前列腺癌CK5^+CK8^+细胞的分选及其分子生物学特性

目的在人前列腺癌细胞系中分选CK5^+CK8^+细胞,了解其分子生物学特性。方法流式细胞术在人前列腺癌细胞系PC3和LNCaP中分选CK5^+CK8^+细胞,用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白质印迹法方法检测LNCaP细胞分选的CK5^+CK8^+细胞CK5、CK8、雄激素受体(AR)和前列腺特异抗原(PSA)的表达,细胞迁移实验检测CK5^+CK8^+细胞迁移能力,琼脂糖凝胶克隆形成实验检测CK5^+CK8^+细胞成瘤能力。采用t检验进行统计学分析。结果采用流式细胞术可以在PC3中分选出(21.3±4.6)%的CK5^+CK8^+细胞,在LNCaP中分选出(1.2±0.4)%的CK5^+CK8^+细胞。与非CK5^+CK8^+细胞相比,LNCaP中分选的CK5^+CK8^+细胞CK5 mRNA表达差异有统计学意义(t=10.435,P<0.001),CK8 mRNA表达差异无统计学意义(t=1.974,P=0.121),AR和PSA mRNA表达差异有统计学意义(t=4.317,3.232;P=0.016,0.037)。蛋白质印迹法检测得到类似结果。细胞培养7 d后,CK5^+CK8^+细胞和非CK5^+CK8^+细胞均可以在Transwell小室迁移生长,迁移细胞数分别为(60±7)个和(32±5)个,2者比较差异有统计学意义(t=6.031,P=0.004)。细胞培养14 d后,CK5^+CK8^+细胞和非CK5^+CK8^+细胞均可以在软琼脂糖凝胶中克隆性生长,阳性克隆数分别为(71±5)个和(27±3)个,差异有统计学意义(t=13.009,P<0.001)。结论人前列腺癌细胞系LNCaP和PC3都可以分选出CK5^+CK8^+细胞,LNCaP中CK5^+CK8^+细胞AR和PSA均有一定程度表达,迁移和成瘤能力增强。     

云南省2006-2010年狂犬病病毒N和G基因分子结构特征分析

目的了解云南省狂犬病毒的流行情况以及街毒株N、G基因结构特征,为有效控制狂犬病疫情提供初步科学依据。方法对云南省2006-2010年10株狂犬病街毒株N、G基因进行全基因克隆、测序,并与已知国内外代表毒株核苷酸及推导氨基酸进行序列比对及系统发育分析。结果序列分析表明所研究的10个云南毒株与Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ、Ⅶ型代表毒株N、G基因核苷酸序列同源性分别为72.1%～78.5%、58.4%～71.0%,与基因Ⅰ型毒株序列同源性为85.2%～90.1%、82.7～99.6%,云南毒株之间核苷酸序列同源性为89.3%～99.2%、86.0～99.6%。云南10个毒株均为基因Ⅰ型和血清1型毒株,分为2个进化分支,除YNTC06与GXN119和HM88单独属于分支Ⅲ外,其余云南毒株均分布在分支Ⅰ上,且进一步分为3个小亚分支。遗传进化分析表明,各毒株氨基酸位点均存在不同程度的变异,其中YNTC06在360、369、375等多个NP抗原位点存在变异;云南毒株在GP330、333位毒力决定位点未发生变异,均为强毒株。结论云南狂犬病毒属于基因Ⅰ型,存在2个分支;云南狂犬病毒NP和GP存在特异性氨基酸变异位点,其基因结构及变异、亚组群划分与地理位置无相关性。     

课堂教学有效性评价

随着课程改革的深入,课堂教学发生了巨大变化。课堂教学评价是以现代教育教学理念,现代课堂教学观为依据,运用可操作科学手段,按照一定价值标准对课堂教学各要素及其发展变化进行判断的过程[1]。课程改革为课堂教学评价带来了新挑战。为提高课堂教学有效性,我们采用以＂真（科学性）、     

