纳米二氧化硅对16HBE细胞存活率及PARP-1表达的影响

目的探讨纳米二氧化硅(SiO_2)对人支气管上皮细胞(16HBE细胞)存活率和聚二磷酸腺苷核糖聚合酶-1(PARP-1)表达的影响。方法 (1)以质量浓度为0~100 mg/L纳米SiO_2处理16HBE细胞24.0 h,以CCK-8法检测细胞存活率。(2)将16HBE细胞分为6组:溶剂对照组(予等体积溶剂处理)、微米SiO_2对照组(予终质量浓度为20 mg/L微米SiO_2处理),5、10、20 mg/L纳米SiO_2组(予相应终质量浓度的纳米SiO_2处理),姜黄素组(先予终浓度为10μmol/L的姜黄素处理2.0 h,再予终质量浓度为20 mg/L的纳米SiO_2处理)。各组细胞经处理后,分别于培养4.0、12.0和24.0 h时间点收获细胞。采用荧光实时定量聚合酶链式反应检测细胞中PARP-1 mRNA的相对表达水平,以免疫印迹法检测PARP-1蛋白的相对表达水平。结果 (1)随着纳米SiO_2处理剂量的增加,细胞存活率下降,呈剂量-效应关系(P0.01)。(2)在12.0和24.0 h时间点,纳米SiO_2刺激后,16HBE细胞的PARP-1 mRNA和蛋白相对表达水平均出现剂量依赖性下降(P0.01);与同时间点溶剂对照组比较,5、10、20 mg/L纳米SiO_2组16HBE细胞在该2个时间点的PARP-1 mRNA和蛋白相对表达水平均下降(P0.05)。在12.0和24.0 h时间点,20 mg/L纳米SiO_2组16HBE细胞的PARP-1 mRNA和蛋白相对表达水平均低于同时间点的微米SiO_2对照组(P0.05);姜黄素组16HBE细胞的12.0 h时间点上述2个指标均高于20 mg/L纳米SiO_2组(P0.05)。结论纳米SiO_2刺激可导致16HBE细胞存活率下降并呈剂量依赖性;PARP-1表达的下调可能是纳米SiO_2致16HBE增殖抑制的机制之一。姜黄素对纳米SiO_2诱导的16HBE的细胞损伤具有一定的保护作用。     

胸腺基质淋巴细胞生成素在1-氯-2,4-二硝基苯致敏诱导皮炎小鼠中的表达

目的:了解胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)在1-氯-2,4-二硝基苯(DNCB)致敏诱导皮炎小鼠中的表达,并评价TSLP在小鼠皮炎免疫反应中的作用。方法:将20只11周龄SPF级BALB/c小鼠随机分为2组(每组10只):致敏组先后接受含1.0%和0.1%DNCB的橄榄油丙酮(4∶1)溶液反复刺激背部皮肤,对照组接受基质溶液(橄榄油∶丙酮=4∶1)涂抹背部皮肤。实验期间观察小鼠皮炎症状,监测小鼠挠痒次数和皮炎症状评分,观察皮肤组织病理改变。21 d后检测2组血浆总Ig E水平;利用实时荧光定量聚合酶链式反应(q PCR)法检测皮肤、肝脏、脾脏和肾脏组织中TSLP m RNA水平,采用western-blot法分析TSLP蛋白表达情况。结果:2组小鼠的抓挠次数和皮炎症状评分分别在致敏第8天和第6天后出现差异(P0.05);致敏组小鼠血浆总Ig E水平[(132.61±14.89)μg/L]较对照组[(109.13±2.51)μg/L]显著升高(t=4.92,P0.05)。与对照组(1)相比,致敏组皮肤(1.83)、脾脏(1.06)和肾脏(1.10)组织中TSLP m RNA相对表达量均升高,而肝脏(0.90)组织TSLP m RNA相对表达量降低,但组间比较差异均无统计学意义(P均0.05)。Western-blot结果示TSLP蛋白在上述组织中的表达均无差异。结论:TSLP在DNCB致敏诱导皮炎小鼠的皮肤、肝脏、脾脏和肾脏组织中表达均无明显差异,其在小鼠皮炎免疫反应中的作用仍需进一步的研究。     

