健脾方药提取物对小鼠小肠类器官的干预

目的探讨健脾方药四君子汤多糖提取物、黄芪甲苷对小鼠小肠类器官的干预作用。方法取4~6周龄小鼠小肠约20 cm,经过清洗、剪切、消化,分离出小肠隐窝细胞团后,接种于含有多种细胞因子的基质胶中,在基质胶3D结构支撑下,培养形成具有小肠上皮样形态的立体多叶结构,即小肠类器官。光镜下观察小肠类器官的形态特征;采用免疫荧光染色后在激光共聚焦显微镜下观察E-钙黏蛋白(E-cadherin)的表达;传代2天后的小鼠小肠类器官分为3组:对照组、四君子多糖组(终浓度为100 mg/L)以及黄芪甲苷组(终浓度为10μmol/L),继续培养48 h后观察四君子汤多糖提取物、黄芪甲苷对小肠类器官出芽生长及增殖细胞核核抗原Ki-67表达。结果分离出的小鼠隐窝细胞团1天类似囊状,中心具有单个内腔;2~3天开始出芽;4~5天出芽增多,管腔结构进一步清晰,形成小肠类器官,初步建立了小肠类器官培养模式;四君子多糖组(100 mg/L)小肠类器官出芽数量较对照组明显增多(2.31±1.60vs 4.15±1.91,P<0.05);黄芪甲苷组较对照组中小肠类器官Ki-67表达明显增高。结论小肠类器官模型的构建为探讨肠黏膜修复的病理生理机制及药物干预提供了更完善的体外研究模型。四君子汤多糖提取物、黄芪甲苷的肠黏膜保护作用可能与其促进隐窝干细胞更新能力有关。     

溃结灵含药血清对大鼠结肠上皮细胞损伤模型MUC-2及TGF-α含量的影响

目的:观察溃结灵含药血清对结肠上皮细胞损伤模型MUC-2及TGF-α蛋白含量的影响,进一步探讨溃结灵促进肠黏膜损伤修复的机理。方法:TNF-α(50ng/mL)干预大鼠结肠上皮细胞6h造成细胞损伤模型,采用Elisa方法检测不同浓度溃结灵含药血清对细胞损伤模型MUC-2及TGF-α蛋白含量的影响。结果:①结肠上皮细胞损伤模型组MUC-2蛋白含量较空白对照组升高(P0.05);②溃结灵含药血清高剂量组MUC-2蛋白含量较模型对照组升高(P0.05);溃结灵含药血清高剂量组TGF-α蛋白含量较模型对照组升高(P0.01)。结论:溃结灵含药血清可促进TNF-α致结肠上皮细胞损伤模型中MUC-2、TGF-α含量升高,进而促进受损肠黏膜上皮的修复。     

雾化吸入布地奈德治疗重度慢性阻塞性肺疾病急性加重中的作用

目的:评价布地奈德雾化治疗重度慢性阻塞性肺疾病急性加重期患者的临床应用价值。方法:选择重度COPD急性加重期患者150例随机分3组,布地奈德组给予布地奈德雾化液2mg雾化吸入,每8h1次;注射甲基强的松龙组给予甲基强的松龙40mg静脉推注,每天1次;对照组不使用任何糖皮质激素。观察期为48h、7d。结果:布地奈德组、甲基强的松龙组和对照组比较,FEV1、PaO2、PaCO2改善值具有显著性差异(P<0·05);布地奈德组、甲基强的松龙组两组各项指标改善程度相似(P>0·05),但布地奈德组副作用明显低于甲基强的松龙组(P<0·05)。结论:雾化布地奈德混悬液可有效改善AECOPD的气流受限,疗效与注射甲基强的松龙相似,全身副作用小,可作为皮质激素治疗的另一种选择。     

