双酚A日常生活暴露与生殖中心就诊男性性功能关系的研究

目的 探讨双酚A（BPA）日常生活暴露与男性性功能的关系。方法 选取2014年9月至2015年4月在山西省妇幼保健院生殖中心门诊部因不孕不育就诊的男性作为研究对象,收集其一般人口学特征、性功能状况资料和空腹静脉血标本。应用德尔菲专家评分法计算性功能总得分,采用高效液相色谱法测定研究对象血清BPA水平。采用Spearman秩相关、秩和检验,多因素logistic回归分析进行BPA水平、影响因素、性功能指标之间的关联性及趋势分析。结果 共纳入353名研究对象,总体性功能异常率为45.0%,性欲低下（47.3%）为性功能异常的主要类型。研究对象血清BPA浓度范围为0.38~21.93 ng/ml,中位数5.79 ng/ml。血清BPA水平与总体性功能、性欲、勃起能力、射精力度均呈负相关,与早泄呈正相关。按BPA水平的四分位数分组,以低浓度组（0.38~3.79 ng/ml）为参照进行关联性分析,发现BPA水平增高可增加性功能障碍的发生风险。结论 性欲低下是男性性功能障碍的主要类型,日常暴露于较高水平的BPA可能增加男性性功能障碍。     

卵母细胞激活技术在辅助生殖技术中的临床应用

目的观察辅助激活技术对辅助生殖技术中受精低下或失败患者成熟卵母细胞的激活效果及其胚胎发育情况。方法回顾性分析2014年10月至2016年10月在山西省儿童医院妇幼保健院生殖医学中心助孕治疗、至少有1次ICSI受精失败或受精低下(受精率30%),再次行ICSI助孕时采用成熟卵母细胞激活处理的12名患者资料。12名患者共收集105枚成熟卵母细胞,全部采用钙离子载体A23187联合6-甲基氨基嘌呤(6-DMAP)进行激活处理,观察卵母细胞激活后的原核形成及胚胎发育情况。结果激活周期的受精率及卵裂率分别为63.81%(67/105)和88.06%(59/67),较既往周期的受精率[23.96%(23/96)]和卵裂率[69.57%(16/23)]均显著升高(P0.05);激活周期中可移植胚胎及优质胚胎数量较既往周期均显著提高,分别为(3.02±2.51)vs.(1.41±0.58)枚和(1.70±1.36)vs.(0.31±0.52)枚(P0.05);既往ICSI受精低下或失败的12例患者中,卵母细胞激活处理后5例患者获得临床妊娠。结论辅助激活技术可以改善ICSI受精失败或受精低下患者的受精率及胚胎发育质量。     

NIMA相关蛋白激酶7、Nod样受体蛋白3与多囊卵巢综合征炎症指标相关性研究

目的探讨卵巢颗粒细胞中NIMA相关蛋白激酶7(NEK7)和Nod样受体蛋白3(NLRP3) mRNA表达量与多囊卵巢综合征(PCOS)患者炎症指标的相关性及其预测价值。方法选取2018年8月至2019年3月来山西省儿童医院/山西省妇幼保健院生殖中心就诊的30例PCOS患者为研究组和同期由于男方因素或输卵管因素就诊的34例非PCOS不孕症患者为对照组。取卵日收集行IVF/ICSI-ET患者的卵泡液和颗粒细胞,检测卵泡液中炎症因子白介素(IL)-1β、IL-18的表达以及颗粒细胞中NEK7、NLRP3 mRNA的表达,并将NEK7、NLRP3的mRNA表达量与各指标进行相关性分析。最后应用受试者工作特征曲线(ROC)分析NEK7、NLRP3 mRNA对PCOS的预测价值。结果研究组体重指数(BMI)和获卵数显著高于对照组,且LH、LH/FSH、睾酮(T)水平亦显著高于对照组(P均<0.05)。研究组卵泡液中炎症因子IL-1β、IL-18的表达显著高于对照组,卵巢颗粒细胞中NEK7、NLRP3 mRNA的表达亦显著高于对照组(P均<0.05)。相关性分析结果显示,研究组患者卵巢颗粒细胞中NEK7和NLRP3 mRNA水平与血清基础LH、LH/FSH、炎症因子IL-1β、IL-18均呈显著正相关(P均<0.05)。ROC分析结果显示,NEK7是PCOS的有效预测因子,预测炎症的曲线下面积为0.741,临界值为1.154。结论 NEK7、NLRP3可能通过促进IL-1β、IL-18的释放影响PCOS炎症的发生及发展,且NEK7是PCOS的有效预测因子,可能为PCOS的临床治疗提供新思路。     