纳米二氧化硅对16HBE细胞存活率及SOD1表达的影响

目的探讨纳米二氧化硅(nano-SiO_2)对人支气管上皮细胞(16HBE细胞)存活率和超氧化物歧化酶1(Superoxide Dismutase 1, SOD1)表达的影响。方法以质量浓度为0～100 mg/L nano-SiO_2处理16HBE细胞24 h,以CCK-8法检测细胞存活率,筛选合适的后续实验处理剂量。将16HBE细胞分为6组:溶剂对照组(予等体积溶剂处理)、微米SiO_2对照组(予质量浓度为20 mg/L微米SiO_2处理),5、10和20 mg/L nano-SiO_2组(予相应终质量浓度的nano-SiO_2处理),姜黄素组(先予终浓度为10μmol/L的姜黄素处理2 h,再予终质量浓度为20 mg/L的nano-SiO_2处理)。各组细胞经处理后,分别于培养4、12和24 h时间点收获细胞。采用荧光实时定量聚合酶链式反应检测细胞中SOD1 mRNA的相对表达水平,以蛋白免疫印迹法检测SOD1蛋白的相对表达水平。结果随着nano-SiO_2处理剂量的增加,细胞存活率下降,呈剂量-效应关系,有统计学意义(P0.01)。在12和24 h时间点,nano-SiO_2刺激后,16HBE细胞的SOD1的mRNA和蛋白相对表达水平均出现剂量依赖性下降(P0.01);与同时间点溶剂对照组比较,10和20 mg/L nano-SiO_2组16HBE细胞的在上述2个时间点的SOD1 mRNA和蛋白相对表达水平均下降,差异有统计学意义(P0.05)。在4、12和24 h时间点,20 mg/L nano-SiO_2组16HBE细胞的SOD1 mRNA和蛋白相对表达水平均低于同时间点的微米SiO_2对照组(P0.05),姜黄素组16HBE细胞的上述2个指标均高于20 mg/L nano-SiO_2组(P0.05)。结论 nano-SiO_2刺激可导致16HBE细胞存活率下降并呈剂量依赖性;SOD1表达的下调可能是nano-SiO_2致16HBE增殖抑制的机制之一。姜黄素对nano-SiO_2诱导16HBE细胞损伤具有一定的保护作用。     

深圳市成人25-(OH)VD水平及其与血糖的相关性研究

目的了解深圳市企事业单位职工25-(OH)维生素D[25-(OH)VD]的营养状况,并分析其与血糖及糖化血红蛋白的相关性。方法选取2013年7~12月在深圳市某体检中心体检的深圳市机关和企事业单位员工作为研究对象,采集空腹外周静脉血,采用酶联免疫法对血浆25-(OH)VD的含量进行检测,并对血糖及糖化血红蛋白进行检测。分析检测指标的异常情况。结果深圳企事业单位人群中25-(OH)VD的平均水平为(60.98±15.92)nmol/L,25-(OH)VD缺乏或不足率为83.37%,且性别之间25-(OH)VD的营养水平及不足与缺乏率差异有统计学意义;血糖及糖化血红蛋白的平均水平分别为(5.45±0.88)mmol/L及(5.69±0.59)%;扣除年龄、性别及BMI的影响,血清25-(OH)VD水平与血糖呈负相关(r=-0.062,P0.01),与糖化血红蛋白有一定的相关性(r=-0.051,P0.01)。结论正常人群中25-(OH)VD水平与血糖及糖化血红蛋白有一定的相关性,维持人体正常25-(OH)VD水平可能对预防糖尿病的发生、降低糖尿病的患病率起到一定作用。     

直接化学发光免疫法测定血清25羟基维生素D的性能验证

目的 验证直接化学发光免疫法(CLIA)测定血清25羟基维生素D[25(OH)D]的性能。方法 用意大利DiaSorin的CLIA分析仪测定美国国家标准技术研究院血清标准品(Nist SRM 972a)、DiaSorin质控品、维生素D检测质量外部评估计划盲样(DEQAS)和门诊人群血清中的25(OH)D浓度,测试该方法的功能灵敏度、精密度、准确度、回收率、线性等指标,并检测轻微溶血、4℃下储存5天和-80℃冻存1年以上的血清25(OH)D浓度。结果 该法血清25(OH)D浓度检测的功能灵敏度4 ng/mL,日内和日间相对标准偏差(RSD)8.1%,仪器测量相对误差-3.1%～5.7%,回收率82.8%～112.9%,线性范围7.6～128.1 ng/mL;与新鲜血清相比,轻度溶血或4℃下储存5天对测定结果无影响(P0.05);-80℃冻存1年以上,测定值平均降低7.6%。该方法与常见的几种方法相比,其测定结果的偏差为-2.9%～3.6%;3个不同单位间该方法精密度、准确度和回收率的差异较小。结论 直接CLIA法测定血清25(OH)D的性能符合临床检验方法的基本技术要求,且简便、快速。     