黄芪总苷对应激大鼠胃黏膜氧自由基及褪黑素受体的影响

目的:探讨黄芪总苷对应激大鼠胃黏膜褪黑素受体基因表达及氧自由基变化的影响.方法:SD大鼠48只分为4组,即正常对照组,模型组,黄芪总苷组和雷尼替丁组,每组12只.采用水浸-束缚应激模型,观察胃黏膜损伤指数,比色法检测胃黏膜SOD活性、MDA含量,RT-PCR法测定褪黑素受体1、2亚型mRNA表达变化.结果:与正常组比较,模型组大鼠胃黏膜损伤指数明显增高,MDA含量增高,SOD活性下降,褪黑素受体1、2基因表达降低,黄芪总苷预防给药后可明显降低应激大鼠胃黏膜损伤指数(6.75±4.10 vs 16.83±4.96,P＜0.01)和MDA含量(0.45±0.07 vs 0.79±0.36,P＜0.05),升高SOD活性(110.62±26.42 vs 71.74±22.20,P＜0.05)和褪黑素受体1、2基因表达(0.86±0.12 vs 0.54±0.05,0.79±0.14 vs 0.50±0.10,均P＜0.01).结论:黄芪总苷对水浸.束缚应激大鼠胃黏膜损伤有保护作用,其保护机制可能与调节胃黏膜褪黑素受体,并参与抗氧自由基损伤有关.     

大鼠结肠上皮细胞分离及培养方法的建立

目的:建立大鼠结肠上皮细胞的原代培养方法,为结肠上皮形态及功能研究提供理想的细胞模型.方法:采用6-15日龄乳鼠,取结肠剪碎、反复清洗后,弃上清,加10 mL、0.1%Ⅰ型胶原酶和透明质酸酶联合配制的消化液,37℃消化25 min,分离上皮细胞团;吹打消化液,取上清,加入培养基重悬反复离心3次后,细胞沉淀接种于含100 mL/L胎牛血清的完全培养基中,37℃、50 mL/L CO2细胞培养箱中培养.采用差速贴壁法及相差消化法去除成纤维细胞,细胞贴壁长满瓶80%-90%后用2.5 g/L的胰酶消化液消化并传代.结果:成功分离结肠上皮细胞团且活力较高.24 h后可见部分细胞团贴壁,贴壁细胞为多角形,4-8 d逐渐融合成片,呈现明显的"铺路石"样.细胞经传代处理后成纤维细胞明显减少.免疫荧光染色及透射电镜观察鉴定为上皮细胞.冻存处理复苏后细胞状态较佳.结论:通过该法可建立较稳定的大鼠结肠上皮细胞原代培养体系,为结肠上皮生理、病理及药物作用机制提供了体外研究平台.     

血清SDC-1、HIF-1α、PGRN与AECOPD患者肺功能及预后恢复的相关性分析

目的 分析多配体蛋白聚糖(SDC-1)、缺氧诱导因子(HIF-1α)、颗粒蛋白前体(PGRN)与急性加重期慢性阻塞性肺疾病(AECOPD)患者肺功能及预后的相关性.方法 选取2019年1月至2021年1月本院收治的AECOPD患者114例作为观察组,另选取同期体检健康的志愿者48例作为对照组,收集两组临床资料及外周血2 mL,检测血清SDC-1、HIF-1α、PGRN水平,比较两组1秒用力呼气容积占预计值百分比(FEV1％pred)、1秒用力呼气容积/用力肺活量(FEV1/FVC);114例AECOPD患者依据30 d存活情况分为生存组和死亡组,对影响预后的因素进行相关性分析.结果 观察组血清SDC-1、HIF-1α、PGRN显著高于对照组(P<0.01),FEV1％pred、FEV1/FVC显著低于对照组(P<0.01);SDC-1与FEV1％pred、FEV1/FVC呈线性负相关(r=-0.635,r=-0.700,P=0.001);HIF-1α与FEV1％pred、FEV1/FVC呈线性负相关(r=-0.849,r=-0.816,P=0.001);PGRN与FEV1％pred、FEV1/FVC呈线性负相关(r=-0.643,r=-0.666,P=0.001);114例AECOPD患者存活72例,病死42例.Logistic分析结果显示,HIF-1α、PGRN是AECOPD预后不良的危险因素(P<0.05).结论 AECOPD患者血清SDC-1、HIF-1α、PGRN高于正常水平,三者与肺功能密切相关,高龄、住院时间延长、肺功能低下,血清HIF-1α、PGRN水平偏高是预后不良的危险因素.     