曲格列酮诱导肾癌细胞的凋亡

目的:探讨过氧化物酶增殖体激活的受体γ(PPAR-γ)在肾癌细胞中的表达及PPAR-γ配体曲格列酮对肾癌细胞凋亡的影响.方法:通过RT-PCR、Western blot方法,从mRNA及蛋白水平检测PPAR-γ在肾癌细胞株786-0、A498及正常肾来源的细胞株HK-2、HMCC中的表达,DNA梯度电泳、荧光显微镜观察曲格列酮诱导肾癌细胞凋亡的现象,Western blot检测Bcl-2、Bax蛋白在肾癌细胞凋亡过程中的变化.结果:PPAR-γ在肾癌细胞株中的表达高于正常肾来源的细胞株,50 μmol/L曲格列酮可以诱导肾癌细胞凋亡,伴随有Bcl-2表达的减少及Bax表达的增加.结论:曲格列酮可以诱导肾癌细胞的凋亡,PPAR-γ配体有可能成为新的治疗肾细胞癌的药物.     

他达拉非不同治疗方案对手淫取精困难患者的临床研究

目的比较他达拉非不同治疗方案对手淫取精困难患者的临床效果。方法选取本中心2012年1月~2013年5月收治的取精困难患者48例,将患者分为A、B组,每组各24例。A组患者取卵前1个月每日给予5 mg他达拉非,B组患者取卵日给予20 mg他达拉非。两组患者在取卵前1个月均配合手淫取精训练。比较两组患者取卵当日的取精成功率。结果 A组成功取精17例,取精成功率为70.83%,B组成功取精10例,取精成功率为41.67%,两组比较,差异有统计学意义（P=0.042）。结论对于取精困难患者,长期小剂量他达拉非治疗联合手淫取精训练可有效提高其取卵当日的取精成功率。     

短时受精与卵胞浆内单精子注射的临床应用研究

目的　比较采用简化的短时受精与卵胞浆内单精子注射 (ICSI)的临床应用效果 ,以了解体外受精 (IVF)时短时受精的临床应用价值。　方法　全部病例接受常规促超排卵治疗获得卵母细胞 ,根据患者接受体外受精的不同方式分为两组。短时受精组 10 5例 ,采用精卵四孔皿混合培养 ,加精后 2h将卵母细胞转移至新鲜培养基 ,12 1周期 ;对照组 112例 ,采用ICSI,133周期。分别比较两组受精卵的个数、形成胚胎数及临床妊娠率 ,并进行统计分析。　结果　短时受精组共获卵母细胞16 33个 ,正常受精 (双原核 ) 116 4个 (71.3% ) ,形成胚胎数 10 84个 (93.1% ) ,临床妊娠 4 5例 (4 2 .9% ) ;对照组共获卵母细胞 175 2个 ,形成胚胎数 10 97个 ,临床妊娠 4 8例 (4 2 .9% )。两组女方年龄差异无显著性意义 ;受精率、形成胚胎数、移植胚胎数、冷冻胚胎数及妊娠率差异均无显著性意义 (P均 >0 .0 5 )。　结论　短时受精既简便 ,有效 ,又能获得与ICSI受精相同的临床效果。     

