具有强大的向肝细胞分化能力.     

β-连环素与原发性肝癌术后复发和转移的相关性

目的:探讨β-连环素在肝细胞癌(hepatic cell carcinoma,HCC)的表达及与肝癌术后复发、转移的关系.方法:采用免疫组织化学方法对比观察手术前TNM分期相同,术后1年内出现复发和/或转移的HCC与未出现复发和/或转移的HCC患者癌组织及癌旁组织中-连环素的表达及其与临床病理特征的关系.结果:癌组织β-连环素细胞膜表达降低,异常表达率达60%(24/40),明显高于癌旁肝组织15%(6/40),两组相比具有统计学意义(2=17.28,P<0.001);而在癌旁组织中无论是否伴有肝硬化,-连环素表达无差异(2=0.388,P=0.533);β-连环素在复发和转移HCC患者中的异常表达率高达80.0%(16/20),明显高于未发生复发或转移组40.0%(8/20),两组相比具有统计学意义(2=6.667,P=0.010);β-连环素异常表达与患者年龄、肿瘤大小、分化程度及是否伴有肝硬化均无明显相关性(P>0.05),但与肿瘤的复发和转移有关(P<0.05).结论:β-连环素的异常表达可能与HCC的发生及术后复发、转移有关.有可能作为HCC恶性程度及预后判断的预测指标.     

骨髓间充质干细胞及其向肝样细胞分化的潜能

背景：研究表明,在一定条件下骨髓间充质干细胞可诱导分化为肝样细胞,为治疗急性肝衰竭等终末期肝病提供了新的思路。 目的：对骨髓间充质干细胞的发现、分离培养、诱导分化及应用前景等方面做一综述。 方法：计算机检索中国期刊网全文数据库以及PubMed数据库1999至2014年期间有关骨髓间充质干细胞及其向肝样细胞分化的文章。检索词分别为“肝样细胞,骨髓间充质干细胞,细胞分化”和“hepatocyte-like cells,bone marrow mesenchymal stem cells,differentiation”。最后选择52篇文章纳入结果分析。 结果与结论：目前,肝组织工程的首要问题是寻找性状稳定具有肝特异性功能的种子细胞,成熟肝细胞获取难度较大,并具有产生免疫排斥反应、体外培养困难等缺陷,严重限制了肝移植的开展。骨髓间充质干细胞具有多向分化、自我更新快、易于扩增及培养等优点,被认为是最有前途的细胞来源。已有研究表明骨髓间充质干细胞在体内外均可分化为肝细胞,并具有肝细胞的合成和分泌功能。但如何大量扩增此类细胞的同时又能保持其良好的分化潜能、体外培养的最佳条件、诱导分化机制和临床应用的安全性等尚需进一步研究和探讨。中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程全文链接：     

2012~2016年张家口某院老年住院患者下呼吸道感染病原菌分布及耐药性分析

[目的]探讨老年住院患者下呼吸道病原菌分布情况及其耐药性.[方法]选取2012年3月至2016年5月在本院住院治疗并发生下呼吸道感染的老年患者296例为研究对象,收集所有入选老年患者下呼吸道的痰标本,进行细菌培养基分离鉴定,同时进行药敏试验,对病原菌分布情况及耐药性进行分析.[结果]296例老年下呼吸道感染患者的标本中分离出病原菌312株,革兰阴性菌173株,占55.45%,主要以肺炎克雷伯菌(23.72%)、鲍氏不动杆菌(13.46%)为主,革兰阳性菌102株,占32.69%,主要以金黄色葡萄球菌(12.82%)为主,真菌37株,占11.86%,主要以白色假丝酵母菌为主(4.81%);三种主要的革兰阴性菌对氨曲南、头孢曲松的耐药性相对较高,对哌拉西林/他唑巴坦、头孢哌酮/舒巴坦、亚胺培南的耐药性较低,最低的为亚胺培南;主要革兰阳性菌对青霉素、头孢唑啉、庆大霉素及苯唑西林的耐药性较高,其中最高的为青霉素,较低的为左氧氟沙星、利福平、万古霉素、替考拉宁.[结论]2012~2016年本院老年患者下呼吸道感染病原菌主要以革兰阴性菌为主,应根据药敏试验结果合理应用抗菌药物.     

张家口地区社区获得性肺炎样综合征病因特征回顾性分析

目的回顾性研究张家口地区近3年社区获得性肺炎样综合征患者病因学特征,为临床的快速诊断及经验性治疗提供指导性意见。方法纳入2015年8月至2018年8月期间张家口地区门诊或住院初始诊断为社区获得性肺炎样综合征的患者471例,根据患者年龄分为青年组(年龄≤29岁)89例、中青年组(30≤年龄≤39岁)124例、中年组(40岁≤年龄≤49岁)177例、老年组(年龄≥50岁)81例。收集各组患者的临床病历资料,探究不同年龄组社区获得性肺炎样综合征的临床特征及病因学特征。结果①各组患者病程时长比较,青年组病程时长明显低于平均值,老年组病程时长明显高于平均值,中青年组与中年组病程时长差异无统计学意义(P>0.05);②患者社区获得性肺炎样综合征的季节性统计,总体上秋季发病率(48.20%)高于春(13.06%)、夏(16.77%)、冬(21.97%)3季。各组中老年组以秋冬发病为主,与青年组、中青年组、中年组差异有统计学意义(P=0.0313);③患者CURB-65评分比较,组间比较,青年组、中青年组主要以低危为主(57.30%,65.32%),中年组以低危、中危为主(40.68%,50.28%),老年组以中危、高危为主(29.01%,33.33%),差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论张家口地区社区获得性肺炎样综合征在季节上以秋季高发为主,在人群中以老年人为常见,且一旦发病较其他人群更为严重,发病病程也相应延长,应在临床予以重视。