阴囊内大体积表皮样囊肿1例报告并文献复习

目的:探讨阴囊内大体积表皮样囊肿的疾病特点,提高对阴囊内大体积表皮样囊肿的临床诊治水平。方法:回顾性分析1例阴囊内大体积表皮样囊肿患者临床资料,男,50岁,发现右侧阴囊内肿物40余年,呈进行性长大。右侧阴囊内可触及直径约为7.0cm大小椭圆形肿物,界清,质硬,触痛阴性。阴囊彩超提示右侧阴囊内有囊性肿物,大小约7.7cm×4.7cm×5.0cm,与睾丸界清。在腰硬联合麻醉下行右侧阴囊内肿物切除术。结果:术后患者预后良好。切除病变组织送病检,证实为阴囊内表皮样囊肿。结论:阴囊内表皮样囊肿是阴囊罕见的良性肿瘤,一般无明显不适,肿物可缓慢生长,目前确诊依赖于术后病检。对于阴囊内表皮样囊肿应尽早手术切除,但易复发,应长期随访。     

云南省边境地区禽流感H5N1亚型病毒遗传多样性分析

目的 了解云南省边境地区禽流感H5N1亚型病毒遗传多样性.方法 2009-2011年7月在云南省边境地区采集境外家禽和野生鸟类棉拭子样品,经H5/Nl亚型特异性多重RT-PCR检测,阳性样品进行病毒HA基因扩增,克隆至pMD 18-T载体测序,并与已知参考毒株进行序列比对及系统发育分析.结果 36份阳性样品病毒HA基因测序获得15种HA序列,存在2个不同进化分支(2.3.2、2.3.4),2.3.2进一步可划分为3个进化小分支(Ⅱ-1～Ⅱ-3),2.3.4进一步可划分为2个进化小分支(Ⅰ-1和Ⅰ-2).2.3.2Ⅱ-1、Ⅱ-2毒株是新出现的H5N1亚型病毒变异株.结论 2009- 2011年7月云南省边境地区H5N1亚型病毒具有遗传多样性,病毒经历了多分支(2.3.2、2.3.4)至单一支(2.3.2)的进化过程.     

5-氟尿嘧啶或卡培他滨联合奥沙利铂治疗转移性结直肠癌有效性及安全性的Meta分析

目的比较5-氟尿嘧啶（5-Fu）或卡培他滨联合奥沙利铂治疗转移性结直肠癌的临床疗效和安全性。方法以转移性结直肠癌、奥沙利铂、5-Fu、卡培他滨为检索词,查阅2011年6月前发表的有关5-Fu或卡培他滨联合奥沙利铂治疗转移性结直肠癌的随机对照研究。由2名作者各自独立对入选文献中试验设计、研究对象的特征、研究结果等内容按照预先制订的数据表进行摘录。采用RevMan4．2软件进行统计分析。结果按照筛选标准,共有6篇文献入选,全部研究共计2189例转移性结直肠癌患者。两组患者基本特征均衡可比。临床疗效方面,有效率合并相对危险度（RR）为0．92[95％CI（0．82,1．02）,P=0．121,中位无疾病进展生存时间、中位生存时间合并加权均数差（WMD）分别为-0．19[95％CI（-0．73,0．35）,P=0．49],-1．91[95％CI（-2．53,0．16）,P：0．08],综合分析结果两组间均无优劣。Ⅲ～Ⅳ级毒副作用的比较中,中性粒细胞减少的综合分析显示卡培他滨组的发生率显著低于5-Fu组,合并RR为0．24[95％a（0．11,0．55）,P=0．0007],而手足症状发生率高于5-Fu组,合并RR为2．83[95％a（1．66,4．82）,19=0．0001]。结论5-Fu或卡培他滨联合奥沙利铂治疗转移性结直肠癌疗效无优劣。在Ⅲ～Ⅳ级毒性方面中性粒细胞减少在5-Fu组更易发生,卡培他滨组主要以手足症状为主。     