梯度平衡法改善猪卵巢组织玻璃化保存效果

目的研究梯度平衡法对卵巢组织玻璃化冷冻后组织形态学及凋亡的影响。方法取新鲜猪卵巢切成小块,未进行任何处理的为对照组、采用梯度平衡法冷冻的为梯度平衡组、采用直接平衡法冷冻的为直接平衡组。HE染色观察3组组织形态,原位末端转移酶标记(TUNEL)技术检测细胞凋亡情况。结果与对照组相比,梯度平衡组和直接平衡组卵泡的正常率均下降(均P<0.05),但后两组比较无显著差异(P>0.05)。与对照组相比,梯度平衡组与直接平衡组的细胞凋亡率均显著增加(P<0.05),但梯度平衡组相对于直接平衡组,卵母细胞、颗粒细胞、基质细胞凋亡率(分别为14.8%vs.17.6%、13.8%vs.15.2%和15.7%vs.18.5%)均显著降低(P<0.05)。结论梯度平衡法可以减少玻璃化冻融卵巢组织过程中的细胞凋亡。     

人卵巢颗粒细胞分离培养的优化及生物学特性

目的:建立原代人卵巢颗粒细胞(hGCs)的分离培养方法,观察其生物学特性。方法:取卵日,收集hGCs,分为对照组(DMEM培养基)和实验组(DMEM培养基∶卵泡液=1∶1)进行培养。比较2组hGCs的生长状态和雌激素分泌情况。利用RT-qPCR检测Nanog、Oct4、Sox2的表达,应用流式细胞术检测CD44、CD73、CD45的表达。结果:hGCs培养24 h贴壁良好,细胞间伸出伪足。对照组和实验组分别在培养14 d和21 d后出现凋亡。实验组雌激素的分泌显著增加,第9天出现高峰,第21天显著下降。培养第7天实验组Oct4和Nanog mRNA表达显著增加。培养7 d后,CD44、CD73表达阳性, CD45表达阴性。结论:该方法简单、有效,可获得大量hGCs。培养基中添加卵泡液有益于hGCs的生长,增加培养天数。同时hGCs可分泌雌激素并具有一定的干细胞特性。     

人卵母细胞辅助激活研究进展

卵胞质内精子注射(intracytoplasmic sperm injection,ICSI)是目前治疗男性不育最有效的方法,但在ICSI周期中仍然有1%~3%的受精失败发生。近年来逐渐发展起来的卵母细胞辅助激活(assisted oocyte activation,AOA)技术在改善ICSI后受精失败患者的妊娠结局方面取得了较为明显的效果,有望成为治疗男性不育的重要辅助手段。本文综述了卵母细胞激活机制领域的研究成果,揭示了精子中的PLCξ蛋白引起卵母细胞内Ca2+震荡进而触发激活的机制,介绍了目前对ICSI受精失败患者精子激活能力的检测与诊断方法,以及不同卵母细胞辅助激活技术如电激活,Ca2+载体和Sr Cl2等激活技术的研究现状,并总结了这些技术在安全性方面所获得的证据,在此基础上对AOA技术今后的发展方向和前景作了探讨。     

Fas及Fas-L在膀胱肿瘤中的表达及意义

研究表明 ,肿瘤细胞的免疫逃逸与肿瘤的发生发展有密切关系。Ｆａｓ/Ｆａｓ Ｌ是细胞凋亡的因素之一 ,参与了肿瘤组织细胞的免疫逃逸[1] 。我们采用免疫组织化学方法检测Ｆａｓ/Ｆａｓ Ｌ在膀胱肿瘤中表达 ,探讨免疫逃逸与膀胱肿瘤的关系。报告如下。材料和方法　 41例膀胱肿瘤及 11例膀胱炎病例选自 1998年 4月～ 2 0 0 0年 1月我院经病理证实的手术切除标本 ,其中移行细胞癌 33例 ,腺癌 8例。按ＷＨＯ病理分级标准 ,Ｇ113例 ,Ｇ2 17例 ,Ｇ3 11例。按ＵＩＣＣ临床分期标准Ｔａ7例 ,Ｔ110例 ,Ｔ2 12例 ,Ｔ3 9例 ,Ｔ4 3例。标本均用 10 %福尔…