深圳市成人２５ （ＯＨ）ＶＤ 水平及其 与血糖的相关性研究

摘要：目的　了解深圳市企事业单位职工２５ （ＯＨ）维生素Ｄ ［２５ （ＯＨ）ＶＤ］的营养状况，并分析其与 血糖及糖化血红蛋白的相关性。方法　选取２０１３年７～１２月在深圳市某体检中心体检的深圳市机关和企事 业单位员工作为研究对象，采集空腹外周静脉血，采用酶联免疫法对血浆２５ （ＯＨ）ＶＤ 的含量进行检测， 并对血糖及糖化血红蛋白进行检测。分析检测指标的异常情况。结果　深圳企事业单位人群中２５ （ＯＨ） ＶＤ 的平均水平为（６０．９８±１５．９２）ｎｍｏｌ／Ｌ，２５ （ＯＨ）ＶＤ 缺乏或不足率为８３．３７％， 且性别之间２５ （ＯＨ）ＶＤ 的营养水平及不足与缺乏率差异有统计学意义；血糖及糖化血红蛋白的平均水平分别为（５．４５± ０．８８）ｍｍｏｌ／Ｌ 及（５．６９±０．５９）％ ；扣除年龄、性别及ＢＭＩ的影响，血清２５ （ＯＨ）ＶＤ 水平与血糖呈负 相关（狉＝－０．０６２，犘＜０．０１），与糖化血红蛋白有一定的相关性（狉＝ －０．０５１，犘＜０．０１）。结论　正常人 群中２５ （ＯＨ）ＶＤ 水平与血糖及糖化血红蛋白有一定的相关性，维持人体正常２５ （ＯＨ）ＶＤ 水平可能对 预防糖尿病的发生、降低糖尿病的患病率起到一定作用。 关键词：２５ （ＯＨ）ＶＤ；２５ （ＯＨ）ＶＤ 缺乏；血糖；糖化血红蛋白；相关性；深圳市；成人 中图分类号：Ｒ１９３　　文献标识码：Ａ　　文章编号：１００９ ６６３９ （２０１８）０３ ０１９２ ０５     

不同饲料硒水平饲养大鼠的多组织内参基因筛选

目的筛选不同饲料硒(selenium,Se)水平饲喂大鼠时,不同组织中稳定表达的内参基因(reference genes,RGs)。方法 24只断乳雄性SD大鼠在缺Se饲养5周后,随机均分为4组,分别以Se含量0.01、0.25、3、5 mg/kg饲料饲喂4周后处死,取肝、睾丸、骨骼肌、脂肪组织等样品待检。以荧光定量PCR检测Actb、Atp5f1、B2m、Gapdh、Gusb、Hprt、Pgk1、Ppia、Rplp2、Rps18、Tbp、Ywhaz等12个候选内参基因的mRNA水平,以geNorm、NormFinder、BestKeeper、Delta CT和RefFinder等方法对其表达稳定性进行评价。结果各组织中稳定性排名前4的内参基因是:肝中PpiaAtp5f1Rplp2Hprt;睾丸中YwhazAtp5f1Rplp2Ppia;骨骼肌中TbpPpiaB2mRps18;脂肪组织中HprtTbpAtp5f1Pgk1;综合4种组织,则Rps18HprtRplp2Atp5f1。结论分析不同饲料Se水平饲养大鼠的目标基因表达水平时,应根据组织类型选择适宜的内参基因。     

深圳市城市结直肠癌高危人群2017—2019年肠镜筛查结果分析

目的 了解广东省深圳市城市结直肠癌高危人群2017—2019年的结直肠病变情况，为优化结直肠癌筛查策略提供参考依据。方法 收集深圳市城市重点癌症早诊早治项目2017年5月—2019年8月通过结直肠癌危险因素调查和风险评估系统评估出的40～74岁城市结直肠癌高危人群，对进行问卷调查和肠镜筛查结果分析。结果 深圳市2017—2019年共评估出城市结直肠癌高危人群6 260人，其中完成肠镜检查者2 622人，肠镜检查依从率为41.88%；参与肠镜检查且问卷信息填写完整者1 371人，检出结直肠癌3例、癌前病变152例、良性息肉473例、炎性肠病86例、良性息肉合并炎性病变38例、其他大肠疾病148例，检出率分别为0.22%、11.09%、34.50%、6.27%、2.77%、10.80%；深圳市不同特征高危人群比较，不同性别高危人群癌前病变、良性息肉和其他大肠疾病检出率不同，不同年龄、体质指数高危人群癌前病变和良性息肉检出率不同，不同新鲜水果、畜肉食用频率高危人群良性息肉合并炎性病变检出率不同，不同口味高危人群癌前病变、良性息肉和其他大肠疾病检出率不同，不同饮茶频率高危人群炎性肠病检出率不同...     

深圳市509例2型糖尿病患者常见口服降糖药物基因多态性分析

目的：探索深圳市糖尿病患者口服降糖药物相关单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphism，SNPs）的分布特征，为糖尿病患者个体化用药指导提供参考。方法：采用外周血DNA抽提/焦磷酸测序检测509例糖尿病患者四大类降糖药物4个药物相关基因位点SNPs。采用SPSS 25.0软件统计相关基因位点的等位基因和基因型的频率分布差异。参照国内外不同人群的基因型频率数据，回顾性分析深圳市2020—2021年社区糖尿病患者的降糖药物相关SNPs的分布特征。结果：PPARG、SLCO1B1的SNPs与国外人群存在较大差异，与国内报道基本相符。CYP2C9*3的SNPs与欧洲人群存在差异，但与中国人群和美洲人群相关报道基本相符。然而有机阳离子转运体OCT2的SNPs与中国南方人群存在一定的差异，但与中国北京、欧洲、美洲相关报道的情况基本相符。结论：深圳市糖尿病患者降糖药物相关SNPs分布有自身特点，临床药师及医生应根据药物相关SNPs提供个体化用药指导建议。药物基因组学的个体化用药在参考PharmGKB等数据库的同时应结合国人的特点，不能完全参考国外人群数据库。