深圳地区女性生殖道 HPV 感染及基因型结果分析

目的：研究深圳市宝安区女性人乳头瘤病毒（HPV）感染情况,以及不同年龄段 HPV 阳性率和各亚型的分布情况。方法采用聚合酶链式反应-反向斑点杂交法（PCR-RDB）对2011年1月至2012年12月在深圳市宝安区妇幼保健院就诊的患者（2627例）进行23种 HPV 基因分型检测。结果2627例样本中 HPV 阳性率为23．94％（629例）。其中单一低危型感染占15．10％,以 HPV43型为主;单一高危型感染占55．17％,以 HPV52、HPV16、HPV58型为主;混合感染占29．73％。15～＜21岁、21～＜31岁、31～＜41岁、41～50岁与＞50岁年龄组 HPV 感染率分别为50．0％、24．7％、20．8％、25．8％、42．1％,差异有统计学意义（P ＜0．05）。结论深圳市宝安地区 HPV 感染率为23．94％,基因型分布以 HPV 52、16、58、43型为主,15～20岁年龄段感染率高于其他年龄段。     

莫西沙星耐药的艰难梭菌多重聚合酶链反应检测和基因分型

目的：建立一种多重 PCR 方法用于莫西沙星耐药的艰难梭菌鉴定和初步基因分型。方法根据艰难梭菌 slpA 可变区间核苷酸序列的差异设计5种 slpA 基因型（gr、hr、fr、gc08和078）的特异性 PCR 引物,同时加入检测艰难梭菌管家基因磷酸甘油醛异构酶基因 tpi 的种特异性引物,构建多重PCR 方法;利用9种肠道常见的正常或致病菌验证多重 PCR 方法的特异性,利用46株分属于11个slpA 基因型的艰难梭菌参考菌株来验证方法的检测和分型能力;利用建立的多重 PCR 方法检测39株莫西沙星耐药的临床菌株,以 slpA 测序分型法为参照方法,评估该方法的临床实用性。结果多重PCR 检测9种肠道常见的正常或致病菌 tpi 和5种 slpA 基因型均为阴性;46株艰难梭菌参考菌株 tpi均为阳性,36株分属于5种靶 slpA 基因型（gr、hr、fr、gc08和078）的菌株被正确分型,10株分属于其他6种基因型的参考菌株均无法分型。39株莫西沙星耐药的艰难梭菌临床菌株 tpi 均为阳性,32株检出具体基因型,其中22株为 slpA 基因型 gc08,6株为 hr,2株为 fr,2株为078,与 slpA 测序分型结果一致;7株多重 PCR 无法分型,slpA 测序分型结果显示其基因型均不包含在多重 PCR 分型范围内。结论成功建立一种简单、快捷、临床实验室适用的艰难梭菌检测,且能够分辨出5种 slpA 基因型的多重PCR 方法;莫西沙星耐药的艰难梭菌主要为 slpA 基因型 gc08。     

地中海贫血实验室筛查指标评价

目的探讨多项实验室指标用于筛查地中海贫血(简称地贫)基因携带者的临床应用价值。方法选取在深圳市宝安区妇幼保健院体检、婚检和产检的人员1 373例,对其均进行血常规血细胞分析、血红蛋白成份分析和地贫基因诊断。以基因诊断为金标准,对已明确诊断的α-地贫组548例、β-地贫组248例、α-合并β-地贫组33例和非地贫组544例,进行红细胞参数[红细胞数量(red blood cell count,RBC)、血红蛋白(hemoglobin,HB)含量、红细胞压积(hematocrit,HCT)、平均红细胞体积(mean corpuscular volume,MCV)、平均血红蛋白含量(mean corpuscular hemoglobin,MCH)、平均血红蛋白浓度(mean corpuscular hemoglobin concentration,MCHC)和血红蛋白A2(hemoglobin A2,Hb A2)含量]比较;计算MCV、MCH和Hb A23项血液学指标联合筛查结果的灵敏度、特异度、阳性预测值及阴性预测值。结果地贫组与非地贫组比较,地贫组HB、HCT、MCV、MCH和MCHC均减低,差异均有统计学意义(P<0.05)。与非地贫组相比较,β地贫组Hb A2值明显升高(P<0.05)。MCV与MCH 2项平行联合筛查地贫的灵敏度及特异度分别为94.0%和82.9%;MCV、MCH和Hb A2-HPLC 3项平行联合筛查地贫的灵敏度及特异度为97.7%和39.2%。结论 Hb A2定量分析是筛查β-地贫极有价值的实验室指标,但对于筛查α-地贫敏感性较差,漏检率高。MCV、MCH两者平行联合或与Hb A2-HPLC三者平行联合筛查有较高的检测灵敏度,但特异度不甚理想。因此在进行地贫筛查时,需综合分析实验室各项指标,以降低漏诊率。     

杂交捕获法和PCR-RDB法检测妇女HPV感染的比较

Objective To compare hybrid capture-Ⅱ(HC2)to polymerase chain reaction(PCR)-reverse dot-blot(RDB)for detecting HPV infection in women.Methods HC2 method and PCR-RDB were applied to detecting human papillomaviral infection in female genital duct,and the test results were analyzed.Results Concordant results were found in 81.14%(400/493)samples(Kappa=0.63;95%CI,0.57-0.69).The high risk type HPV positive rate detected by PCR-RDB were 1.60%(3/187),29.85%(20/67),69.88%(58/83),86.52%(77/89)and 91.04%(61/67),respectively,when the HC2 RLU/CO of samples were＜1.00,1.00-9.99,10.00-99.99,100.00-999.99 and≥1000.00.Statistical differences were found among the five groups(χ2=289.3,P＜0.01).Cross reactions were found between HC2 high risk probe and HPV53,66,11,cp8304 and other genotypes.Conclusion There is good concordance between HC2 and PCR-RDB,though cross reaction exists in HC2.Relatively speaking,there are more influential factors for PCR-RDB.     

