重组酶聚合酶扩增技术(RPA)快速检测GⅡ型诺如病毒

目的建立基于重组酶聚合酶扩增(RPA)技术的GⅡ型诺如病毒快速检测方法。方法设计针对GⅡ型诺如病毒特异性保守序列的RPA引物,利用RPA检测试剂盒建立RPA扩增体系,并通过2%琼脂糖凝胶电泳对扩增产物进行分析鉴定,从而对引物扩增效率、特异性、灵敏度和稳定性进行评价。结果本研究针对GⅡ型诺如病毒特异性保守序列设计了RPA特异性引物RPAf/RPAr,利用RPA检测试剂盒建立了RPA扩增体系。引物筛选实验结果显示,RPA检测方法在扩增反应5min后即可定性检测诺如病毒。将GⅡ.4型诺如病毒、GⅡ.17型诺如病毒、GⅡ.3型诺如病毒、GⅡ.6型诺如病毒、星状病毒、MS2噬菌体、人轮状病毒和人腺病毒基因组作为模板进行特异性检测。结果显示,只有GⅡ.4、GⅡ.17、GⅡ.3和GⅡ.6型诺如病毒有特异性扩增,表明该方法特异性良好,可基本满足对GⅡ型诺如病毒的检测。灵敏度实验结果显示,该方法可检测低至106 copies/μL的诺如病毒。利用10例诺如病毒阳性粪便样品对RPA检测方法稳定性进行评价。结果表明,10例样品均被特异性扩增,表明该方法稳定较好。结论本文建立的RPA检测方法特异性强、灵敏度高、稳定性好以及可操作性强,可用于对诺如病毒的检测。     

包头市牧区水环境隐孢子虫和贾第鞭毛虫调查

目的了解包头市典型牧区水环境中隐孢子虫和贾第鞭毛虫的污染状况。方法于2016年2月至2018年9月的春、夏、秋、冬四季分别采集包头市某牧区旗1处集中式供水和2处分散式供水的饮用水、2处典型地表水和当地污水处理厂进水及出水水样各1次,进行隐孢子虫和贾第鞭毛虫检测。结果共采集饮用水样品12份,均未检出隐孢子虫和贾第鞭毛虫。地表水各个季节均有不同程度隐孢子虫和贾第鞭毛虫检出,检出率分别为50%(4/8)和37.5%(3/8)。污水厂水样在春、夏、秋季检出隐孢子虫和贾第鞭毛虫,检出率分别为42.9%(3/7)和57.1%(4/7)。结论本次调查包头市典型牧区生活饮用水未发现隐孢子虫和贾第鞭毛虫污染,而地表水和污水中隐孢子虫和贾第鞭毛虫污染较为普遍。     

包头市典型牧区健康牛沙门氏菌携带情况及其耐药性

目的研究包头市某典型牧区不同养殖方式的健康牛沙门氏菌携带及其耐药性情况。方法采集该牧区散养牛和集中饲养牛粪便样本,通过选择性培养基进行沙门氏菌的分离,通过生化反应进行鉴定;然后利用药敏纸片法进行耐药性检测。结果在197份样品中,健康牛沙门氏菌带菌率为13.20%,其中集中饲养健康牛带菌率(21.43%)显著高于散养健康牛带菌率(5.05%)(χ2=11.531,P0.05)。分离的26株沙门氏菌均对至少1种抗生素耐药,其中耐受2种及2种以上抗生素的菌株有18株(69.23%),沙门氏菌对各种抗生素的耐药率由高到低依次是四环素(80.77%)头孢唑啉(73.08%)链霉素(23.08%)磺胺甲基异恶唑/甲氧苄氨嘧啶(11.54%)氯霉素(7.69%)氨苄西林(0.00%)。结论包头市某牧区健康牛存在一定程度的沙门氏菌带菌率,其携带的沙门氏菌均至少对1种抗生素表现出耐药性,多重耐药现象严重,集中饲养牛较散养牛的健康带菌率、菌株耐药情况均要严重,相关部门应加强抗生素的规范化使用管理。     

饮水澄清消毒剂灭活水中f2噬菌体的效果观察

目的 观察一种饮水澄清消毒剂对水中f2噬菌体的灭活效果,为实际应用提供参考.方法 采用烧杯法试验和悬液杀菌试验方法,对某饮水澄清消毒剂灭活水中f2噬菌体的效果及影响因素进行了评价.结果 饮水澄清消毒剂在有效氯含量10 mg/L作用5 min条件下,能有效灭活水中f2噬菌体达到100％.pH值、水温及色度对该饮水澄清剂灭活噬菌体的效果无明显影响.结论 该饮水澄清消毒剂可以有效灭活水中f2噬菌体,消毒后水符合饮用水标准的要求.     