溃结灵对溃疡性结肠炎大鼠结肠黏膜IκB-α基因和蛋白表达的作用

目的 观察溃结灵对溃疡性结肠炎(UC)大鼠模型结肠黏膜核因子抑制蛋白-κB(IκB-α)基因表达及磷酸化核因子抑制蛋白-κB(pIκB-α)蛋白表达的作用,对其抗UC作用机制进行探讨.方法 采用三硝基苯磺酸(TNBS)法复制UC大鼠模型并进行不同剂量药物干预.采用实时定量荧光PCR方法检测结肠黏膜IκB-α基因表达和Western blot方法检测结肠黏膜pIκB-α蛋白相对表达量.结果 模型组IκB-α基因相对表达量明显低于正常组(P＜0.01);溃结灵高剂量组ⅠκB-α基因相对表达量明显高于模型组(P＜0.05).模型组pIκB-α蛋白相对表达量明显高于正常组(P＜0.01);溃结灵低、高剂量组pIκB-α蛋白相对表达量均明显低于模型组(P＜0.05).结论 溃结灵对TNBS法UC大鼠模型结肠黏膜IκB-α基因表达有上调作用及对pIκB-α蛋白表达有抑制作用,其抗UC作用的机理可能为抑制IκB-α的磷酸化,进而抑制IκB-α蛋白的降解,最终抑制核转录因子-κB的活化,减轻炎症反应.     

人性化医疗服务的探索

介绍了现代医疗服务行业新的服务理念-人性化服务，旨在医疗服务领域中一切活动以病人的需求为根本出发点，追求“以人为本”的服务理念，提高服务质量。     

肺康复训练对肺癌化疗病人肺功能、癌因性疲乏及生活质量的影响

目的探究肺康复训练对肺癌化疗病人肺功能、癌因性疲乏（CRF）及生活质量的影响。方法将行手术治疗并接受化疗的120例肺癌病人随机分为观察组与对照组,各60例。对照组给予常规医院护理干预,观察组在对照组基础上联合肺康复训练干预,比较2组6 min行走距离（6MWD）、Borg呼吸困难评分、肺功能指标改善情况及CRF程度、癌症生命质量核心问卷（EORTC QLQ-C30）评分。结果干预后,2组病人6WMT距离、Borg呼吸困难评分、肺功能指标及PFS评分均较干预前改善（P < 0.05~P < 0.01）,且观察组改善情况均优于对照组（P < 0.01）;干预后,2组病人除经济困难评分差异无统计学意义（P>0.05）外,观察组生活质量评分均高于对照组（P < 0.05~P < 0.01）。结论肺癌化疗病人给予肺康复训练干预可有效改善病人呼吸困难症状,提高运动耐力,增强肺功能,改善CRF及生活质量。     

麻仁软胶囊对便秘型IBS大鼠模型肠黏膜5-HT含量的影响

目的研究麻仁软胶囊对便秘型肠易激综合征(IBS)模型大鼠5-HT含量的影响,探讨麻仁软胶囊治疗便秘型IBS的作用机制。方法将大鼠分为中药组、西药组、模型组、正常组4组,采用冰水灌胃慢性刺激方法将前3组复制为大鼠便秘型IBS模型,观察各组大鼠粪便的数量及性状,于第14天造模成功后中药组灌中药,西药组灌西药,模型组及正常组予以正常饮食。于第28天将各组大鼠进行解剖取其部分结肠,将其做成石蜡切片,在HE染色下和SABC免疫组化染色下镜下观察各组肠组织变化及肠黏膜上5-HT的含量。结果 IBS模型大鼠5-HT表达增高,出现IBS临床症状;经麻仁软胶囊干预后,大鼠5-HT表达降低。结论麻仁软胶囊可增高大鼠肠道敏感性,其作用机制与降低大鼠结肠5-HT表达、增高肠道敏感性有关。