Link Lubinus Classic股骨头在混合型全髋关节置换手术中的应用

目的探讨Link Lubinus Classic骨水泥固定股骨假体在混合型初次人工全髋关节置换术应用的适应证及治疗效果。方法回顾性研究2004年1月-2009年11月由同一治疗小组施行的混合型初次人工全髋关节置换术患者51例（56髋）,对Link Lubinus Classic骨水泥固定股骨假体生存率、Harris髋关节评分、步态、大腿痛等方面进行评估。放射学资料完整者46例（49髋）,对假体放射学松动率、骨水泥鞘分级等方面进行评估。结果51例（56髋）术后获随访平均36.4个月,假体生存率为96%;Harris髋关节评分术后最近1次随访Harris评分为平均95分,优42髋,良6髋,中1髋,差2髋,优良率为94%;2例为中度跛行,5例为轻度跛行,44例无跛行,无1例出现大腿痛;46例（49髋）中,无1例出现股骨假体的放射学松动。根据Barack骨水泥鞘分级标准对双髋正位X线片进行分析,A级40髋,B级6髋,C1级2髋,C2级1髋。结论Link Lubinus Classic骨水泥固定股骨假体在混合型初次人工全髋关节置换术中的应用近期随访效果良好,长期效果尚需要进一步的随访观察。     

老年病人渴望临终关怀护理

生老病死是生命活动发展的自然规律，临终是生命结束前的必须阶段。我国自2000年已跨入了老龄化社会，随着老年人的比例不断增大老年人对医疗保健护理服务的需要也日益扩大。据国内外老年人死亡率资料统计，老年人患慢性疾病，心脑血管疾病，恶性肿瘤占所有死亡原因的50％左右。这些疾病对临终老年人除遭受疾病痛苦之外，还带来了心理     

膝关节韧带损伤康复治疗的研究进展

膝关节韧带是保护膝关节及维护稳定的重要结构,主要包括前交叉韧带(ACL)、后交叉韧带(PCL)及内侧副韧带(MCL)和外侧副韧带(LCL)。在我们日常生活中经常会碰到,由于运动不当、意外事故等原因导致膝关节韧带损伤。国内对于膝关节韧带裂伤多主张手术治疗,非手术治疗主要给予中医中药治疗。国外大量文献报道认为关节囊内韧带(ACL和PCL)不发生自发性修复,临床上采用外科修复;关节囊外韧带(MCL和LCL)有较强的自愈能力,对MCL断裂不需要外科修复。康复治疗能够消炎、消肿、止痛,改善血液循环,促进组织修复,减少疤痕,防止粘连,对膝关节韧…     

云南境外禽流感H5N1亚型病毒神经氨酸酶基因进化及分子结构特征分析

目的:禽流感病毒神经氨酸酶(NA)是病毒粒子重要表面抗原之一,其抗原性差异决定病毒神经氨酸酶亚型(N1-N9)的划分。NA介导病毒对敏感细胞的侵染及协助子代病毒粒子的成熟和释放,与病毒的宿主嗜性及毒力有关。方法:对2003~2009年期间采集自云南境外家禽的H5N1亚型阳性样品中病毒NA基因进行测序,并与国内外已知代表毒株进行序列比对及系统发育分析。认识云南境外禽流感H5N1亚型病毒神经氨酸酶(NA)基因分子结构特征。结果:21份代表性病毒样品NA基因核苷酸和氨基酸序列同源性介于94.3%~99.3%、93.1%~99.3%。系统发育分析表明可划分为6个不同进化(亚)分支(1、7、9、2.4、2.3.2、2.3.4),其中进化亚分支2.3.4毒株已成为当前云南境外流行的优势毒株;所有云南境外毒株NA蛋白的49-68位氨基酸均存在缺失。结论:糖基化位点存在特有变异;云南境外毒株对Oseltam ivir(达菲)类抗病毒药物可能无耐药性。