人乳头瘤病毒基因分型方法的建立和应用

目的 建立一种简便快捷、灵敏度高、经济实用的人乳头瘤病毒(HPV)基因分型的低密度基因芯片技术,并对该方法进行评价.方法 用低密度基因芯片技术对355例疑似HPV感染女患者检测HPV并分型;用杂交捕获Ⅱ代(HCⅡ)法进行评价.并用该法对珠江三角洲地区的730例标本进行HPV分型检测.结果 355例疑似样本中,低密度基因芯片技术和HCⅡ法分别检出211例(59.4%)和222例(62.5%)阳性标本,符合率达94.1%(334/355).低密度基因芯片技术共检测出15种常见高危型和5种低危型,其中16、52、58、56型检出率较高.结论 低密度基因芯片技术能具体分型和检测混合感染,HPV检测与细胞学检测结合.对宫颈癌筛查有重要意义.     

艰难梭菌婴幼儿分离株毒力及基因型分布研究

目的明确深圳地区婴幼儿粪便中分离出的艰难梭菌的毒力及其基因型。方法收集深圳市宝安区妇幼保健院2014-2015年分离出的49株艰难梭菌菌株,PCR检测其毒素A、B的编码基因tcd A、tcd B的携带状况,数字化PCR-核糖体分型方法进行基因分型。结果 49株艰难梭菌tcd A、tcd B携带率分别为44.9%(22/49)和59.2%(29/49),其中22株tcd A、tcd B均为阳性,7株为tcd A阴性、tcd B阳性;49株菌可分为22种核糖体型,最常见的核糖体型为RT017(7/49,14.3%),BA03(5/49,10.2%),BA16(5/49,10.2%)和BA13(4/49,8.2%)。7株RT017菌株均为tcd A-tcd B+,而最常见的tcd A~+tcd B~+菌株(44.9%,22/49)则来自RT017以外的15种核糖体型。结论深圳地区婴幼儿中分离出的艰难梭菌半数以上为产毒株,且产毒株多同时携带tcd A、tcd B基因;基因型则以RT017为主,且均为产毒素B而不产毒素A菌株。     

杂交捕获法和PCR-RDB法检测妇女HPV感染的比较

Objective To compare hybrid capture-Ⅱ(HC2)to polymerase chain reaction(PCR)-reverse dot-blot(RDB)for detecting HPV infection in women.Methods HC2 method and PCR-RDB were applied to detecting human papillomaviral infection in female genital duct,and the test results were analyzed.Results Concordant results were found in 81.14%(400/493)samples(Kappa=0.63;95%CI,0.57-0.69).The high risk type HPV positive rate detected by PCR-RDB were 1.60%(3/187),29.85%(20/67),69.88%(58/83),86.52%(77/89)and 91.04%(61/67),respectively,when the HC2 RLU/CO of samples were＜1.00,1.00-9.99,10.00-99.99,100.00-999.99 and≥1000.00.Statistical differences were found among the five groups(χ2=289.3,P＜0.01).Cross reactions were found between HC2 high risk probe and HPV53,66,11,cp8304 and other genotypes.Conclusion There is good concordance between HC2 and PCR-RDB,though cross reaction exists in HC2.Relatively speaking,there are more influential factors for PCR-RDB.     

第二代杂交捕获法诊断宫颈高度病变的临床评价

目的评价第2代杂交捕获法(HC2)检测13种高危型人乳头瘤病毒(HPV)用于诊断宫颈高度病变的效能。方法利用HC2检测292位妇女宫颈上皮细胞13种高危型HPV感染状况,以组织病理学检测结果为金标准评价HC2诊断宫颈高度病变[≥宫颈上皮内瘤变2级(C IN2)]的效能。结果≥C IN2组妇女13种高危型HPV感染率为95.56%(43/45),相似文献   

儿童肺炎支原体肺炎金属基质蛋白酶9血清水平测定及其外周血单核细胞内的基因表达

目的探讨肺炎支原体肺炎(MPP)患儿的金属基质蛋白酶9(MMP-9)血清水平及其在外周血单核细胞内的基因表达,为MMP在免疫病理机制中的作用提供依据。方法选取2015年1月至2016年8月在深圳市宝安区妇幼保健院小儿呼吸科接受治疗和随访的急性MPP患儿78例作为研究对象,为观察组。同期选取在本院进行健康体检的儿童78例作为对照组。采用酶联免疫吸附法及实时定量PCR法分别检测血清MMP-9水平以及MMP-9在外周血单核细胞内的基因表达。结果观察组急性期患儿血清MMP-9水平显著高于恢复期,同时也高于对照组,差异有统计学意义(P0.05);观察组恢复期儿童血清MMP-9水平与对照组比较差异无统计学意义(P0.05)。观察组急性期患儿的外周血MMP-9mRNA阳性表达率高于恢复期,同时也高于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。结论血清MMP-9和MMP-9mRNA水平测定对于判断病情具有重要意义。