3种真核藻类DNA提取方法比较

目的建立一种简单、快速、高效的从自然水样中提取藻类总DNA的方法。方法通过DNA产物的浓度和纯度、DNA产物的完整性及PCR扩增的比对,对3种真核藻类DNA的提取方法 [纤维素酶法、改良十六烷基三乙基溴化铵（CTAB）法和超声波破碎试剂盒法]进行比较。结果 3种方法得到的基因组DNA均较完整,片段大小都在23 kb左右;且3种方法得到的DNA浓度均较高。CTAB法和试剂盒法提取得到的总DNA A_260nm/A_280nm的比值分别为1.767和1.824,并且A_260nm/A_230nm比值均在1.9以上,说明提取得到的总DNA纯度较高,且PCR产物经1.5%琼脂糖凝胶电泳检测得到明亮的条带。而纤维素酶法得到的DNA的A_260nm/A_280nm比值与A_260nm/A_230nm比值分别为1.617和1.522,表明盐及蛋白质污染较前两者严重。结论综合考虑后,认为CTAB方法更适合从自然水样中提取藻类DNA。     

臭氧消毒饮水中甲醛生成规律及控制方法

臭氧是一种高效广谱的消毒剂,广泛应用于诸多领域.臭氧作为饮水消毒剂,在处理含有机物的水源水时,在臭氧作用下,不饱和化合物形成臭氧化物.臭氧化物水解,不饱和键断裂,就会形成较小的有机分子.其中,醛类的代表产物甲醛,对饮用水安全性构成一定威胁[1-4].WHO规定饮用水水质指标中甲醛含量为0.9 mg/L,日本为0.08 mg/L,波兰为0.05 mg/L,澳大利亚为0.5mg/L[6].中国在新修订实施的《生活饮用水卫生标准》( GB5749-2006)[5]中规定甲醛的标准为0.9 mg/L.本实验利用腐殖酸配制试验用水,观察臭氧消毒饮水过程中甲醛的生成规律并提出相应的控制措施,为饮水消毒工艺中控制甲醛生成提供理论依据.     

利用纳米材料吸附去除饮用水中氟的研究

目的研究纳米材料对人工配水中氟离子吸附去除的规律和影响因素,为研制新型除氟材料提供一定的理论依据。方法分别选取不同纳米材料和常规除氟材料,利用静态试验对人工配水中氟进行去除效果的比较,并探讨环境因素对去除效果的影响。氟采用分光光度法进行测定。结果纳米材料的除氟效果优于常规除氟材料,试验中纳米γ-Al2O3的除氟效果较好,对氟的饱和吸附容量达到13.46 mg/g,氟的去除效果受温度影响,而受pH及常见阴离子CI-和SO42-影响小。结论纳米材料γ-Al2O3对水中氟的去除效果较好,经过进一步的研究有望应用于饮水除氟。     

包头市某牧区小学生隐孢子虫和贾第鞭毛虫感染调查

目的了解内蒙古牧区小学生隐孢子虫和贾第鞭毛虫感染情况,为预防工作提供科学依据。方法选取包头某旗小学牧区学生为对象,利用采样袋采集新鲜粪便,低温保存运至实验室。采用改良抗酸染色检测隐孢子虫,卢戈氏碘液染色检测贾第鞭毛虫。结果共采集小学生粪便样本191份,隐孢子虫总感染率为37.2%(71/191),男生和女生的感染率分别为40.0%(44/110)和33.3%(27/81),差异无统计学意义(χ^2=0.888,P>0.05);贾第鞭毛虫总感染率为14.7%(28/191),男生和女生的感染率分别为14.5%(16/110)和14.8%(12/81),差异无统计学意义(χ^2=0.003,P>0.05);隐孢子虫和贾第鞭毛虫混合感染率为5.8%(11/191),男生和女生的混合感染率分别为7.3%(8/110)和3.7%(3/81),差异无统计学意义(χ^2=1.095,P>0.05)。结论牧区生源小学生中隐孢子虫和贾第鞭毛虫感染率较高,当地卫生部门应加强卫生宣传和管理。     

臭氧灭活水中微小隐孢子虫卵囊的效果

目的评价臭氧灭活水中微小隐孢子虫卵囊的效果,为研制饮用水中隐孢子虫的灭活措施提供理论和技术依据。方法利用纯化后的微小隐孢子虫卵囊制成悬液,采用动态通入臭氧方式进行消毒试验。分别观察臭氧浓度、作用时间、水温、pH和色度对卵囊灭活效果的影响。利用DAPI和PI荧光活体染色方法进行活性评价,计算灭活率。结果提高臭氧浓度和作用时间均有利于隐孢子虫卵囊的灭活,0.3 mg/L臭氧消毒60 min,灭活率达到99.81%,3 mg/L臭氧消毒10 min,灭活率达到99.99%。水温、pH和色度均对臭氧灭活隐孢子虫卵囊有一定的影响。结论臭氧灭活微小隐孢子虫卵囊速度快、效果好,是灭活水中隐孢子虫卵囊较理想的消毒剂。